摘要：目的以富含脯氨酸的酪氨酸激酶2(PYK2)为靶基因,设计并构建短发夹状小干扰RNA表达载体,探讨PYK2小干扰RNA表达载体对心脏成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)增殖的影响。方法以pAVU6+27质粒为载体,以PYK2为靶基因,设计并构建短发夹状小干扰RNA表达载体,行酶切和测序鉴定。用PYK2短发夹状小干扰RNA表达载体转染体外培养的成年大鼠心脏成纤维细胞,反转录聚合酶链反应和Westernblot法检测PYK2基因和蛋白表达的改变,四唑盐比色法和3H-TdR掺入率检测转染后细胞的增殖和DNA合成情况。结果酶切鉴定和测序分析表明靶向PYK2的RNA干扰重组体构建成功;重组体转染CFs后,PYK2的mRNA和蛋白水平较空载体转染的对照组显著下降;重组体转染CFs后MTT比色A值和3H-TdR掺入率均明显低于对照组。结论PYK2小干扰RNA表达载体是抑制心脏成纤维细胞增殖和DNA合成的有效手段,有利于深入探讨PYK2在心肌纤维化发生发展中的作用。

摘要：背景:白细胞流变性对微循环血流灌注有明显影响,但缺氧对微循环中白细胞流变性的影响目前研究极少。目的:研究急、慢性缺氧对大鼠肠系膜微循环白细胞流变学行为的影响。设计:随机对照的实验研究。地点、材料和干预:本实验在解放军第三军医大学高原军事医学系全军高原医学重点实验室进行。成年Wistar大鼠,校动物中心提供,按随机抽签法分为对照组、急性缺氧组和慢性缺氧组,低压舱模拟海拔5000m连续缺氧2,30d,复制动物急性和慢性缺氧模型。主要观察指标:正常大鼠、急性缺氧大鼠、慢性缺氧大鼠的白细胞滚动速度、沿壁滚动数、黏附数和白细胞-内皮细胞接触时间(leukocyte-endotheliumcontacttime,TLECT)及动脉血气的比较结果。结果:与对照组比较,急、慢性缺氧组动物表现为动脉血氧分压PaO2和血氧饱和度SaO2显著下降(t=3.01～8.30,P<0.05)。对照组白细胞滚动速度(101.41±26.96)μm/s,滚动数(4.27±2.69)个/min,黏附数(1.45±1.21)个/100μm,TLECT(0.91±0.73)s/min;急性缺氧动物白细胞滚动速度(85.44±17.33)μm/s,滚动数(60.00±31.62)个/min,黏附数(26±8.22)个/100μm,TLECT(16.30±4.84)s/min;慢性缺氧白细胞滚动速度(72.40±24.08)μm/s,滚动数(14.43±3.99)个/min,黏附数(3.57±1.27)个/100μm。

摘要：目的构建及筛选高效率针对Nogo-66受体(Nogo-66receptor,NgR)进行RNA干扰(RNAi)的质粒。方法RT-PCR克隆NgR,插入表达质粒中,构建NgR-GFP融合蛋白表达质粒。根据NgR序列,设计4对针对NgRmRNA进行RNAi的寡核苷酸。退火后,插入短发夹RNA(shorthairpinRNA,shRNA)表达质粒中,构建shRNA表达质粒。将NgR-GFP融合蛋白表达质粒与shRNA表达质粒共转染AAV-293细胞。通过对GFP表达量的观察及Westernblotting定量检测NgR-GFP融合蛋白表达量,鉴定shRNA表达质粒对NgR的干扰效率。结果针对NgR进行RNAi的4个序列中,有1个序列的干扰效率大于90%以上。结论成功构建了1个针对NgR的高效RNAi表达质粒。

摘要：为培养21世纪需要的基础知识扎实,具有创新能力的高素质人才[1],要求高等医学教育在进行教学内容和课程体系改革的同时,还要探讨一套有效的教学方法和手段.作者在病理生理学(以下简称病生)实验教学中进行了改革,开设了设计性实验课程,旨在启发学生的科学思维和创新精神,培养他们独立分析问题、解决问题的能力[2].

摘要：目的：研发在高原地区灾害医学救援现场的高原急救箱,做到急性高原病的早诊断与早治疗。方法：根据大部队快速进入高原地区可能出现的急性高原反应、高原脑水肿或高原肺水肿等疾病,按照每个急救箱现场救治3~5名患者,选择救治器材和药品。结果：高原急救箱包括医用器材及耗材、口服类药品、注射类药品以及眼、鼻与皮肤科用药等共4大类36种药材,用以满足高原地区现场救治急性高原病的需要。结论：针对高原特殊地理环境和高原病救治要求设计的高原急救箱,必将对高原地区灾害救援或大部队急进高原途中急性高原病的救治提供精确可靠的药材保障。

摘要：不断提高课程和信息技术的整合程度，是促进教学模式向更深层次转化的一个新研究课题。文章就课程结构设计和教学应用两个方面介绍了我们的基本做法，并对信息技术3G时代的到来可能产生的影响作了论述。