摘要：目的探讨油酸对人正常Fb和瘢痕Fb增殖和分泌炎症介质的影响。方法体外培养人正常Fb和瘢痕Fb，分别按照随机数字表法分为7组（各组样本数为8）：空白对照组，除常规成分外培养液中不再添加其他物质；乙醇对照组，培养液中加入终浓度为体积分数2％无水乙醇；不同浓度油酸组，即0．25、0．50、1．00、2．00以及4．00mmol／L油酸组，培养液中分别加入相应终浓度的油酸（以含体积分数2％无水乙醇培养液配制）。采用锥虫蓝染色法观察各组细胞培养1～5d的生长情况。于倒置相差显微镜和透射电镜下观察2种细胞2个对照组、1．00mmol／L油酸组细胞培养2d的细胞结构，采用流式细胞仪检测2种细胞2个对照组及1．00mmol／L油酸组细胞培养2d的细胞周期。噻唑蓝法检测各组细胞培养2d的增殖情况。取各组细胞培养2d时的培养上清液，采用改良Griess法测定NO含量，ELISA法检测TNF—α、IL-6、IL-1β、IL-8含量。对数据进行多因素方差分析及重复测量设计的方差分析。结果（1）正常Fb和瘢痕Fb的空白对照组与乙醇对照组比较，各指标均无明显差别。（2）培养2～5d，正常Fb和瘢痕Fb 2．00、4．00mmol／L油酸组细胞数量均低于对应的2个对照组（F值分别为13.773、11．344，P值均小于0．01）。（3）培养2d，正常Fb和瘢痕Fb 1．00mmol／L油酸组细胞数量明显减少，部分细胞开始堆积、变圆易脱落；细胞膜不完整，线粒体空泡变性，核固缩，胞内可见脂滴。（4）正常Fb 1．00mmol／L油酸组的G0／G1期和G2／M期细胞百分比[（93．56±9．98）％、（2．01±0．75）％]显著高于空白对照组[（84．23±10．96）％、（0．37±0．16）％]，F值分别为3．026、34．751，P〈0．05或P〈0．01；S期细胞百分比为（4．42±0．87）％，明显低于空白对照组的（16．06±1．74）％，F=136．120，P〈0．01。瘢痕Fb 1．00mmol／L油酸组G0／G1期和G2／M期细胞百分比分别为（93．86±13．90）％、（1．89±0．66）％，显著高于空白对照组[（83．88±10．42）％、（0．41±0．17）％]，F值分别为3．529、32.710，P〈0．05或P〈0．01；S期细胞百分比为（3．87±0．63）％，明显低于空白对照组的（15．89±2．02）％，F=116．508，P〈0．01。（5）正常Fb和瘢痕Fb 0．50～4．00mmol／L油酸组细胞增殖率显著低于对应的2个对照组（F值分别为215．945、194．555，P〈0．05或P〈0．01）。（6）正常Fb各浓度油酸组细胞分泌NO水平明显高于2个对照组（F=30．240，P〈0．05或P〈0．01）；瘢痕Fb 1．00～4．00mmol／L油酸组细胞分泌NO水平明显高于2个对照组（F=12．495．P〈0．01）。正常Fb和瘢痕Fb 2．00、4．00mmol／L油酸组细胞分泌TNF-α、IL-6水中明显高于对应的2个对照组（FTNF-α值分别为6．911、3．818，FIL-6值分别为16．939、11．600，P〈0．05或P〈0．01）。正常Fb和癜痕Fb各浓度油酸组细胞分泌IL—1β水平显著高于对应的2个对照组（F值分别为25．117、9．137，P值均小于0．01）。正常Fb 1．00～4．00mmol／L油酸组细胞分泌IL-8水平明显高于2个对照组（F=2．717，P〈0．05或P〈0．01），瘢痕Fb 2．00、4．00mmol／L油酸组细胞分泌的IL-8水平明显高于2个对照组（F=3．338，P〈0．05）。正常Fb和搬痕Fb相同浓度油酸组各炎症因子水平比较无明显差异（F值为0．120～3．766，P值均大于0．05）。结论高浓度油酸虽能抑制瘢痕Fb增殖，但同时也抑制正常Fb增殖，且高浓度油酸能同时促进正常Fb和瘢痕Fb分泌炎症介质，从而导致过度、持续的炎症反应，不利于创面愈合。

摘要：目的观察谷氨酰胺如何通过促进骨骼肌MG53二聚化,从而对严重烧伤小鼠骨骼肌膜修复产生影响,并探讨其作用机制。方法(1)动物实验。按随机数字表法(分组方法下同)将179只6~8周龄BALB/c雄性小鼠分为假伤组(43只)、烧伤组(73只)、烧伤+谷氨酰胺组(63只)。将假伤组小鼠背部致假伤,将烧伤组和烧伤+谷氨酰胺组小鼠背部造成Ⅲ度30%体表总面积烫伤(以下称烧伤)。烧伤+谷氨酰胺组小鼠灌胃谷氨酰胺1mg/kg,另2组小鼠灌胃等量氨基酸溶液,每天1次,持续14d。伤后12h,取10只烧伤组小鼠制备烧伤血清,用于后续细胞实验。假伤组在伤后即刻取10只小鼠,烧伤组和烧伤+谷氨酰胺组分别在伤后5、10、14d各取10只小鼠,心脏采血制备血清,然后处死取整块腓肠肌。伤后10d,3组分别另取6只小鼠处死后取整块趾短屈肌。伤后5、10、14d,3组分别另取9只小鼠处死后取整块腓肠肌。称取整块小鼠腓肠肌质量,考马斯亮蓝法检测小鼠腓肠肌总蛋白含量;双光子激光肌膜打孔检测小鼠趾短屈肌肌膜修复功能;放射免疫分析检测小鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)含量;采用非还原性电泳-蛋白质印迹法检测小鼠腓肠肌中MG53二聚体及单体表达,蛋白质印迹法检测小鼠腓肠肌中内质网应激标志蛋白CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)蛋白表达。(2)细胞实验。体外培养小鼠骨骼肌前体细胞C2C12,选第2代细胞进行实验。将细胞分为正常对照组、烧伤血清组、烧伤血清+谷氨酰胺组,每组3皿,每皿1×10^3个细胞,正常对照组细胞加入1mL含有体积分数10%胎牛血清的DMEM培养液,烧伤血清组细胞加入1mL含有体积分数10%烧伤血清的DMEM培养液,烧伤血清+谷氨酰胺组细胞加入1mL含有体积分数10%烧伤血清及4μL终物质的量浓度为8mmol/L的谷氨酰胺的DMEM培养液。培养24h后,同前检测小鼠骨骼肌前体细胞分化后肌细胞膜修复功能。另取细胞同前分组及培养,每组3孔,每孔1×10^5个细胞,培养24h后同前检测细胞中MG53二聚体及单体表达及细胞中内质网应激标志蛋白表达。对数据行析因设计方差分析、单因素方差分析、LSD-t检验、SNK检验。结果动物实验。(1)与假伤组比较,烧伤组伤后5、10、14d小鼠腓肠肌质量和总蛋白含量均明显降低(P0.05)。与正常对照组(58.5±1.8)比较,烧伤血清组培养24h细胞MG53二聚体表达明显降低(14.1±1.4,P<0.05),与烧伤血清组比较,烧伤血清+谷氨酰胺组培养24h细胞MG53二聚体表达明显升高(30

摘要：皮肤是维持机体内环境稳定,抵御外界环境刺激和病原菌入侵的重要屏障,同时也是烧创伤过程中最容易受损的器官。大面积皮肤缺损,皮源有限,无法自行恢复原有的结构和功能,而且易引起诸多严重并发症,直接危及患者生命。皮肤替代模式着力于研究修复、替代皮肤缺损的天然或人工合成的类皮肤结构,经历了从传统敷料到组织工程皮肤的演变。本文就皮肤替代模式的研究现状及发展前景进行综述。