摘要：背景:近年来随着各种新型的人工合成修补材料问世,应用这类材料修补疾病所致的腹壁缺损也取得了很好的效果,但应用于战伤腹壁缺损的研究较少。目的:比较脱细胞真皮基质、聚丙烯补片以及传统方法修补战伤腹壁缺损的有效性和安全性。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-01/08在解放军第四军医大学西京医院及唐都医院动物实验外科实验室完成。材料:脱细胞真皮基质由烟台正海生物技术有限公司提供;聚丙烯补片购于北京。方法:27只成年杂种犬制作腹部开放伤动物模型后,随机分为3组,分别以脱细胞真皮基质、聚丙烯补片、传统修复方法进行修补。主要观察指标:3组分别于术后1,3,6个月时取材行光镜检查及抗拉力强度测定。结果:全部动物无伤口裂开、无腹壁疝形成,脱细胞真皮基质修补组脏面未与内脏粘连,聚丙烯补片修补组均与内脏粘连。组织切片苏木精-伊红染色检查表明脱细胞真皮基质较聚丙烯补片、传统修补更有利于成纤维细胞及血管形成,6个月内脱细胞真皮基质可逐渐降解替代;6个月时聚丙烯补片仍有炎症反应,表现了长期的异物影响;传统修补只是肌肉之间简单的瘢痕愈合,增殖较少,生长较慢。抗拉力试验结果提示在3个阶段除6个月时脱细胞真皮基质修补处与聚丙烯补片修补处抗拉力强度相等外,余均提示在抗拉力强度上脱细胞真皮基质修补处>聚丙烯补片修补处>传统方法修补处。结论:脱细胞真皮基质修复战伤腹壁缺损的效果等同于聚丙烯补片,均优于传统修复方法,安全性优于聚丙烯补片。

摘要：目的　优化设计一套引物 ,扩增全套人抗体Fd片段和L链基因 ,改善扩增效率 ,益于人源噬菌体抗体库的构建。方法　根据V BASE数据库提供的人抗体可变区胚系基因 ,在其家族分类基础上 ,根据FR1区 5’端保守序列重新分组 ,设计特异性的 5’端扩增引物。同时对设计引物的匹配情况进行分析 ,并应用PCR扩增和测序反应对其扩增效果进行鉴定。结果　Fd链 5’端扩增引物有 5条 ,κ轻链有 6条 5’端扩增引物 ,而λ轻链 5’和 3’扩增引物有 10条。分析表明 ,人抗体可变区胚系基因与 5’引物有较好的匹配率 ,数目较少 ,匹配率较高。PCR结果显示 ,全部的重链及轻链引物对均能高效扩增出特异性较高的目的片段。测序结果表明PCR扩增产物具有较好的亚类和可变区家族分布。结论　优化了一套扩增全套人抗体Fd片段和L基因的引物 。

摘要：背景:α-转化生长因子及表皮生长因子受体在不同病变中的表达和意义不尽相同。目的:观察α-转化生长因子及表皮生长因子受体在人类肝硬变组织中的表达。设计:非随机对照实验。材料:实验于2003-03/2004-05在解放军第四军医大学西京医院病理科完成。63份人类肝硬变组织选自解放军第四军医大学西京医院外科手术标本(患者知情同意),5份正常人类肝脏组织取自第四军医大学病理学教研室尸检组织(排除有肝脏疾病)。方法:运用免疫组织化学和原位杂交的方法对63份人类肝硬变组织及5份正常人类肝脏组织进行研究,计算α-转化生长因子及表皮生长因子受体阳性率并进行统计学处理。主要观察指标:免疫组织化学染色方法和原位杂交染色检测肝硬变组织中α-转化生长因子及表皮生长因子受体的表达。结果:免疫组织化学方法检测α-转化生长因子与表皮生长因子受体在63份肝硬变组织中的阳性率分别为84%(53/63)及52%(33/63),阳性产物为棕黄色颗粒,主要弥漫分布于肝细胞浆内,α-转化生长因子与表皮生长因子受体的表达在肝硬变组织中呈显著正相关(r=0.32,P0.05)。结论:在肝脏组织硬变形成过程中可能存在α-转化生长因子/表皮生长因子受体自分泌循环,而α-转化生长因子、表皮生长因子受体高水平表达是促使肝脏组织硬变形成的重要因素之一。

摘要：背景:bcl-2,c-myc基因在不同肿瘤中的表达和意义不尽相同。目的:探讨凋亡相关基因bcl-2和c-myc在人类大肠腺癌中的表达及其与预后的关系。设计:非随机对照的实验研究。地点、材料和干预:实验在解放军第四军医大学西京医院病理科完成。72例人类大肠腺癌选自西京医院外科手术及活检标本,5例正常人类结肠组织取自第四军医大学病理学教研室尸检组织(排除有结肠疾病)。运用HE染色和免疫组织化学方法对72例人类大肠腺癌及5例正常人类结肠组织进行研究,计算凋亡指数及免疫组化阳性率。主要观察指标:①不同分化程度的大肠癌凋亡指数。②大肠腺癌中Bcl-2及c-Myc的表达。③bcl-2和c-myc的关系。结果:大肠腺癌的细胞凋亡随肿瘤分化的不同,其差异有显著性意义(t=16.84,P<0.01),肿瘤分化程度越高,凋亡指数值越大。bcl-2和c-Myc在大肠腺癌中均具有较高程度的表达,两者的阳性率分别为61.1%和66.7%。Bcl-2与大肠腺癌的分化程度有关(χ2=11.29,P<0.05),肿瘤分化越低,其表达也就越低。c-myc在不同分化程度大肠腺癌的表达差异无显著性意义。Bcl-2和c-Myc在大肠腺癌组织中的阳性反应呈显著正相关(r=0.40,P<0.05)。结论:大肠腺癌细胞凋亡与肿瘤的恶性程度有关,bcl-2与c-myc均与大肠腺癌的细胞凋亡的调控有关。

摘要：背景:脑干孤束核是内脏痛信息向高位脑中枢传递的一个关键的中继站。形态学证据表明,大鼠孤束核中分布有大量的神经激肽B受体(neurokininBreceptors,NKR)。然而,孤束核中表达NKR的神经元是否参与内脏痛信息的传入与整合目前仍不清楚。目的:阐明孤束核中表达NKR的神经元在脑肠通路中传递内脏痛信息中的作用。设计:随机的对照实验性研究。地点和对象:12只SD大鼠购自第四军医大学实验动物中心。大鼠均为雄性,体质量220～250g,用随机数字表法分为实验组和对照组,每组各6只。干预:6只雄性大鼠吸入麻醉后,将2mL50g/L的乙酸经导管注入大鼠升结肠内,20s后再注入5mL生理盐水冲洗结肠。对照组大鼠则注射等体积的磷酸缓冲液(0.01mol/L)。24h后大鼠开胸经心脏灌流40g/L的甲醛。灌注毕后取出鼠脑修块,然后将含有孤束核的脑块在300g/L的蔗糖溶液中浸泡过夜,冰冻切片机切片。用抗FOS抗体和抗NKR抗体行免疫组化双重标记染色。免疫组化由第一作者完成,动物模型构建由第二作者完成,第三及第四作者负责免疫组化结果评估。主要观察指标:孤束核中NKR和FOS蛋白的共表达。结果:孤束核各个亚核中均有大量的NKR免疫阳性的神经元,但在内侧亚核和联合亚核中尤其浓密。阳性产物分布在细胞膜和树突上;胃肠道给予甲醛刺激后,表达FOS蛋?

摘要：目的:构建靶向大鼠CD40基因小分子干扰RNA(siRNA)真核细胞表达载体。方法:利用Ambion公司的网上设计工具,设计2个靶向CD40基因的发夹状siRNA,通过化学合成的方法合成2对分别互补的寡核苷酸链,退火后将双链DNA片段连接至pSilencer4.1-CMV neo vector的多克隆位点,转化扩增提取质粒,对重组质粒进行BamHⅠ和HindⅢ双酶切电泳鉴定和DNA序列分析鉴定。结果:经酶切电泳鉴定和DNA序列分析鉴定,目的片段与pSilencer4.1-CMV neo vector连接正确,靶向大鼠CD40基因的siRNA重组表达质粒构建成功。结论:成功构建了大鼠CD40基因的RNA干扰真核表达载体pSilencer4.1-CMV-CD40.1和pSilencer4.1-CMV-CD40.2,为进一步研究CD40基因在同种器官移植排斥反应中的作用奠定基础。

摘要：目的探讨微信、QQ等现代即时通讯服务工具在高等医学教育中的运用效果。方法将2014年度学习《外科学》神经外科学的100名学生,随机分为应用微信群和QQ群课后辅导的试验组和传统课堂辅导的对照组,每组均50名。随后统计其考试分数和通过自行设计的调查问卷进行效果评价。结果与对照组比较,实验组学生的考试成绩和问卷效果评价均得到提高(P<0.05或P<0.01)。结论将现代即时通讯服务工具,如微信群、QQ群等应用于本科生教学中,不仅调动学生的主观能动性和加强自主复习的能力,而且便于教师掌握学生的学习心理、能力和进程,极大的提高了教学质量。初步解决了我国目前高等医学教育理论课教学缺乏师生讨论和交流的平台问题。

摘要：目的设计并构建5个拷贝的缺氧反应元件(5HRE)增强子和甲胎蛋白启动子(AFPp)联合调控的自杀基因硝基还原酶(NTR)真核表达载体。方法设计引物作重叠PCR从大肠杆菌中克隆融合有6个组胺酸基因标签(6his-tag)的自杀基因NTR,用合成的HRE寡核苷酸单链退火,多次重组克隆构建5HRE。将NTR基因、5HRE和AFPp与酶切去除了巨细胞病毒即刻早期启动子(Pcmvie)的pIRES2-EGFP载体重组,构建携带5HRE、AFPp和NTR基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-5HRE-AFPp-NTR。结果成功克隆了融合6his-tag的NTR基因,NTR基因与Genbank公布的序列一致。成功合成了5HRE,测序与预期相符。将上述片段和AFPp重组到去除了Pcmvie的pIRES2-EGFP载体上,酶切鉴定和DNA序列分析无误。结论成功构建了真核表达载体pIRES2-EGFP-5HRE-AFPp-NTR,为下一步的体外实验奠定了基础。