摘要：目的:构建肿瘤-睾丸抗原NY-ESO-1与GST融合基因的原核表达载体,在大肠杆菌中表达并对融合蛋白NY-ESO-1/GST进行纯化和初步鉴定。方法:设计针对NY-ESO-1的特异性引物,采用聚合酶链反应(PCR)从睾丸组织的cDNA文库扩增NY-ESO-1基因片段,经上下游引物所引入的EcoR I和Xho I双酶切后克隆入原核表达载体pGEX-4T1中GST标签的下游,构建重组表达载体pGEX-4T1-NY-ESO-1,并将该载体转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中,IPTG诱导表达NY-ESO-1/GST融合蛋白,经不同浓度尿素洗脱纯化后,表达产物通过SDS-PAGE和Western blot法进行鉴定。结果:重组质粒经限制性内切酶EcoR I和Xho I双酶切鉴定和IPTG诱导表达NY-ESO-1/GST的SDS-PAGE分析表明,表达产物的相对分子质量(Mr)为44 000,与理论值相符,并主要以包涵体形式存在,灰度扫描分析显示融合蛋白表达量占菌体蛋白总量的90%,Western blot结果证实该NY-ESO-1/GST可与抗GST单克隆抗体(mAb)发生特异性结合反应,提示为融合蛋白。结论:成功构建了NY-ESO-1基因原核表达载体pGEX-4T1-NY-ESO-1,利用大肠杆菌表达系统,获得了较高纯度的包涵体形式NY-ESO-1/GST融合蛋白。

摘要：信息技术对教育发展具有革命性影响,以信息化带动教育现代化是促进我国高等教育改革创新和质量提升的重要途径之一,高等医学教育必须进一步加快对现有医学课程体系的信息化改造。数字化教材建设首当其冲成为当前高等医学教育信息化改造的关键问题之一。我国的医学数字化教材建设应该站在更高的起点上,重点把握好以下四个方面:首先,加强顶层设计,在适当保持各学科教材系统性的基础上引入整合医学新理念;其次,注重引导医学生逻辑思维和学习方式的转变;第三,充分利用信息化技术手段着重解决传统医学教学中的难点;第四,高度重视数字化教材建设与慕课课程的衔接问题。尽快提升我国高等教育医学数字化教材建设水平。