摘要：目的　探讨基于HBV抗原优势表位的治疗性多肽抗原组分、结构与体外诱导CD8+ T细胞应答之间的关系。方法　用计算机辅助分子设计技术 ,设计基于HBV抗原免疫优势性CTL表位、B细胞表位和破伤风类毒素通用Th细胞表位的 3种治疗性多肽候选疫苗分子 ,经Merrifield固相多肽合成技术合成 ,并经HPLC纯化、鉴定。以HLA A2 + 健康人和慢性乙型肝炎患者的PBMC为实验对象 ,进行体外诱导CD8+ T细胞应答的免疫学功能研究。结果　所设计治疗性多肽分子可在体外诱导较强的抗原特异性CD8+ CTL应答 ;“ AAA ”铰链区设计和“Th +B”细胞表位的引入可增强CTL表位肽的免疫原性。结论　提示在治疗性表位多肽疫苗的分子设计中 ,短而高柔性的“铰链区”设计和“Th +B”

摘要：病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)在形态结构上类似于病毒,但不含病毒基因组。依据来源可分为源于病毒VLPs和人工VLPs。前者主要通过基因工程制备,后者由人工化学合成而来。VLPs的表面组分可进行灵活多样的修饰改造以满足不同需求;在适宜条件下VLPs可以包裹核酸或其它小分子物质。作为分子运载工具,VLPs可靶向性地递送基因、药物或其它小分子物质。VLPs具有独特的免疫学特性,不但能通过影响APC发挥佐剂效应,还可以作为其它佐剂、肽疫苗和核酸疫苗的整合平台设计多种形式的疫苗。VLPs在载体和疫苗设计中具有良好的应用前景。

摘要：目的　探讨基于表位的治疗性多肽抗原组分、结构与诱导免疫应答之间的关系。方法　用分子设计的理论和方法 ,设计基于HBV抗原免疫优势性CTL、Th及B细胞表位的 3种治疗性多肽候选疫苗分子 ,经Merrifield固相多肽合成技术合成 ,并经HPLC纯化、鉴定。以BALB c(H 2 d)纯系小鼠为实验对象 ,进行体内免疫学功能研究。结果　所设计治疗性多肽分子可在体诱导较强的抗原特异性CTL应答和适度的抗体反应。Th、B细胞表位的引入可增强CTL表位肽的效应。结论　提示在治疗性表位多肽疫苗的分子设计中 ,引入B -、Th表位可显著提高CTL表位肽的免疫原性。

摘要：从Jenner开始,疫苗的研制即采用模拟自然感染过程的策略.基于此而研制的减毒活疫苗或亚单位疫苗在脊髓灰质炎、麻疹、腮腺炎、流感、黄热病等病原体进化相对保守、自然感染可引起长时间免疫力、保护性免疫主要依赖于中和抗体的一类疾病获得成功.但是,在自然感染不能引发长时间免疫力而且引起慢性持续性感染的疾病如许多寄生虫感染、分枝杆菌感染及一些病毒性感染,模拟自然感染过程的策略不能制备出高效疫苗.

摘要：目的　采用多抗原肽 (multipleantigenpeptide ,MAP)设计方案 ,提高线性短肽的免疫原性。方法　对肿瘤抗原MAGE 2 2 2 0 2 2 8细胞毒性T细胞 (cytotoxicTlymphocyte ,CTL)表位进行分子修饰 ,设计、合成四分支多抗原肽 (MAP4)。标准Fmoc合成方案进行合成 ,液相色谱 质谱联用 (LC MS)进行目的肽鉴定。以体外刺激人外周血单核细胞 (PBMC)诱导CTL效应及IFN γ分泌 ,标准 51 Cr释放实验与Elispot实验进行免疫原性的研究。结果　标经准 51 Cr释放实验验证 ,低浓度的MAP4可以诱导出有效的CTL效应 ,Elispot实验显示MAP4能够有效诱导的IFN γ分泌。结论　MAP的构建能够增强CTL效应和IFN γ的分泌 。

摘要：目的　探讨基于黑色素瘤特异性抗原MART 12 7 3 5表位的治疗性多肽抗原组分、结构 ,及诱导抗原特异性CD8+ T细胞应答的关系。方法　用蛋白质分子设计技术 ,设计基于黑色素瘤特异性抗原MART 12 7 3 5表位、HIVTat49 57CCP序列及破伤风类毒素通用Th表位的治疗性多肽候选分子 ,经Merrifield固相多肽合成技术合成 ,HPLC纯化、鉴定。以黑色素瘤病人PBMC为实验对象 ,对其诱导T细胞增殖、Th1极化、抗原特异性CD8+ CTL效应进行研究。结果　所设计治疗性多肽分子可在体外诱导Th1极化和抗原特异性CD8+ T细胞应答 ,含Th、CTL表位的双表位肽抗原略优于单纯CTL表位肽 ,含Th、CTL表位和HIVTat49 57CCP序列的肽抗原效应显著优于前二者 (P <0 0 5 )。结论　提示基于黑色素瘤特异性抗原优势CTL表位、HIVTat49

摘要：目的制备、鉴定基于肿瘤抗原survivin的“模拟病毒”瘤苗。方法在特定的条件下将阳离子肽和DNA制备成模拟病毒颗粒样的结构,并以扫描电镜、DNA阻滞试验、DNaseⅠ保护试验和免疫印迹(Western blotting)对该疫苗进行制备鉴定。结果在NaCl浓度为87.5 mmol/L,电荷比为2的制备条件下,该疫苗能形成颗粒,并可有效介导瘤苗所携带基因的表达。结论该研究成功制备了基于肿瘤抗原survivin的“模拟病毒”瘤苗,为新型的肿瘤疫苗的设计奠定了基础。

摘要：目的针对Pokemon基因对于许多肿瘤抑制基因和原癌基因上游的作用,将其作为RNAi的靶基因,构建表达这些siRNA的重组逆转录病毒表达质粒。方法利用Ambion公司的网上设计工具设计针对Pokemon肿瘤基因的4条siRNA序列,并化学合成4对互补的siRNA的DNA片段。将此双链DNA片段克隆到pSilencer 5.1-H1 Retro vector的BamHⅠ和HindⅢ位点,构建其逆转录病毒重组表达质粒。结果表达人类Pokemon基因的siRNA逆转录病毒重组表达质粒构建成功。结论我们成功构建了人类Pokemon基因的重组逆转录病毒重组表达质粒,为下一步Pokemon基因的RNA干扰提供了实验依据,并且开辟了肿瘤基因治疗的新思路。

摘要：目的　确认固相合成多肽P14分子是否存在异构体。方法　通过HP 110 0与ESI离子源PEAPI2 0 0 0液质联用 (LC/MS)分离P14肽 ,在质谱鉴定合成肽主峰为理论设计分子量前提下 ,应用PESCIEXAn alyst 1.0b3质谱分析软件分析子离子流色谱图。结果　从总离子流色谱图中精确提取P14肽Q1正离子双电荷质量数 ,形成P14肽质量数子离子流色谱图 ,其中有散在的不同保留时间的质量数存在。结论　P14肽有异构体存在 ,与结合理论上分析P14氨基酸组成发现 (P14组成中有 6个胱氨酸 ,其存在无疑增加了分子内二硫键形成的可能性 )

摘要：目的　探讨如何将表位构建成有效免疫原。方法　以Pre S( 2 ) 蛋白两优势性B细胞表位和HBcAg两Th细胞表位为基础 ,设计、合成了 2种MAP多肽 ,以此两MAP肽为免疫原免疫兔和小鼠 ,观察体液免疫反应。结果　此两种MAP多肽均比Pre S( 2 ) 蛋白诱发更高抗体滴度 ;Th细胞表位引入可显著增强反应强度。结论　增加肽抗原结构复杂性可提高其免疫原性 ,其表位排列以B细胞表位在赖氨酸核心外侧为佳 。