摘要：给出了基于定量序效模型(QSAM)的计算机辅助虚拟疫苗库设计方案,并以此为基础成功组建了一个合理规模的HLA-A*0201限制性CTL表位库,其实现流程如下:(1)从天然氨基酸516种理化性质经主成分分析(PCA)得到一种新的氨基酸描述子:氨基酸综合性质得分(SP-score);(2)基于SP-score结合遗传-偏最小二乘(GA-PLS)技术建立QSAM模型;(3)利用QSAM模型作为评价工具采用遗传算法(GA)优化CTL表位种群;(4)统计优秀种群中20种氨基酸分别在抗原肽序列不同位置出现频率f;(5)保留f>F(F为平均出现概率,对于任意氨基酸为1/20)的氨基酸作为该位置的有利残基类型参与虚拟组合库的构建.

摘要：目的设计结核分枝杆菌高特异性分子信标探针及优化TB-MB-PCR体系,尝试运用荧光分光光度计观测反应后的荧光信号。方法运用软件Beacon designer设计分子信标探针,优化TB-MB-PCR反应体系各组份浓度,运用荧光分光光度计观测反应后的荧光信号。结果优化后的MgCl2、引物、dNTP以及MB在PCR反应体系中的最佳终浓度分别为4mmol/L、0.04μmol/L、0.2mmol/L以及0.04～0.05μmol/L;3种稀释标本TB-MB-PCR阳性产物、TB-MB-PCR阴性产物;TB-PCR阴性产物（空白对照）的荧光信号差异明显。结论高特异性分子信标探针设计较理想、优化后的TB-MB-PCR反应体系灵敏性、特异性好;荧光分光光度仪可直接检测反应产物,有简单、灵敏、准确等优点。

摘要：从促进大学跨学科组织成长发展的视野出发,运用访谈研究、扎根理论、问卷调查、聚类分析等方法,建立了由组织战略、组织任务、组织资源、制度设计、组织能力、组织运行、学科文化7个治理因素及21个项目共同构成的大学跨学科组织共同演进治理因素体系。研究表明:评价制度、利益分享制度、交流制度、激励与约束制度、政策法规、组织结构、发展模式、学科方法、问题导向、学科价值、战略定位、战略目标、人力资源、物质资源、学科导向、信息资源、认知优化能力是影响跨学科组织共同演进的关键项目,为大学跨学科组织建设提供了理论参考与实践指导。

摘要：目的　了解小剂量巨噬细胞炎症蛋白 1α(Macrophageinflammatoryprotein αMIP 1α)联合白细胞介素 8(Interleukin 8,IL 8)对人骨髓造血细胞集落形成的影响。方法　取人骨髓 ,根据随机单位组方差分析设计 ,将每例标本分为空白组 (不加MIP 1α和IL 8) ;10ng ml联合组 (加入 10ng ml的MIP 1α和IL 8) ;1ng ml联合组 (加入 1ng ml的MIP 1α和IL 8) ;单用MIP 1α组 (加入 2 0ng ml的MIP 1α) ;单用IL 8组 (加入 2 0ng ml的IL 8)。建立半固体培养体系 ,一定时间后 ,观察集落粒单细胞集落形成单位 (CFU GM)、红细胞集落形成单位 (CFU E)和混合集落 (CFU Mix)的形成情况。结果　 1ng ml的浓度下 ,相同浓度的MIP 1α与IL 8联合使用对人骨髓造血细胞集落的形成没有明显的抑制作用 ;而在 10ng ml的浓度下 ,两者联合使用则能明显地抑制人骨髓造血细胞集落的形成。两种因子单独使用 ,未见明显的集落形成抑制作用。结论　 10ng mlMIP 1α与IL

摘要：目的制备针对人溶酶体相关膜蛋白2A(LAMP2A)的shRNA重组慢病毒,获得稳定低表达LAMP2A的MDA-MB-231乳腺癌细胞株,观察LAMP2A分子下调对乳腺癌细胞紫杉醇耐药性的影响。方法通过对LAMP2A的mRNA序列分析,设计了4条shRNA,通过基因重组技术构建pGLV-EGFP-shRNA慢病毒表达质粒,并测序鉴定。将构建的表达质粒和包装质粒共转染人胚肾HEK293T细胞包装产生慢病毒,测定病毒滴度。将构建的shRNA慢病毒表达载体感染人乳腺癌MDA-MB-231细胞,嘌呤霉素筛选获得稳定细胞株后,Western blot法检测LAMP2A表达,验证蛋白表达抑制效果。采用1 nmol/L、10 nmol/L、100nmol/L的紫杉醇处理LAMP2A低表达乳腺癌细胞株后,用MTT法观察LAMP2A低表达组和对照组之间增殖效率的差异。结果测序结果显示重组慢病毒质粒构建正确,病毒滴度达2×108TU/mL。乳腺癌稳定细胞株中LAMP2A蛋白表达量显著降低。在10 nmol/L、100 nmol/L紫杉醇处理后,LAMP2A低表达乳腺癌细胞株对紫杉醇耐药性明显降低(P<0.05)。结论成功构建了人的LAMP2A基因shRNA慢病毒载体,获得了稳定低表达LAMP2A的乳腺癌细胞株,证实LAMP2A下调能够降低乳腺癌细胞株对紫杉醇的耐药性。

摘要：目的　了解小剂量巨噬细胞炎症蛋白 1α(Macrophageinflammatoryprotein α ,MIP 1α)联合白细胞介素 8(Inter leukin 8,IL 8)在大剂量化疗药物阿糖胞苷 (Ara C)存在的情况下 ,对正常造血干 /祖细胞的体外保护作用。方法　取患者骨髓 ,离心分离单个核细胞 ,根据随机单位组方差分析设计 (Therandomcompleteblockdesignvarianceanalysis) ,将每例标本分为空白组 (不加MIP 1α和IL 8) ;10ng/ml联合组 (加入 10ng/ml的MIP 1α和IL 8) ;1ng/ml联合组 (加入 1ng/ml的MIP 1α和IL 8) ;单用MIP 1α组 (加入 2 0ng/ml的MIP 1α) ;单用IL 8组 (加入 2 0ng/ml的IL 8)。将所得细胞培养在含IL 3和GM CSF的液体体系中 ,先后经MIP 1α和 /或IL 8以及大剂量Ara C处理 (以上步骤简称为“Ⅰ期处理”)。之后作胎盼蓝拒染实验 ,流式细胞仪计数各组CD3 4+ 细胞 ,Ⅱ期液体培养 ,集落培养 ,以了解经Ⅰ期处理后不同组别中正常造血干 /祖细胞的存活情况及增殖能力。部分标本在Ⅰ期处理时只经MIP 1α和 /或IL 8处理 ,不经Ara C处理 ,用流式细胞仪检测所得细胞的周期分布。结果　 10ng/ml浓度下MIP 1α与IL 8联合组中 ,无论是Ⅱ期液体培养细胞生长情况、集落生长情况 ,还是CD3 4+ 细胞计数 ,均高于其它组 ;而周期分析结果则表明 ,

摘要：抗ＨＩＶ病毒药物结构设计的进展邹全明１李华２鲁东水１李文健１综述朱锡华２审阅治疗人类免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）感染药物的研究进展较快，自病毒发现以来的１２年内，四种抗病毒药物已经注册，其中三种是在过去两年内完成注册的。然而，尽管做了这些大量的努力，对于获...

摘要：目的制备抗人心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)单克隆抗体(mAb),鉴定其基本特性并通过配对检测临床样本血清,对已配对的mAb进行表位鉴定。方法通过已制备的H-FABP抗原和合成肽免疫BALB/c小鼠,常规融合筛选后进行抗体亚型鉴定、效价和亲和力检测,纯化mAb后通过间接ELISA、Western blot法对mAb进行特异性检测;将获得的mAb分别作为捕获和检测抗体,经过配对建立检测重组H-FABP的ELISA体系,并初步用于临床血清检测;采用生物信息学分析设计2段H-FABP表位,通过原核表达获得其短肽并纯化,通过Western blot法对配对的mAb进行表位鉴定。结果成功获得4株抗H-FABP特异性mAb,亚类分别为IgG2a和IgG2b,抗体效价为1∶51 200～1∶1024 000,亲和力最高可达到9.02×109mol/L;经Western blot法和间接ELISA鉴定均能够特异检测重组H-FABP蛋白,经过配对发现mAb 3-H5和1-F10能够检测重组H-FABP,并在其临床血清样本检测中发现正常组和急性心梗组之间H-FABP水平具有显著性统计学差异;通过表位鉴定发现未知表位的mAb 1-F10能够特异识别位点为H-FABP的第86到第133位氨基酸。结论制备了4株高特异性和高亲和力的抗H-FABPmAb,成功建立了检测临床样本血清中的ELISA体系,并对其表位进行了分析鉴定。

摘要：目的针对中国汉族高频HLA-DRB1基因型人群,预测与鉴定幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)黏附素蛋白A亚单位(neuraminyllactose-binding hemagglutinin,HpaA)CD4+T细胞表位。方法通过Allele Frequency Net数据库分析中国汉族人群HLA-DRB1高频基因型,利用NetMHCIIpan对HpaA蛋白中能被这些高频基因型递呈的CD4+T细胞表位进行预测;通过PCR-SBT法筛选携带有这些高频基因型的***感染者,利用重组HpaA抗原刺激感染者外周血单个核细胞体外扩增出HpaA抗原特异性T淋巴细胞后利用合成短肽对所预测表位进行鉴定,通过抗体阻断实验对表位的HLA限制性进行分析,利用DC细胞负载重组HpaA蛋白对表位的自然递呈特征进行分析。结果中国汉族人群中HLA-DRB1高频基因型为DRB1*0901(14.4%)、DRB1*1202(13.3%)和DRB1*1501(10.8%),针对上述3种高频基因型预测出24个HpaA蛋白CD4+T细胞表位。其中,4个表位:HpaA39-53(HLA-DRB1*0901)、HpaA42-56(HLA-DRB1*0901)、HpaA89-103(HLA-DRB1*1202)和HpaA87-101(HLA-DRB1*1501)可有效刺激体外扩增的HpaA特异性T细胞产生高水平IFN-γ,且均能被DC细胞自然递呈。结论鉴定得到的4个HLA-DRB1限制性CD4+T细胞表位有可能成为***表位疫苗设计的候选抗原。

摘要：背景:晚期氧化蛋白产物是血液透析患者免疫功能紊乱、加速性动脉粥样硬化、透析相关性淀粉样变等长期并发症的重要致病环节。但是对于晚期氧化蛋白产物的基础性研究相对较少。主要原因之一就是不能获得高纯度且具有生物学活性的晚期氧化蛋白产物。目的:制备及纯化晚期氧化蛋白产物,并对其进行鉴定,以寻求一种制备高纯度且具生物活性的晚期氧化蛋白产物的方法。设计、时间及地点:单一样本观察,于2008-09/10在解放军第三军医大学检验系临床生化教研室完成。材料:人血白蛋白为成都容生有限公司产品,Hitrap26/60sephacryl S-300为GE Healthcare产品。方法:首先纯化人血白蛋白,将纯化的人血白蛋白与次氯酸体外孵育法制备晚期氧化蛋白产物-人血白蛋白,经Hitrap26/60 sephacryl S-300分离纯化。并经变性及非变性电泳、分子筛蛋白标准鉴定其相对分子质量,经单核细胞肿瘤坏死因子α分泌实验鉴定其结构特征和生物学活性。主要观察指标:①人血白蛋白的纯化及电泳结果。②晚期氧化蛋白产物纯化及电泳结果。③晚期氧化蛋白产物-人血白蛋白促单核细胞肿瘤坏死因子α分泌的量效关系。结果:经变性及非变性电泳、分子筛蛋白标准鉴定其相对分子质量为670000,能够显著刺激单核细胞肿瘤坏死因子α的分泌,时间效应显示AOPPs-HSA(1g/L)刺激6h,单核细胞肿瘤坏死因子α的分泌量就已显著性升高,12h升至最高水平。结论:采用上述方法能够制备及纯化晚期氧化蛋白产物,且纯化后的晚期氧化蛋白产物具有生物学活性,为晚期氧化蛋白产物的进一步研究奠定了基础。