摘要：目的　设计合成乙型肝炎病毒多表位抗原基因并在大肠杆菌中表达 ,以期获得兼具预防和治疗作用的新型乙肝疫苗。方法　设计并合成一条乙型肝炎病毒 (HBV)多表位抗原基因 (P T) ,该基因包括HBV前S2区的核苷酸序列 ,和分别来自乙型肝炎表面抗原、乙型肝炎核心抗原、乙型肝炎DNA聚合酶的其它 4个连续的HLA限制性抗原表位的核苷酸序列。基因合成后克隆入载体质粒pWR4 5 0 1,转化大肠杆菌BL2 1,IPTG诱导P T基因与载体质粒的 β 半乳糖酐酶基因融合表达。结果　成功合成并拼接出乙型肝炎多表位抗原基因P T ,阳性重组子PWR HBV P T构建成功 ,并在大肠杆菌中融合表达出相对分子质量 (Mr)约 75× 10 3的碱性蛋白质。结论　初步设计成功HBV多表位抗原基因 ,在大肠杆菌中可表达出具有良好抗原性的重组融合蛋白 ,可能是较理想的HBV预防、治疗性疫苗候选物。

摘要：目的：应用基因工程手段获得重新设计的肺表面活性物质结合蛋白Ｃ（ＳＰＣ）的ｃＤＮＡ克隆。方法：根据发表的ＳＰＣ基因序列，重新设计适宜在大肠杆菌中表达的目的基因片段，该基因双链分８个小片段合成，经退火、复性连接成目的片段后，克隆到经过ＥｃｏＲⅠ和ＨｉｎＤⅢ双酶切的质粒载体ｐＵＣ１１８中并转化大肠杆菌ＴＧ１，碱裂解法抽提重组子测序。结果：测序证明获得的基因序列与实验设计完全符合。结论：正确设计并合成了ＳＰＣ的ｃＤＮＡ，为进一步在大肠杆菌中表达奠定了基础。

摘要：玻璃体积血是眼外伤及多种眼病的常见并发症,致育率较高。为寻找对玻璃体积血吸收疗效显著且使用方便的中药,我们曾用同位素^(51Cr)标记之RBC悬液注入兔眼内制成模型,采用虎杖及田七进行治疗,初步取得良好疗效。本试验在模型改进的基础上,进一步观察中药的治疗作用,并对虎杖提取物及虎杖与田七混合剂的疗效进行对比研究,对其药理机制进行初步探讨,现报道如下。材料与方法一、疗效观察健康新西兰白兔32只,雌雄兼用,体重2.0～3.5Kg.采用配伍组设计分成四组:①对照组;②虎杖治疗组;③虎杖一田七合剂治疗组;

摘要：目的　建立缺口 连接酶链反应 (gapligasechainreaction ,G LCR)诊断新生儿沙眼衣原体(Chlamydiatrachomatis)感染。方法　根据沙眼衣原体主要外膜蛋白基因设计两对探针 ,应用LCR技术扩增衣原体标准株DNA ,并用于检测 32 8例新生儿肺炎鼻咽拭子标本中的沙眼衣原体 ,在敏感性、特异性方面与传统的细胞培养法进行比较。结果　G LCR可检测出两个衣原体原体 ;可扩增 5种沙眼衣原体标准株DNA ,不扩增鹦鹉热衣原体及其他细菌DNA ,显示出很高的特异性。 32 8例鼻咽拭子标本中 ,G LCR扩增检出 6 7例阳性 ,培养检出 6 0例。经结果不一致分析后 ,共检出 6 9例阳性 ,阳性率为2 1%。以扩大标准为金标准判断 ,G LCR的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为 98 6 %、10 0 %、10 0 %和 99 6 % ,而培养则分别为 86 9%、10 0 %、10 0 %和 96 6 %。结论　G LCR检测新生儿沙眼衣原体感染具有较高的敏感性和特异性。G LCR是一种有应用前景的核酸扩增方法。

摘要：将自行设计、合成的乙型肝炎病毒多表位抗原基因BPT ,克隆入真核表达载体pCDNA3 1,构建重组质粒pCDNA3 1/BPT。后者经脂质体法转染小鼠BALB/c 3T3细胞 ,G4 18加压筛选出阳性转染细胞 ,并用间接免疫荧光法鉴定其在小鼠BALB/c 3T3细胞的表达。该重组质粒经胫骨前肌注射小鼠 ,10 0 μg/次每只小鼠 ,间隔 2周加强一次 ,共 3次。免疫诱发了特异性抗体和淋巴细胞增殖反应 ,并用PCR法在小鼠的心脏、肝脏及肺组织中检测到pCDNA3 1/BPT 。

摘要：目的:建立一种利用DNA探针快速检测肺炎链球菌的反向斑点杂交方法。方法:在肺炎链球菌特异的自溶素基因序列内设计引物,聚合酶链反应合成1段263bp的DNA探针,然后用生物素标记的细菌DNA与该探针行反向斑点杂交,并将该方法应用于痰样本的检测。结果:所合成的探针具有高度特异性,与其他细菌间无交叉反应,该方法能检测出10ng细菌DNA。50份痰标本肺炎链球菌培养阳性者8份,杂交阳性者12份,PCR阳性者18份。结论:反向斑点杂交具有快速、敏感、特异的优点,对肺炎链球菌的快速诊断有重要意义。

摘要：围产期窒息所致缺氧缺血脑损伤(HIBD)为新生儿期危害最大的常见病，常导致新生儿死亡和幸存者严重的后遗症。近来报道非竞争性N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂1-氨基-3，5二甲基金刚烷盐酸(商品名美金胺)（Memantine）对HIBD具有脑保护作用［1］。本研究拟对缺氧缺血（HI）新生大鼠对照应用美金胺，通过观察热休克蛋白（HSP）70基因表达的变化，进一步从分子水平评估美金胺对脑的保护效果。　　材料和方法　　1.实验对象：7日龄SD鼠，无性别选择，体重10～14 g，分成正常对照（NORM）组、HI组以及HI后给药组，每组15只。　　***模型的建立：结扎7日龄新生鼠的右颈总动脉，置于自行研制的缺氧房［2］内，在37 ℃、8％氧浓度下缺氧2 h，返回母鼠身边喂养。　　***70基因的检测方法：(1) 制备标本：新生鼠分别于HI后2、24、48、72 h及7 d断头处死。正常鼠亦在相应时段断头处死。无菌操作下分别取右脑皮质约50 mg和海马组织约25 mg，冻存于－80 ℃冰箱内备用。(2) HSP70基因的检测：采用柱离心式组织/细胞RNA抽提试剂盒（上海华舜生物工程公司产品），进行两组脑总RNA的抽提。应用PE Lamda 10紫外/可见光分光光度计进行RNA吸光度A260值(曾称光密度OD260值)的测定，得出标本总RNA浓度（g/L）。根据HSP70基因cDNA序列，应用Oligo 5.0软件设计长度为19个碱基序列的上游、下游和下游竞争引物(美国赛百胜生物工程公司合成)。竞争性内参照（internal standard，IS）制备过程参照文献［3］，浓度为2fg。依据逆转录试剂盒进行总RNA逆转录，生成RT产物cDNA，然后进行PCR扩增，2％琼脂糖对PCR产物进行凝胶电泳，应用BIO-RAD图象分析系统软件（美国BIO-RAD公司）分析电泳结果，用PCR产物目的条带和竞争条带的容积比值作为HSP70基因的相对表达量。

摘要：为了保证计算机设备能安全，稳定的运行，机房内必须连接好防雷地，交流地，交流工作地及直流地，且各种地线系统不能互相干扰，接地地极发必须依据国家标准严格设计与施工且必须有可靠的检测设备测量接地电阻。

摘要：为探讨复发性髌骨脱位(Recurrent dislocation of the patella, RDP)的治疗方法。1978年开始利用缝匠肌前移,增建一个动力性髌韧带和加强股内侧肌肌力,共治疗RDP15例,18膝;随访12例,13膝;随访时间2.5年～13年,平均4年3个月,髌骨无再脱位,膝关节伸屈功能正常,无继发关节退行性变,获得满意治疗效果。认为本方法优点在于设计合理、操作简单、效果确实、易于推广。

摘要：目的　建立 L3 - L4活动节段有限元模型 ,用于进一步的生物力学研究。方法通过Auto CAD进行造型形成 L3 - L4活动节段的 CAD模型 ,转换成有限元分析模型 ,在模型绘出韧带及小关节囊。结果　模型的总节点数为 2 12 8,包括 1478个点块单元 ,16个边界元 ,髓核与整个椎间盘的横切面积之比为 35 .5 %。结论　通过 CT断层扫描、图像数字化自理及计算机辅助设计等方法 。