摘要：目的构建人端粒保护蛋白(hPOT1)基因的短链干扰核糖核酸(siRNA)表达载体,观察其在胃癌细胞中抑制hPOT1基因表达的作用,为进一步研究hPOT1在胃癌细胞生长增殖中的作用打下基础。方法设计并化学合成64nt编码hPOT1siRNA基因片段的寡核苷酸,退火成双链后将其连接到pSUPER质粒的H1RNA启动子下游,构建psiRNAhPOT1重组质粒。经酶切、测序鉴定后,用脂质体介导的基因转染方法,转入SGC7901胃癌细胞,用半定量RTPCR检测hPOT1表达水平的变化。结果测序结果表明重组质粒psiRNAhPOT164个碱基成功插入到预定位置,并且序列完全一致。hPOT1siRNA表达载体psiRNAhPOT1转入胃癌细胞后,可明显抑制SGC7901细胞hPOT1的表达。结论构建的hPOT1基因的siRNA表达载体psiRNAhPOT1重组质粒能显著抑制hPOT1基因在SGC7901胃癌细胞中的表达。

摘要：背景：程序性细胞死亡因子4（PDCD4）是-种新的抑癌基因，在肿瘤的发生、发展、治疗和预后中起重要作用。目的：探讨PDCD4RNA干扰对胃癌细胞株MKN28凋亡的影响及其调控机制。方法：设计PDCD4短发夹RNA（shRNA）干扰序列，构建干扰质粒并转染MKN28细胞，设立阴性对照组和空白对照组。以蛋白质印迹法检测PDCD4和凋亡相关蛋白FLIP、Caspase-8和Cleaved—Caspase-8的表达，以AnnexinV—FITC／PI双染法检测细胞凋亡。结果：PDCD4shRNA干扰质粒转染MKN28细胞后．获得稳定低表达PDCD4的细胞模型，干扰效率为86％。与阴性对照组和空白对照组相比，干扰组PDCD4蛋白表达显著降低（0．11±0．01对0．86±0．18和0．81±0．12．P〈0．01），MKN28细胞凋亡率亦显著降低（7．13％±0．86％对13．16％±2.35％和12．02％±2．11％，P〈O．05）。与空白对照组相比，干扰组FLIP表达显著增高（1．25±0．34对0．63±0．11，P〈0．01），而Caspase-8和Cleaved—Caspase-8表达显著降低（0．26±0．08对0．76±0．12，0．11±0．03对0．36±0．09，P〈0．01）。结论：干扰PDCD4表达可抑制胃癌细胞MKN28的凋亡，且这种抑制作用可能是由于干扰PDCD4促进抗凋亡蛋白FLIP的表达，从而抑制Caspase-8的活性引起的。

摘要：目的探讨我国幽门螺杆菌(Hp)分离株细胞毒素相关蛋白A(cagA)基因的分布和多态性情况与Hp感染相关胃十二指肠疾病的关系。方法设计针对cagA基因中一段297bp保守序列以及cagA基因3′端可变区两侧保守序列PCR引物,通过PCR检测82株我国Hp菌株的cagA基因分布情况,及其中77株HpcagA基因3′端可变区长度多态性。结果82株Hp中,77株(93.9%)297bpcagA基因片段扩增阳性;包括297bp片段扩增阴性的2株在内,71(92.2%)株可扩增出cagA基因3′端可变区,其中主要为PCR产物长度约825bp的Ⅰ型。结论我国Hp菌株cagA阳性率极高,其3′端可变区主要为较短的Ⅰ型。

摘要：目的　建立敏感性高的幽门螺杆菌菌株cagA基因PCR检测方法 ,为客观评价CagA在我国幽门螺杆菌感染致病中的作用提供基础。方法　通过分析比较GenBank中已知的cagA基因序列 ,设计了一对针对cagA基因保守序列、可扩增 2 97bp片段的PCR引物 ,用PCR方法检测幽门螺杆菌的cagA基因 ,与SDS PAGE检测CagA蛋白的结果进行比较。结果　PCR检测 82株国内幽门螺菌杆菌的cagA基因 ,77株为cagA阳性 ,阳性率为 93 .9% ,SDS PAGE显示包括所有PCR扩增阴性菌株在内的 74株幽门螺杆菌均表达CagA ,阳性率为 1 0 0 %。PCR检测cagA基因的敏感性为 93 .2 %。结论　建立了敏感性高的幽门螺杆菌cagA基因PCR检测方法。

摘要：0引言胃癌居我国恶性肿瘤之首位,而早期胃癌目前的发现率不高,应引起高度重视,努力提高,以挽救更多的患者.回顾一下内镜的发展史和早期胃癌临床研究进展情况,就不难了解为什么至今内镜检查仍然是早期胃癌(EGC)诊断的主要方法.1868年Kussmal首创硬管胃镜后的90a内,EGC的研究几乎没有什么发展,日本1950年代初查出EGC只占全部胃癌的3.6%.自从1958年Hirschwit设计光学纤维胃镜后,几经改革,镜身越来越细,接物镜视野越来越大,角度可上下弯曲达300度以上,观察病变方便,易为患者所接受.因此,随着纤维胃镜的发展革新,日本EGC已占全部胃癌的52-79%.充分说明了胃镜检查在胃癌早期诊断中的重要地位.