摘要：目的构建成人源性甲状腺类器官模型,并优化其体外培养方案。方法选取成人甲状腺乳头状癌(PTC)患者癌旁正常甲状腺组织,经消化、分离得到甲状腺细胞,以基质胶包埋细胞,设计不同甲状腺类器官条件培养基进行培养,在显微镜下观察第1代和第2代类器官形成效率和出芽情况。采用H-E染色观察类器官模型的组织学形态,免疫组织化学染色检测类器官模型中甲状腺特异性标志物NK2同源框蛋白1(NKX2.1)、配对盒基因8(PAX8)和甲状腺球蛋白(TG)表达情况,评估类器官模型与正常甲状腺组织的一致性。采用ELISA法检测类器官模型上清液中甲状腺素(T4)和三碘甲状腺原氨酸(T3)水平,验证其是否具有激素分泌功能。结果从7例PTC患者的手术标本中成功建立了8例甲状腺类器官模型。在甲状腺类器官培养体系中,提高Noggin和表皮生长因子浓度及联用多种小分子抑制剂后,第1代和第2代类器官模型出芽更多、球体更大,类器官形成效率更高。H-E染色结果显示,甲状腺类器官模型中可见大量由单层立方上皮细胞围成的滤泡结构,与人体甲状腺组织结构特征相似。免疫组织化学染色结果显示,类器官模型中甲状腺标志物NKX2.1、PAX8和TG阳性,与来源组织生物标志物特征一致。ELISA检测结果显示,类器官模型上清液中可见T3、T4分泌,表明其具有甲状腺激素分泌能力。结论采用成人甲状腺组织构建的类器官模型稳定,为甲状腺功能减退症的再生医学治疗提供了新的方向。

摘要：基于真菌羊毛甾醇14α-去甲基化酶(CYP51)活性位点的三维结构设计并合成了新型四氢异喹啉类抗真菌先导化合物.体外抗真菌活性研究显示:设计的先导化合物具有较好的抗真菌活性.其中化合物5f和5g对于5种测试菌的抗真菌活性强于或相当于对照药物氟康唑.先导分子通过与靶酶活性腔氨基酸残基的非共价键结合产生抗真菌作用,避免与血红素辅基Fe原子发生配位结合,为一类具有新作用机理的非氮唑类抗真菌先导化合物.本研究为抗真菌药物研究提供了新的结合方式及结构类型.

摘要：目的　用超临界流体萃取法 (SFE)联用毛细管气相色谱法 (CGC)测定丹参药材中丹参酮IIA 的含量。方法　用溶解度参数理论预测丹参酮IIA 的溶解压力 ,再用正交设计法考察温度、改性剂量和动态萃取体积三因素对SFE萃取效率的影响。结果　SFE CGC法测定丹参药材中丹参酮IIA 简便快速 ,结果准确可靠 ,加样回收率为95 3% ,RSD =4 3 % ,n =3。结论　利用SFE CGC法测定丹参药材中丹参酮IIA,可提高分析速度 ,且使用有机溶剂少 ,对环境造成的污染小 ,与超声提取法比较 ,经t检验 ,显著优于超声提取法。

摘要：背景与目的:研究表明,STAT3(signal transducer and activator of transcription 3)蛋白在多种肿瘤组织或细胞中高表达,STAT3蛋白可能参与了肿瘤的发生与发展。本研究拟设计筛选出针对STAT3的高效反义核酸,研究STAT3反义核酸对人肺腺癌细胞A549增殖及凋亡的影响。方法:用RNAStructure4.2软件和STAT3 mRNA全长序列设计出10组反义STAT3序列,并分别转染A549细胞;Cell Count Kit(CCK-8)检测细胞增殖变化,倒置相差显微镜观察细胞增殖和凋亡的变化;Hoechst33258染色观察细胞凋亡形态变化,AnnexinⅤ/PI复染检测细胞早期凋亡,Western blot检测STAT3蛋白表达和磷酸化,及其下游Bcl-xL蛋白表达的变化,用碘化丙啶(propidium iodide,PI)单染结合流式细胞仪检测细胞周期变化。结果:设计出的10条反义序列对A549细胞增殖有明显抑制作用,AS10对细胞的增殖抑制率达到75.46%;反义核酸浓度越高,对A549细胞的增殖抑制效应越强(P<0.01)。反义转染后,胞膜皱缩和核固缩形态的典型细胞凋亡明显增多,AnnexinV/PI双标流式细胞仪检测发现,反义转染后能够促进细胞的早期凋亡(P<0.01),早期凋亡率达11.51%;而正常对照组细胞的早期凋亡率为5.18%。STAT3蛋白及其下游Bcl-xL蛋白表达变化明显下降,STAT3蛋白磷酸化水平也降低。PI单染结合流式细胞仪检测发现,正常对照组的S期细胞为44.47%,G1期的细胞则为48.49%;反义转染后的S期细胞明显减少(23.70%),G1期细胞明显增多(63.96%)。结论:通过计算机辅助设计筛选得到的高效STAT3反义序列对A549细胞有强烈的增殖抑制作用,能有效促进A549细胞的凋亡,其机理与反义STAT3抑制STAT3蛋白表达、降低磷酸化水平、下调Bcl-xL基因以及使细胞发生G1期阻滞有关。

摘要：目的:对近年来药学杂志中的药品广告进行回顾性调查,并介绍《药学服务与研究》杂志社在审核药品广告方面的体会,以促进药学专业类杂志刊登药品广告的规范化进程。方法:随机选取允许发布处方药广告的10种药学类专业杂志,从《中华人民共和国药品管理法》等相关法规中筛选出5项药品广告的基本内容:药品生产批准文号或进口药品注册证号、药品广告审查批准文号(简称广审号)、标示按医生处方购买和使用、适应证、禁忌证,对所调查广告进行审核,并进行描述性分析。结果:2003～2004年共计301则药品广告,合格率为41%。5项基本内容中广审号不规范和无"禁忌证"者分别为36%和37%,其中广审号为非广告发布地批准且未在发布地有关部门进行备案,以及中药广告无"禁忌证"现象比较严重。与2003年相比,2004年未标示"按医生处方购买和使用"由30%降到13%。结论:药学杂志中的药品广告需要严格审查,进一步规范。

摘要：清肝散结汤(QGSJ)是由14味不同中药组成的复方制剂,基于长期的实验观察和临床经验以不同组合成方用于肝癌的治疗。本研究建立了一种基于加速溶剂萃取(ASE)结合高效液相色谱-电喷雾飞行时间质谱(HPLC-ESI-TOF MS)的方法同时测定清肝散结汤中29种化学成分。使用70%乙醇作为提取溶剂,提取温度100℃,静态萃取时间5min,提取2次,以上条件采用正交设计和主成分分析进行优化。HPLC分离采用Kromasil C18色谱柱,梯度洗脱。TOF MS在负离子模式下检测,质量扫描范围m/z100~1 100。结果表明:清肝散结汤中29种成分具有良好的线性关系(r>0.994)和日内、日间精密度(RSD<5%);提取回收率在96.5%~104.5%之间。该方法快速、可靠,适用于复方中药的定量评价。

摘要：采用多重拷贝同时搜寻(MCSS)等方法对Bcl-2蛋白抑制剂结合腔进行分析.结果显示,结合腔可分成P1,L1,P2,P3和P4等5个区域,其底部呈疏水性,而P3部位不适合芳香性大基团的结合.结合腔侧面和边缘处分布有可与配体形成除疏水以外作用的多个重要残基.MCSS计算得到的各种性质官能团在结合腔内的能量优势位置和取向能与已知结合模式的高活性抑制剂的重要基团位置吻合得较好.

摘要：目的研究知母皂苷B-Ⅱ抑制人胃癌细胞株BGC-823和MGC-803增殖及迁移的作用机制。方法使用终浓度为50 ng/m L的知母皂苷B-Ⅱ处理BGC-823和MGC-803细胞48 h,用q PCR和蛋白质印迹实验分别检测细胞内清道夫受体A5(SCARA5)的mRNA含量及蛋白表达;采用生物信息学方法预测hsa-miRNA-766-3p与SCARA5 3′UTR区的结合位点,并通过荧光素酶报告基因实验进行验证;转染hsa-miRNA-766-3p mimic或siRNA-SCARA5至BGC-823、MGC-803细胞,24 h后使用50 ng/m L知母皂苷B-Ⅱ处理细胞48 h,用q PCR和蛋白质印迹实验检测细胞内hsamiRNA-766-3p相对含量和SCARA5蛋白表达,MTT法检测细胞的增殖活性及迁移能力。结果 50 ng/m L知母皂苷B-Ⅱ处理BGC-823、MGC-803细胞48 h能增强肿瘤细胞中SCARA5蛋白表达(P0.05)。与报告基因表达载体单独转染比较,hsa-miRNA-766-3p mimic和hsamiRNA-766-3p inhibitor与野生型荧光素酶报告基因共转染可分别抑制和增强细胞内荧光素酶活性(P0.05)。50 ng/m L知母皂苷B-Ⅱ处理BGC-823、MGC-803细胞48 h,细胞内hsa-miRNA-766-3p含量均降低,SCARA5蛋白表达则升高(P0.05),但SCARA5蛋白表达降低(P<0.01)。细胞增殖及迁移实验检测结果表明,与细胞对照或溶媒对照比较,经知母皂苷B-Ⅱ处理的胃癌细胞BGC-823和MGC-803增殖活性及迁移能力均降低(P<0.01),siRNA-SCARA5转染+皂苷处理的细胞增殖活性和迁移能力与单纯皂苷处理的细胞相比增强(P<0.01)。结论知母皂苷B-Ⅱ能够抑制hsa-miRNA-766-3p的表达,进而上调其靶基因SCARA5的表达,最终抑制胃癌细胞BGC-823和MGC-803的增殖和迁移。

摘要：随着教育体制的深化改革,任职教育作为教育体系中的重要构成部分,其对我国军医大学教育事业的长远发展具有重要的作用。对于军医大学而言,其采用任职教育能够有效完善军事人才培养体系,对现有的认知教育制度和培养模式加以改革,强化人才培养的质量。要想有效推进军医大学任职教育的发展,必须要改变传统的教学模式,将学历教育和任职教育进行有机结合,优化顶层设计,从而实现任职教育的创新发展。本文就对军医大学任职教育意义及方式进行深入分析和探讨。

摘要：微波炉问世于本世纪40年代,美国雷声公司研制成功了第一台微波炉.由于微波炉具有明显的节能、卫生、方便等一系列优点,一问世便迅速发展起来.目前微波炉不仅用于食品烹饪,而且也广泛用于组织标本的固定、脱水、透明、聚合和染色.在常规医学实验中应用微波技术既可节省工作时间,又可提高实验质量.但由于市售的微波炉大多为家用所设计的,因此在实验中采用微波技术时,必须事先对所用微波炉的性能进行简单测试,以便确定可靠的实验条件.