摘要：目的　观察人工合成的反义寡核苷酸 (ASON)、三螺旋结构寡核苷酸 (TFO)分别对人甲肝病毒 (HAV) 5′非编码区和鸭乙肝病毒 (DHBV) DNAX C区目标基因序列特异结合效应及受影响因素作用的变化。方法　在设定条件下 ,将人工合成的ASON和TFO与目标基因片断混合反应 ,采用电泳转移印迹技术观察特异结合产物及其产量。结果　所设计的ASON与TFO能与目标基因片段直接特异结合 ;在结合缓冲液中 ,ASON与目标片段的结合最佳比例是 2 5～ 5 0∶1,TFO与目标片段的结合最佳比例是 60 0∶1;在最适加入剂量比例下 ,结合反应 60min即有大量TFO的复合物形成 ,复合物产量随作用时间延长而增加 ,180～ 2 40min时结合产物完全稳定形成。但ASON的结合复合物大量形成需要 180～ 2 40min。结论　本试验所设计的ASON和TFO能与HAV和DHBV的目标基因序列发生特异的结合 。

摘要：正交试验具有设计简便、计算简便、节省实验单元、统计效率高等优点，在分析多因素对某指标的影响及优选配方的实验研究中有显著的优势，受到研究者的重视，交得到广泛应用。近年来，计算机软件技术的发展给正交试验的统计学分析提供了极大方便，进一步开拓了正交试验的应用空间。但是，国内相关正交试验采用计算机软件进行分析的报道较少，常规使用人工统计方法较多，带来人力的不必要浪费。

摘要：诊断试验是临床工作中不可或缺的工具,在将诊断试验引入临床实践之前,要经由科学设计的准确性研究进行严格评价,其准确性直接关系到诊断的正确性和治疗决策的合理性。本文介绍了诊断试验准确性研究的设计类型及其特点,包括单组设计、诊断性病例对照研究设计、单组配对设计以及平行组设计,并根据研究问题所处阶段、诊断试验在临床诊断路径中的作用和实际临床应用场景推荐合适的设计类型,为进一步规范当前临床诊断试验准确性研究设计提出建议。本文旨在帮助临床研究者更好地了解和选择合适的诊断试验准确性研究设计类型,以期提高诊断试验准确性研究的质量。

摘要：目的　在预测的SED免疫识别活性位点处引入定点突变 ,构建SED突变体。方法　分别设计侧翼引物和突变引物 ,用megaprimerPCR方法引入突变碱基 ,将PCR产物与pTrcHis B质粒连接 ,转化E .coliDH5α ,用IPTG进行诱导表达 ,金属螯合亲和层析法纯化 ,免疫印迹检测纯化的蛋白。结果　测序结果表明在相应的位置引入了正确突变 ,SDS PAGE和免疫印迹检测结果证实了目的蛋白的表达 ,将构建成功的突变体分别命名为SEDN2 3A、SEDN2 3A/H2 6R、SEDF45A、SEDL5 9A、SEDN61A、SEDI92A和SEDF2 0 3A。结论　成功构建了一系列SED突变体 。

摘要：目的探讨慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)对晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者接受免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitors,ICIs)治疗的疗效和免疫检查点抑制剂相关肺炎(checkpoint inhibitor pneumonitis,CIP)发生率的影响。方法采用回顾性队列研究设计方案,纳入2019年1月至2021年8月在陆军军医大学第二附属医院接受至少2次ICIs治疗的Ⅲb-Ⅳ期NSCLC患者379例,根据慢性阻塞性肺疾病全球倡议(global initiative for chronic obstructive lung disease,GOLD)2021或胸部高分辨CT诊断是否合并COPD,其中184例为NSCLC合并COPD组(NSCLC-COPD组),195例为单纯NSCLC组(NSCLC组),收集疗效终点指标包括客观缓解率(objective response rate,ORR)、无进展生存期(progression free survival,PFS)、总生存期(overall survival,OS)和CIP的发生率,分析COPD对晚期NSCLC患者接受ICIs治疗疗效和CIP发生率的影响。结果NSCLC-COPD组接受ICIs治疗的ORR显著优于NSCLC组(45.7%vs 35.4%,P=0.042)。调整混杂因素后的多因素Logistic分析显示,合并COPD是ORR的独立预后因素(HR=0.587,95%CI:0.379~0.909;P=0.017)。与NSCLC组相比,NSCLC-COPD组患者中位PFS更长(14.6月vs 10.9月;P=0.023)。调整混杂因素后的多因素Cox分析显示,合并COPD可能是PFS的良性预后因素(HR=0.768;95%CI:0.581~1.015;P=0.064)。COPD与OS无明显相关性。所有患者中13例患者发生CIP,其中NSCLC-COPD组9例(4.9%),NSCLC组4例(2.1%),两组发生率无统计学差异(P=0.162)。结论NSCLC合并COPD的患者接受ICIs治疗的ORR、PFS显著优于单纯NSCLC患者,提示COPD是晚期NSCLC患者接受ICIs治疗获得较好疗效的潜在预测因素。合并COPD并未增加CIP的发生风险。

摘要：目的：建立一种用短波紫外线（ Ｕ Ｖ Ｃ）与交联淀粉碘（ Ｃ Ｓ Ｉ）联用的血浆消毒实用模型。方法：设计并制作了血浆消毒模型。用辛德比斯病毒（ Ｓ Ｖ）作为试验病毒，通过细胞感染试验测定模型的灭病毒效果。采用免疫化学技术观察被处理血浆中 Ｉｇ Ｇ的活性变化。结果：含病毒血浆首先经剂量为９ ８６０ Ｊ／ｍ ２ 的 Ｕ Ｖ Ｃ照射后，再流经 Ｃ Ｓ Ｉ柱时，血浆在 Ｃ Ｓ Ｉ柱内的滞留时间越长，其病毒的滴度越低，在滞留时间为１２０ ｍ ｉｎ 时，血浆中的病毒灭活达６．７８ 个对数级。而此时，血浆中 Ｉｇ Ｇ的抗原和抗体活性无明显变化。结论： Ｕ Ｖ Ｃ与 Ｃ Ｓ Ｉ联用技术的血浆消毒模型能有效灭活 Ｓ Ｖ 病毒，不损害血浆中抗体成分的活性。

摘要：目的评估内镜超声检查(endoscopic ultrasonography,EUS)在十二指肠乳头癌术前分期和导管扩张中的诊断价值,分析其诊断准确度的影响因素。方法采用横断面研究设计,收集2018年1月至2023年8月于本院消化内科就诊且经病理诊断为十二指肠乳头癌并接受EUS的患者,采用灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度评价EUS对十二指肠乳头癌术前分期的诊断价值。单因素和多因素分析确定影响EUS诊断准确度的因素。结果本研究共纳入102例经病理诊断确诊为十二指肠乳头癌的患者,其中男性59例,女性43例。患者平均年龄为62岁。患者确诊前均接受EUS,EUS对肿瘤T分期的准确度为86.27%,对T1、T2、T3、T4病变的灵敏度和特异度分别是84.21%、92.31%、85.00%、60.00%和95.31%、88.89%、96.34%、98.97%。T1、T2、T3、T4病变T分期的阳性预测值分别为91.43%、83.72%、85.00%、75.00%,阴性预测值分别为91.04%、94.92%、96.34%、97.96%。有14例患者的T分期被EUS错误分期。EUS评估导管内扩张的准确度为75.49%,对导管扩张的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为96.97%、66.67%、98.97%、40.00%。EUS对胰管扩张诊断准确度的独立预测因素为神经浸润、肿瘤大小和T分期;而对胆管扩张诊断准确度的独立危险因素为神经浸润和碱性磷酸酶。结论EUS对十二指肠乳头癌术前分期诊断价值高,神经浸润、肿瘤大小、T分期、碱性磷酸酶可能是其诊断准确度的影响因素。

摘要：目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA)OSER1-AS1在非小细胞肺癌细胞株中的表达及对非小细胞肺癌细胞株生物学行为的影响。方法采用qRT-RCR检测25对肺癌组织和癌旁正常组织中lncRNA OSER1-AS1的表达水平;运用Kaplan-Meier plotter网站分析lncRNA OSER1-AS1的表达与总生存率的关联;设计并构建OSER1-AS1过表达载体,转染构建OSER1-AS1过表达细胞模型;通过CCK-8实验、Transwell实验和流式细胞术检测过表达OSER1-AS1对肺癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。结果肺癌组织中lncRNA OSER1-AS1的表达水平显著低于癌旁正常组织(P<0.01)。lncRNA OSER1-AS1低水平表达与较差的预后相关;通过转染成功构建了OSER1-AS1过表达H1299、SPCA1细胞系;过表达OSER1-AS1可以抑制H1299和SPCA1细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.01),并促进凋亡(P<0.05)。结论 lncRNA OSER1-AS1可以抑制非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力并促进凋亡,在非小细胞肺癌的发生、发展中可能起到抑癌基因的角色。

摘要：目的:探讨末端标记8-甲氧基补骨脂素(8-MOP)的三螺旋结构寡核苷酸(TFO)对鸭乙肝病毒(DHBV)-DNAX/C区一目标基因的特异结合及定位损伤作用。材料方法:在一定条件下,将人工合成的3’末端标记有8-MOP的TFO与目标双链基因片断反应,用电泳转移杂交印迹和PCR法观察设计的复合物(TFO-P)对目标基因的结合以及在长波紫外线(UVA)的照射下8-MOP所致DNA交联及引起的PCR扩增阻止效应。结果:所设计合成的TFO-P能与细胞外DHBV-DNA的目标基因双链直接结合,随TFO-P含量的增加,TFO-P与目标双链形成的三聚体分子的产量明显增加;TFO-P与目标基因的反应物经一定剂量的320～380nmUVA照射后,目标序列的PCR扩增出现阻断现象。结论TFO-P能直接与目标DNA特异结合,形成三聚体产物,在UVA的进一步作用下,TFO-P能在目标序列的设定位置发生光敏反应,使DNA形成共价交联结构。

摘要：目的:利用生物靶标效应的原理,探索一种特异灭活病毒的光化学方法。方法:将针对鸭乙肝病毒(DHBV)设计并人工合成的两条三螺旋结构寡核苷酸(TFO)分别标记8-甲氧基补骨脂素(8-MOP),并将这种复合物(TFO-P)与长波紫外线(UVA)共同作用于血液中的DHBV,通过原代细胞感染、酶联免疫测定、DMA斑点杂交等试验,观察在一定作用条件下,TFO-P对DHBV-DNA的特异结合及其所产生的特异光敏效应对DHBV的灭活程度。结果:DHBV-DNA样品斑点印迹随TFO-P含量的增加明显增强,而同时处理的血液中的白细胞DNA样品斑点印迹无明显增强;在TFO-P的加入量为0.1mmol/ml、UVA照射强度为180μw/cm^2时,5min～20min的UVA照射可灭活DHBV1.90～6.4个对数级,灭活病毒的效率显著高于UVA和8-MOP单独作用时的效果。结论:TFO-P与血液中DHBV-DNA能特异结合,在适宜的处理条件下,所产生的光敏效应能有效灭活血液中的DHBV,灭活滴度可达6个对数级以上。