摘要：目的 建立能鉴别诊断恶性疟原虫间和日疟原虫的ＰＣＲ检测方法。方法 根据红内期疟原虫ＳＳＵｒＲＮＡ基因序列，设计合成两对引物，采用ＰＣＲ技术，检测８９份门诊“四热”病人血样，并与镜检法进行比较研究。结果 恶性疟原虫血样能扩增出２０５ｈｐ的特异带．间日疟原虫血样能扩增出１２０ｂｐ的特异带，ＰＣＲ检测的阳性率为７４．１６％，镜检法为６８．５４％，ＰＣＨ法与镜检法的符合率为９４．３８％。结论ＰＣＲ检测的敏感性和特异性均优于镜检法．

摘要：为获得大量的人胰岛素样生长因子 1(humanInsulin likeGrowthFactor 1,hIGF 1)产品 ,构建了hIGF 1原核表达系统。设计引物 ,引入NdeⅠ和HindⅢ酶切位点 ,以人工合成构建的 pUCIGF质粒为模板 ,PCR扩增hIGF 1基因。酶切后 ,克隆于原核表达载体pRSETB中 ,构建 pRSET IGF重组质粒 ,转化入大肠杆菌BL2 1(DE3)进行表达。带有重组质粒 pRSET IGF的大肠杆菌BL2 1(DE3)经IPTG诱导表达后 ,SDS PAGE分析表明 :可表达出相对分子质量 780 0 0的蛋白 ,重组蛋白以非融合、可溶性形式表达 ,表达量占菌体总蛋白量的 10 %～ 2 0 % ,Western印记表明重组蛋白具有hIGF 1的抗原活性。构建的 pRSET IGF重组质粒成功地在大肠杆菌BL2 1(DE3)中高效可溶性表达 。

摘要：为了探讨含Ｔ、Ｂ淋巴细胞双重激活表位的重组复合症疾抗原的免疫原性和保护作用，作者设计合成了编码恶性疟原虫红内期３个保护性抗原位点和２个外源性Ｔ细胞激活位点的复合基因ＨＧＦＣ，并构建了多连体复合基因ＨＧＦＣＡＣ。两种复合基因分别与表达载体ｐＷＲ４５０－１重组，并在大肠杆菌中表达出含外源蛋白和β－半乳糖苷酶部分氨基酸的融合蛋白（分子量分别为６５０００和７７０００），表达量为３５％。表达产物可与小鼠及兔抗恶性疟原虫抗体发生特异性免疫反应。用纯化的融合蛋白免疫家兔制备的免疫血清可特异地识别恶性疟原虫抗原，并对疟原虫体外生长有显著抑制作用。抑制程度与免疫血清浓度及作用时间呈正相关，在２０％浓度下作用７２小时，抑制率可达８２％，并引起疟原虫发育不良和死亡。研究结果说明，制备的恶性疟原虫重组复合抗原具有免疫原性和一定的免疫保护作用，可作为恶性疟疫苗候选物。

摘要：根据间日疟原虫（Ｐ．ｖ．）小亚单位核糖体核糖核酸（ＳＳｒＲＮＡ）基因序列，设计并合成两对特异引物，采用套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，扩增出一条长１２０个碱基对（ｂｐ）的间日疟原虫ＳＳｒＲＮＡ基因特定片段，并用于云南间日疟患者的血样检测。结果表明：该系统特异性强，除间日疟原虫外，恶性疟原虫（Ｐ．ｆ．）、三日疟原虫（Ｐ．ｍ．）及正常人血ＤＮＡ样本均无此扩增带出现。该系统检测原虫的敏感度为０．１个疟原虫／ｌμｌ血，大大高于常规镜检。在进行间日疟检测中，该系统与镜检的阳性符合率为１００％，更重要的是发现镜检漏诊的４例Ｐ．ｖ．和Ｐ．ｆ．的混合感染病例。鉴于该系统具有特异、敏感、稳定、简便的特点和鉴别疟原虫种类、判定混合感染等优点，故对疟疾的诊断。