摘要：目的:利用CRISPR/Cas9系统在树鼩骨骼肌卫星细胞中敲除p53基因并检测其增殖活性。方法:通过生物信息学方法对树鼩和15种哺乳动物的p53蛋白氨基酸序列进行同源性分析,根据树鼩基因组信息设计可编辑树鼩p53突变位点sgRNA,构建lenti CRISPR v2-sgp53基因编辑重组质粒,用293T细胞进行慢病毒包装,感染树鼩骨骼肌卫星细胞,嘌呤霉素筛选多克隆细胞并扩增;通过测序确定基因编辑效果。采用CCK8法检测细胞增殖活性,采用western blotting验证p53蛋白表达水平。结果:与人p53和小鼠p53氨基酸序列同源性(96.92%)相比,人p53和树鼩p53的氨基酸序列同源性(98.21%)更高。进化树分析显示,与小鼠相比,人与树鼩的亲缘关系更近。成功构建了3个靶向树鼩p53编辑的重组载体:lenti CRISPR v2-sgp53-g1、lenti CRISPR v2-sgp53-g2、lenti CRISPR v2-sgp53-g3,均成功在树鼩骨骼肌卫星细胞上实现p53基因编辑产生突变,导致p53功能丧失,p53的突变提高了树鼩骨骼肌卫星细胞的增殖能力。经药筛后的树鼩骨骼肌卫星细胞p53基因敲除成功,p53蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论:本研究利用CRISPR/Cas9系统成功使树鼩骨骼肌卫星细胞p53基因突变、功能丧失,为后续树鼩p53基因敲除模型的建立提供了重要的分子生物学基础。

摘要：目的基于世界卫生组织国际临床试验注册平台(ICTRP)、中国临床试验注册中心(ChiCTR)和美国国立卫生研究院临床试验注册平台(***)数据,对血管性认知障碍(VCI)临床试验注册情况及发展趋势进行总结和分析。方法检索ICTRP、ChiCTR及***平台自建库以来至2022年12月31日VCI的临床试验资料。由2名研究者独立筛选文献、提取资料后,从纳入试验的注册概况、研究设计、干预措施、观察指标等方面进行描述性分析。结果经筛选,最终纳入177项VCI相关临床试验,整体注册情况呈波动式增长趋势,ChiCTR(67项)和***(87项)是其主要注册平台,中国(110项)在申请VCI相关临床试验中占主要地位,北京(38项)、上海(11项)、湖北(8项)及台湾地区(8项)为我国VCI研究主要热点省市;该领域研究以干预性研究为主(132项),随机、盲法运用较普遍,设计模式以随机平行对照(110项)为主,各研究间样本量差异较大,且大多研究未注明临床试验阶段(81项),干预措施以药物疗法对比安慰剂为主,非药物疗法研究占比较少,观察指标主要采用认知能力量表及日常生活质量测评量表。结论目前VCI研究处于上升发展阶段,非痴呆型VCI、血管性轻度认知障碍研究及非药物疗法研究待拓展空间较大,国际及国内地区间应加强合作以产出更多VCI研究高质量循证证据。

摘要：脊髓损伤(spinal cordinjury,SCI)是一种严重的神经系统疾病,其主要的临床治疗包括急救处理、手术、药物治疗和康复治疗。常规的药物治疗存在难以穿越血脊髓屏障(blood-spinal cordbarrier,BSCB)、不能靶向受损的神经组织的问题。纳米递送系统具有良好的可控释放特性和靶向脊髓组织的能力,可以克服常规给药方式的不足,通过精细化设计组装和外表修饰赋予纳米递送系统出众的治疗效果。本文综述了在SCI中纳米粒子用于药物递送的研究进展,并着重介绍在SCI药物递送系统中的靶向策略及具有运用前景的纳米粒子及其各自特性与局限性,以及将纳米递送技术应用于临床SCI修复领域所需克服的努力与障碍。

摘要：目的 调查并分析广州市某三甲中医医院住培医师价值观现状及影响因素,为今后住院医师规范化培训规划的制订提供依据。方法 设计中医住培医师价值观认知现状调查表并进行调查。结果 大部分住培医师认为开展价值观教育有必要,对案例分享、专题讲座、理论教授等价值观教育方式较为认可;影响价值观教育工作开展的因素为培训内容的实习性、领导的重视程度等。结论 医院针对目前住培医师价值观现状,应适度调整现有价值观教育内容,将中医优秀文化与思政教育相结合。

摘要：将课程思政融入教学,是实现“立德树人”根本任务的基本要求,亦是提高教学质量和水平的重要手段。诊断学是连接基础医学与临床医学的桥梁课程,是医学生学习临床各专业的基础。基于课程思政上好诊断学第一节课,对医学生今后学习掌握好诊断学、开展各专业学习以及树立良好价值观和道德观具有重要引导意义和作用。文章基于课程思政理念,从教学目标的设定、学情分析、策略制订、教学设计与实施、课程思政案例等方面浅谈如何上好诊断学的第一节课。

摘要：诊断学是医学院校重要的专业基础课程,在医学生的知识体系培养中发挥着重要的桥梁作用,亦是连接中西医学现代临床诊疗和医学生培养的关键环节。其拥有丰富的课程思政内容以供挖掘和运用,在中医院校医学生培养中有着特殊的课程思政作用。诊断学课程思政的建设将更好地发挥其基础与临床、现代医学与中医学的桥梁作用,对实现培养合格中西医结合临床人才具有重要的基础作用。文章结合团队课程思政建设,从优化课程设计、教师团队建设、专业班级学情分析、思政内容挖掘等方面,叙述诊断学课程思政建设的内容和体会。

摘要：目的探讨碳水化合物磺基转移酶11(CHST11)对肾透明细胞癌(ccRCC)细胞增殖、迁移、侵袭生物学功能的影响。方法使用癌症基因组图谱(TCGA)数据库探究ccRCC组织与癌旁组织中CHST11基因的表达差异,分析CHST11表达水平与ccRCC分期、分级、预后的相关性;收集2021年1月至2021年10月在山西医科大学第一医院泌尿外科行手术切除的35例ccRCC和癌旁组织,采用荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、免疫组织化学和蛋白质印迹法(Western blot)检测ccRCC组织、癌旁组织及ccRCC细胞系中CHST11基因和蛋白表达水平;采用RNA干扰技术构建CHST11低表达的786O、769P细胞系;采用细胞计数试剂盒(CCK-8)实验方法检测细胞的增殖能力,采用Transwell实验方法检测细胞的迁移和侵袭能力。使用Graphpad Prism 9.0进行数据分析,Student’s t检验用于两组间比较,单因素方差分析用于多组间比较。结果生物信息学分析表明CHST11在ccRCC组织中mRNA表达水平高于癌旁组织(4.459±0.060比2.437±0.738,t=15.818,P<0.01),并且与患者预后生存率明显相关[风险比(HR)=1.490,P<0.01];实验结果表明,CHST11在ccRCC组织中,mRNA(1.865±1.705比1.000±0.956,t=4.949,P<0.01)和蛋白表达水平(1.989±0.353比1.000±0.539,t=4.949,P<0.01)高于癌旁组织;CHST11主要定位于细胞质与细胞膜,敲减CHST11基因可抑制ccRCC细胞增殖、迁移与侵袭的能力。结论CHST11在ccRCC中发挥促癌作用,沉默CHST11基因可抑制ccRCC细胞增殖、迁移与侵袭的能力。

摘要：目的基于CRISPR/Cas9技术构建前枯草杆菌蛋白原转换酶9(Preprotein convertase subtilisin/kexin type9,PCSK9)基因敲除小鼠模型并对其表型进行初步验证。方法利用非同源末端连接(NHEJ)修复引入突变的方式,针对PCSK9基因靶序列设计单链向导RNA(sgRNA),将sgRNA和Cas9 mRNA显微注射到C57BL/6J小鼠受精卵,获得F0代敲除小鼠,通过繁育及基因型鉴定获得PCSK9基因敲除(PCSK9 KO)纯合子小鼠。采用PCR方法对PCSK9 KO小鼠进行基因鉴定,Western Blot检测肝组织PCSK9及低密度脂蛋白受体(LDL-R)蛋白的表达,同时检测心、脑、肾、脂肪组织中的PCSK9蛋白表达水平,q-PCR检测PCSK9的mRNA表达水平。采用酶法检测血清中总胆固醇(TC)及甘油三酯(TG)水平。结果PCR产物凝胶电泳以及PCSK9蛋白及mRNA表达结果表明成功获得全身性PCSK9基因敲除小鼠,肝组织LDL-R(3.42±0.56)蛋白表达显著增高。与WT组相比,PCSK9小鼠血清TC(90.75±17.81 mg/dL vs 54.19±2.42 mg/dL)、TG(81.26±11.98 mg/dL vs 50.92±11.93 mg/dL)显著降低(P<0.001)。结论基于CRISPR/Cas9技术成功构建获得PCSK9基因敲除小鼠,敲除PCSK9基因通过上调肝脏LDL-R蛋白显著降低血脂水平。

摘要：当下,临床实践中技术与人文总是“两张皮”,医疗纠纷愈演愈烈,不仅阻碍医患和谐关系的构建,还影响着临床医生人格的塑造,上述临床问题长期存在,驱动着“临床人文胜任力”的产生。医学生是医疗队伍未来的主力军,中医内科学专业学位研究生更是中医院校医学研究生教育改革的重心,通过推进落实中医内科学专业学位研究生课程思政建设,探索出能够提升中医内科学专业学位研究生临床人文胜任力的教学路径,完善课程思政测评体系,是当下中医院校医学教育的新方向。

摘要：现代临床医疗理念趋向精准化、微创化发展。脊柱外科手术因其特殊的解剖位置,毗邻重要血管、神经,更加需要临床操作的安全性和准确性。3D打印技术以3D图像数据为基本数据,通过专用3D打印计算机软件设计、规划所需3D数字模型,导入打印机后可应用多种材料进行实物打印。3D打印技术是数字信息技术、数字工业技术、生物化学材料等前沿科技结合体,广泛应用于航天材料、工业制造、生物研究以及临床医疗等领域,在临床医疗应用中涉及数字解剖模型构建、器官实物打印、人工假体置换、导航板设计等方面。3D打印导航板技术可以根据临床需要预先规划并设计术中导航通道,具有精准导航、安全定位等特点,在脊柱外科中有巨大发展前景。本文就3D打印导航板在脊柱外科中的研究进展做一综述。