摘要：目的　克隆大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶 (CD)基因 ,构建真核载体并转染食管癌细胞系 EC1 0 9,观察大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶 / 5 -氟胞嘧啶 (CD/ 5 - FC)自杀基因系统杀伤肿瘤细胞以及对放射治疗的增敏效应。　方法　根据 Genbank数据库提供的 CD基因核苷酸序列 ,设计并合成一对引物 ,采用PCR方法 ,从大肠杆菌基因组 DNA中扩增出 CD基因 ,与pc DNA3.1定向连接 ,构建受控于人巨细胞病毒启动子的重组真核载体 pc DNA3.1 - CD,并用限制性内切酶、PCR和DNA测序进行鉴定 ,用脂质体转染法转染食管癌细胞系EC1 0 9细胞 ,用 G4 1 8筛选后获得阳性克隆株 EC1 0 9- CD,经PCR进行鉴定 ,CD/ 5 - FC体系对 EC1 0 9细胞的杀伤效应和杀伤时的旁观者效应以及对放射治疗的增敏效应 ,MTT法检测细胞存活比率。　结果　克隆大肠杆菌 CD基因 ,构建真核表达载体 ,经限制性内切酶酶切、PCR扩增和 DNA测序证实其正确性 ,CD基因转染 EC1 0 9细胞后 ,经 G4 1 8筛选后获得阳性克隆株 EC1 0 9- CD,经 RTP- CR分析表明 CD基因已转入 EC1 0 9细胞并开始转录。体外实验表明 ,CD/ 5 - FC体系的旁观者效应及对放射治疗增敏效果明显。　结论　pc DNA3.1 - CD真核表达载体构建及转染 EC1 0 9细胞成功 ,CD/ 5 -