摘要：目的:构建靶向Hax-1基因的短发夹状干扰RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达载体pGenesil-Hax-1,并探讨siRNA靶向抑制Hax-1基因表达的作用。方法:根据shRNA设计的原则,在Hax-1全长序列中选取含19个核苷酸靶序列,设计形成siRNA的DNA模板并克隆到shRNA表达载体pGenesil-1中,获得可靶向抑制Hax-1基因的重组shRNA表达载体。采用LipofectamineTM2000转染试剂将pGenesil-Hax-1导入HeLa细胞中;分别采用RT-PCR以及Western blot从mRNA和蛋白水平上检测干扰效果。结果:半定量PCR及Western blot结果表明,siRNA可使Hax-1mRNA的转录水平得到显著抑制(P<0.01),Hax-1蛋白的表达较对照组减少约70%。结论:靶向Hax-1基因的重组shRNA表达载体pGene-sil-Hax-1介导的siRNA可显著抑制Hax-1基因在人宫颈癌HeLa细胞中的表达。

摘要：目的观察抑制人脐静脉内皮细胞系ECV304细胞内内皮高表达脂多糖相关因子1（endothe-lial-overexpressed lipopolysaccharide-associated factor 1,EOLA1）基因表达后细胞生长的变化。方法构建EGFP-EOLA1融合蛋白表达载体pEGFP-N2/EOLA1,转染ECV304细胞,G418压力筛选获得稳定表达株;设计靶点特异性的寡核苷酸,连接到经BamHⅠ和HindⅢ酶切线性化的pSlincer3.1/H1质粒上。转染重组质粒到稳定表达EGFP-EOLA1融合蛋白的ECV304细胞,检测靶基因的抑制情况,观察EOLA1表达被抑制后细胞生长的改变。结果抑制EOLA1表达后ECV304细胞生长明显减慢。结论EOLA1基因在细胞内参与了细胞生长的调控。

摘要：背景:国外动物实验表明体外扩增自体骨髓间充质干细胞移植治疗糖尿病足效果较好。目的:观察自体骨髓间充质干细胞体外扩增后患肢移植的效果和安全性。设计:随机对照临床观察。对象:解放军第三军医大学西南医院2006-10/2008-10住院确诊的糖尿病足患者40例,男22例,女18例,年龄(64.3±12.7)岁,按wagner分级2级8例,3级18例,4级14例。按查表法随机分为细胞移植组22例,常规治疗组18例,实验经医院伦理委员会讨论批准。方法:常规治疗组给予常规降糖、降压、调脂、抗感染、抗凝、营养神经、扩张血管等药物治疗,局部常规换药,有坏疽者行截趾治疗;细胞移植组在常规治疗的基础上,按密度梯度离心和贴壁法分离制备骨髓间充质干细胞悬液,经流式细胞仪鉴定、染色体检测、细胞悬液皮试后,予肌肉注射法行扩增后自体骨髓间充质干细胞移植。主要观察指标:细胞移植后1个月两组患者治疗效果的比较,鉴定可能不良事件和副反应。结果:移植后1个月,细胞移植组患者肢体疼痛、冷感、间歇性跛行均有所改善,踝肱指数明显升高,双下肢血管显像血流灌注有所增加,与常规治疗组比较差异均有显著性意义(P<0.01)。移植后3个月随访患者均无异常症状体征出现,血、尿、便常规检测正常,心电图和肝肾功能无特殊改变,出凝血时间正常。结论:体外扩增自体骨髓间充质干细胞移植患肢治疗糖尿病足简便、有效、安全。

摘要：背景:抑郁、焦虑等负性情绪在2型糖尿病发病及血糖控制中起重要作用。目的:探讨改善2型糖尿病患者的抑郁、焦虑情绪对血糖代谢的影响。设计:随机对照观察。单位:解放军第三军医大学西南医院临床心理咨询中心和内分泌科。对象:选择1999-10/2000-11在解放军第三军医大学西南医院内分泌科病房住院的2型糖尿病患者43例,均自愿参加观察。男24例,女19例,年龄(51±9)岁。随机分为2组,观察组23例,对照组20例。方法:观察组除糖尿病常规药物治疗外,辅以抗抑郁及抗焦虑剂治疗,帕罗西汀20m g每天早餐后顿服,阿普唑仑0.4m g每天中午及晚睡前各1次。对照组仅进行糖尿病常规药物治疗。两组患者分别于治疗前、治疗4周后用Zung 氏抑郁及焦虑自评量表自评其抑郁及焦虑评分。Zung氏抑郁、焦虑自评量表标准分分别≥50为有抑郁、焦虑症状。以抑郁、焦虑量表减分率作为情绪改善的标准。减分率50%～100%为显效,25%～49%为有效,<25%为无效。减分率=(治疗前评分-治疗后评分)/治疗后评分×100%。分别测定治疗前、治疗4周后空腹血糖、餐后2h 血糖水平及糖化血红蛋白。同时于治疗前、治疗后第10,20,30天时测3餐前、后1h 血糖(6次/d),血糖下降率=(治疗前血糖-治疗后血糖)/治疗前血糖。主要观察指标:①两组患者治疗前、治疗4周后抑郁、焦虑评分、空腹血糖、餐后2h 血糖及糖化血红蛋白水平。②治疗后两组患者的血糖下降率。结果:观察过程中脱落6例,其中观察组脱落5例,主要原因是经济压力、不能耐受帕罗西汀药物副作用及担心服用精神药物成瘾;对照组1例,原因是失访。最终完成观察37例,观察组18例,对照组19例。①抑郁、焦虑评分比较:治疗4周后观察组较治疗前显著下降犤(41.05±7.05,41.88±10.57);(59.80±10.24,55.03±8.31),(t=2.41,2.21,P <0.05)犦。②空腹血糖、餐后2h 血糖水平及血糖下降率比较:治疗4周后观察组空腹血糖、餐后2h 血糖低于对照组(t=2.11,2.98,P <0.05～0.01),而空腹血糖、餐后2h 血糖下降率则明显高于对照组(t=2.94,2.93,P <0.01)。③糖化血红蛋白比较:治疗4周后观察组糖化血红蛋白较治疗前呈显著降低犤(8.2±2.0)%,(9.1±1.9)%,(t=2.14,P <0.05)犦。结论:抗抑郁及焦虑药物的使用不仅能显著改善糖尿病患者的抑郁、焦虑情绪,而且显著改善糖代谢。其原因可能与抗抑郁、焦虑药物增加患者对糖尿病药物的依从性,减少负性情绪带来的胰岛素抵抗现象有关。

摘要：本文阐述了网络化课堂教学的概念、特点及教学设计，探讨了在医学教育中的作用，目的在于优化高校医学教学效果。

摘要：目的构建内皮细胞高表达脂多糖相关因子1(EOLA1)基因启动子的报告基因重组质粒,为EOLA1启动子的分析鉴定奠定基础。方法提取人内皮细胞基因组DNA,设计引物克隆EOLA1基因上游不同长度的基因片段,插入到含荧光素酶报告基因的载体pGL3-Basic中,经限制性内切酶酶切鉴定、测序。结果成功构建了3种含有不同长度EOLA1上游基因的pGL3-EOLA1-Luc荧光素表达质粒,形成了系列的EOLA1启动子重组体。结论建立的不同长度EOLA1上游基因的报告基因系统为EOLA1启动子的活性分析奠定了基础。

摘要：目的提高糖尿病护理门诊中患者自我方案设计的完整性及准确性。方法在门诊选择80例糖尿病患者进行查阅出院记录前(A组)和查阅记录后(B组)进行评估调查,A、B两组既往病史及检查数据进行对比。结果门诊护士通过信息导入掌握患者既往病史率明显高于仅凭正常询问掌握的既往病史率。结论糖尿病护理门诊评估患者病情时导入既往出院记录能使患者全方位教育方案更加完善,减少因收集患者资料不全导致门诊护士个体化进行健康指导时出现的内容缺陷,使患者最大限度获得针对性的教育指导。

摘要：内分泌科是一门专业性很强的临床诊疗学科，在医学内科学教学中内分泌教学内容相对多而枯燥，相关知识点多而杂。这就要求在教学中必须抓住主线，有效梳理重难点，方便学生理解记忆。内分泌总论是贯穿整个内分泌系统的“灵魂”，因此对以后学习内分泌系统各论内容的意义重大。本文就如何结合解剖学知识，提高内分泌总论教学效果谈一些体会。1熟悉解剖学概念在讲述激素的概念时，首先利用体内从上至下的解剖位置，人为的分为上位激素和下位激素：上位激素（即促激素）是由大脑中枢包括下丘脑和垂体分泌的，需强调下丘脑分泌的激素又在垂体之上，可以调节垂体激素的分泌；而下位激素（靶激素）是由身体的靶器官分泌的，阐述时可设计图表分别归纳，把复杂的文字叙述提炼为知识点串联起来。