摘要：目的探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者是否存在夜间呼吸事件相关的呼吸道炎症反应。方法对31例OSAHS患者(分为OSAHS吸烟组15例和非吸烟组16例)和10名健康对照者(健康对照组)采用自行设计的呼出气冷凝液(EBC)收集器收集晨起即刻和睡前的EBC,应用酶联免疫技术测定EBC中白细胞介素6(IL6)的含量,并进行统计学分析。结果(1)睡前IL6水平OSAHS吸烟组[(2.5±1.0)ng/L]、非吸烟组[(2.3±0.8)ng/L]、健康对照组[(2.7±1.0)ng/L]比较差异无统计学意义(F=0.515,P>0.05)。晨起IL6水平OSAHS吸烟组[(3.7±1.9)ng/L]和非吸烟组[(3.1±1.2)ng/L]均高于健康对照组[(2.0±0.8)ng/L],差异有统计学意义(P0.05)。(2)晨起IL6水平OSAHS吸烟组和非吸烟组均较睡前显著增高(P<0.05);而健康对照组晨起IL6水平较睡前降低,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)晨起IL6的浓度与呼吸暂停低通气指数(AHI)、氧减饱和指数(ODI4)呈正相关(r值分别为0.441、0.533,P均<0.05),与夜间最低血氧饱和度(LSaO2)呈负相关(r=-0.529,P<0.05)。结论EBC中IL6水平的高低与病情严重程度有关,故可作为OSAHS气道炎症反应的一项重要监测指标。

摘要：目的研究基因沉默多配体蛋白聚糖(syndecan-2,SDC2)抑制转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)介导的非小细胞肺癌A549细胞发生上皮间质转化(epithelial interstitial transformation,EMT)的作用机制。方法设计靶向SDC2的小干扰RNA(small interfere RNA,siRNA),采用TGF-β1诱导A549细胞发生EMT,并予以SDC2-siRNA预处理。划痕实验检测细胞迁移,明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP)含量;免疫印迹法检测E-钙黏蛋白、波形蛋白、Snail蛋白的表达。结果与对照组比较,TGF-β1诱导组细胞迁移能力更强,MMP活性更高,E-钙黏蛋白表达下调,而波形蛋白、Snail蛋白表达上调(P<0.05)。与TGF-β1诱导比较,SDC2-siRNA组能够抑制细胞迁移、MMP活性、波形蛋白和snail蛋白的表达,同时上调E-钙黏蛋白的表达(P<0.05)。结论基因沉默SDC2能够抑制TGF-β1介导的EMT。

摘要：目的研究siRNA-SRF对肺癌A549增殖和侵袭能力的影响。方法应用RNAi技术基因沉默SRF,观察其对肺癌A549细胞增殖和侵袭的影响。设计并合成4条siRNA(SRF-900,SRF-901,SRF-1107和SRF-1649)。采用Realtime PCR筛选沉默效率最高的siRNA用于后续研究,采用免疫细胞化学染色和western blot进行验证。采用CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,transwell小室检测细胞侵袭能力。结果设计合成的4条针对SRF的siRNA(900、901、1107、1649)均能有效下调A549细胞SRF mRNA的表达,分别为空白对照组的56.4%、36.4%、25.0%和53.6%,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫细胞化学染色显示SRF定位于细胞核,应用siRNA后SRF阳性染色显著减少,Western blot结果显示转染siRNA后SRF蛋白下调为空白对照组的40.1%,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组、阴性对照组和转染对照组相比,siRNA-1107转染组细胞增殖明显受抑,抑制率为64.24%,细胞周期S期比例明显下调,侵袭细胞数为空白对照组的41.7%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用RNA干扰技术基因沉默SRF能够显著抑制A549细胞增殖和侵袭能力。

摘要：目的呼出气冷凝液(EBC)检测是评价气道炎症和氧化应激程度的一种无创手段。本研究旨在设计一种收集EBC的装置并探讨其可行性及临床应用价值。方法收集EBC的装置由三部分组成:压缩制冷系统,取样管及活塞,三通管及单向阀。通过测量10名志愿者和10例阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者在不同时间和不同温度收集EBC的量,来确定收集EBC的最佳时间和温度,并对50例OSHAS患者进行试验进一步验证收集效果。结果在制冷温度-18℃,时间15分钟情况下,收集EBC适宜。在上述时间和温度下,50例OSAHS患者收集EBC的量平均为1.8ml±0.87ml。(2)收集EBC的量与每分通气量有关,与潮气量无关。结论上述装置收集EBC效果好、简便、安全、重复性好,适合临床使用。