摘要：体外诱导肝样细胞(HLC)是获取大量具有应用价值的肝细胞的有效途径之一,这些HLC可以用于构建疾病模型、药物设计和药物毒理学评价等。目前,HLC的体外诱导主要通过引入外源转录因子、细胞因子或小分子化合物组合的处理。小分子化合物因其结构多样性、时间和剂量的可控性及操作上的便利和安全等优势,让科学家们致力于筛选小分子化合物来取代外源转录因子和细胞因子,其在再生医学领域的应用前景广阔。本文主要对体外诱导多能干细胞及其他成体细胞分化成HLC的研究进行概述,并总结了小分子化合物在体外诱导HLC中的应用,以期为HLC的体外诱导研究提供思路和借鉴。

摘要：谷氨酰胺转移酶(TGase)通过催化蛋白质的谷氨酰胺残基与赖氨酸残基之间形成ε-(γ-谷氨酰基)赖氨酸异肽键,或在与肽结合的谷氨酰胺残基处掺入伯胺,促进蛋白质分子内和分子间的交联,形成网状的高分子聚合物,参与多种重要的生物学活动。本研究旨在克隆和表达长角血蜱(Haemaphysalis longicornis)的谷氨酰胺转移酶基因(HlTGase,GenBank登录号为KX59300),并分析重组蛋白质的活性,评估其可能的应用价值。首先从长角血蜱上海株的成虫提取总RNA,根据表达序列标签的序列信息,设计引物扩增并克隆HlTGase基因,以质粒pPICZC为表达载体,将该基因在毕赤酵母中重组表达,进而对其编码蛋白质的分子特征及可能的应用价值进行评估。结果显示HlTGase基因的开放阅读框为2 262bp,编码了一条756aa的多肽链,该多肽链具有四个谷氨酰胺转移酶结构域,理论相对分子质量为84.6ku;系统发育树显示其与果蝇的谷氨酰转移酶亲缘关系最近;在毕赤酵母中成功表达的重组蛋白质具有谷氨酰胺转移酶的活性,能催化酪蛋白交联成较大的分子。本研究成功地用酵母表达了长角血蜱谷氨酰胺转移酶,重组蛋白质有催化蛋白质交联的活性,具有一定的应用前景。

摘要：目的长角血蜱(Hemaphysalis longicornis)不仅吸食家畜血甚至人血,还是多种疾病的传播媒介,对该蜱的研究具有重要的医学和兽医学意义。在大肠杆菌中表达长角血蜱的谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase)(HlGPx),为该酶在长角血蜱中的生理作用研究奠定基础,为该病媒的免疫防控提供参考。方法根据长角血蜱EST文库提示的片段序列的信息,设计引物采用PCR方法从长角血蜱成蜱的cDNA中扩增谷胱甘肽过氧化物酶基因。利用定点突变将该基因编码序列中一个编码硒半胱氨酸的密码子TGA突变为通用半胱氨酸密码子TGC,与表达载体pGEX-4T-1重组,转化BL21(DE3)pLysS,IPTG诱导表达,SDS-PAGE及免疫印迹分析。结果成功获得了长角血蜱谷胱甘肽过氧化物酶全长序列,突变后在大肠杆菌中诱导表达了约51kDa的重组蛋白,Western-blot显示表达产物与抗GST抗体有很强的交叉反应。结论突变的HlGPx可以在大肠杆菌中表达并可用于下一步制备免疫血清及功能分析。

摘要：利用透射电镜研究了中国血蛤成熟精子的超微结构,研究结果表明中国血蛤的精子为原生型,由头部、中部和尾部构成.精子头部由顶体、亚顶体腔和细胞核组成.顶体呈圆锥形,电子密度比较均匀,顶体长度约为细胞核长度的5/8;亚顶体腔内含有中等电子密度物质;细胞核呈圆柱形,核长度为(1.36±0.05)μm,核宽度为(1.24±0.07)μm(n=42).精子中段由4个近椭圆形的线粒体和2个相互垂直的中心粒组成.尾部鞭毛为典型的"9+2"结构.

摘要：以人教版和北师大版高中生物学必修1“细胞的基本结构与功能”为例,利用ISM法从宏观上分析教材的编写路径、核心要素等;并基于课标,从微观上比较教材结构编排、内容选择和栏目设计,旨在为教学和教材编写提供参考。

摘要：利用流式细胞术对西施舌(Coelomactra antiquata)、波纹巴非蛤(Paphia undulata)、双线紫蛤(Sanguinolaria diphos)3种双壳贝类的血细胞组成进行分析,结果表明3种贝类血细胞都可分为透明细胞、小颗粒细胞和大颗粒细胞3个亚群.西施舌的血细胞中,透明细胞占11.02%,小颗粒细胞占71.98%,大颗粒细胞占7.56%.波纹巴非蛤的血细胞中,透明细胞占26.41%,小颗粒细胞占49.17%,大颗粒细胞占14.95%.双线紫蛤的血细胞中,透明细胞占4.87%,小颗粒细胞占67.70%,大颗粒细胞占28.85%.

摘要：以“免疫调节”单元教学为例,依据课程思政教学规律,按照教学准备、教学过程、教学评价的顺序依次展开单元教学设计,将思政元素分为科学精神、政治认同、家国情怀、公民品格、法治意识、文化自信、全球视野等维度,并从分析单元学习内容、挖掘梳理思政元素、设计课程与思政目标、依附知识创设情境、融入元素渗透教学、记忆固定、价值内化7个环节将“思政元素”融入生物学教学中,达成生物学课程的育人目标,为高中生物学课程思政教学提供案例。

摘要：为研究从蓝莓中提取花青素的最佳方法,采用微波-乙醇法处理原料蓝莓皮.在单因素设计的基础上,选取提取时间、微波功率、乙醇体积分数为自变量,以蓝莓花青素提取率为响应值,运用响应面法研究各自变量及其交互作用对蓝莓花青素提取率的影响.结果表明:微波-乙醇法提取蓝莓花青素的最佳工艺条件:提取时间4.15 min,乙醇体积分数65.8%,微波功率440 W,料液比为1∶20,在此条件下花青素提取率为87.07%,与预测的相对误差小,回归模型拟合情况较好,预测能力良好.

摘要：背景:建立一种科学可靠、简便可行,既可以人为进行干预,又不会影响牙齿继续发育的体外培养模式对于了解人类牙齿发育的组织学特点至关重要。目的:将流产人胚胎12周的磨牙牙胚植入到裸鼠肾囊膜下培养,观察其成牙情况,建立人牙胚再生的培养模式。设计、时间及地点:细胞水平的动态观察实验,于2005-03/2006-12在福建师范大学生命科学学院和发育与神经生物学福建省高校重点实验室完成。材料:12周流产人胚胎由福州市第二人民医院妇产科提供,6～10周龄Blab/c裸鼠。方法:无菌条件下分离新鲜的12周流产人胚胎下颌,分离磨牙牙胚。将牙胚移植到裸鼠肾囊膜下分别培养4,8,12和16周,取移植块。主要观察指标:以苏木精-伊红染色和Azon法染色后进行形态学观察。结果:生长4周的人牙胚内,可以观察到造釉器和牙乳头的细胞发生形态改变,牙上皮细胞和间充质细胞开始极化,胞体变长形成前成釉质细胞和前成牙本质细胞。生长8周时,前成釉质细胞和前牙本质细胞的极化变得更加明显,细胞已变成高柱状,在未来牙尖区域可发现少量牙本质的形成。培养12周时,可见连续完整的牙本质。生长16周的人牙胚,已经形成连续完整的成釉质细胞,牙釉质、牙本质和成牙本质细胞层。结论:肾囊膜是人牙胚组织体外培养的良好模式。

摘要：设计与酿酒酵母编码乙醛脱氢酶ALD4基因ORF两侧序列同源的删除组件引物,以质粒pUG6为模板进行PCR构建带有Kanr选择标记的删除组件。通过醋酸锂转化法将删除组件导入酿酒酵母菌,采用G418筛选阳性克隆子,将质粒pSH65转入阳性克隆子。半乳糖诱导pSH65表达Cre酶切除Kanr基因,在ALD4基因ORF处留下1个loxP位点,通过2次的转化筛选验证获得ALD4双倍体基因缺陷型突变株Y01-ALD4。