摘要：设计二套特异引物,用双温度点套式PCR方法,以煮沸法快速萃取样本DNA为模板,选择性扩增SSUrDNA特定片段用于人体间日疟原虫(P.v.)的检测和鉴定.实验表明,该系统检测P.v.的灵敏度至少可达1.08×10^(-6)(约10个原虫/μL全血);检测经镜检证实的30份采自我国五省疟区间日疟患者冻存血样、10份原虫率约为10^(-4)或厚血片可见原虫而薄血片未见原虫的低原虫率血样及10份、1984年采集在4℃干燥保存至今的间日疟患者滤纸血样,除一份滤纸血样扩增阴性外,其余均在同一大小位置(约516bp)产生特定的扩增片段;而20份非疟区采集的健康供血员血样、4株培养红内期恶性疟原虫(P.f)、1株人源弓形虫(T.g)、1株人源Leishman原虫(L.d)及空白对照均无此扩增带出现.此外,鉴定30份采自云南疟区、镜检确认为恶性疟患者血样及3份采自海南的非典型形态疟原虫感染血样,其中17份产生明显的P.v特定扩增带型,占样本数的51.5％.利用该系统检测及鉴定P.v,从样本处理到结果观察共约需4h.上述结果表明,该系统具备灵敏、准确,操作较为简便、快速,结果易于判定等优点,同时还具有鉴别虫种、确认有无混合感染的潜力.

摘要：设计2对针对恶性疟原虫（P．f.）小亚单位核糖体核糖核酸基因（SSUrDNA）的特异引物，采用双温度点套式聚合酶链式反应（PCR）技术，从用煮沸法快速萃取的样本DNA中，扩增***片段，进行恶性疟原虫的检测。结果表明，该系统扩增样本DNA片段大小恒定，经限制性酶切进一步分析，证实均为***目的片段，其检测原虫的灵敏度为0．8×10-6，较常规镜检敏感，并具有鉴别红内期早期阶段疟原虫种类和确认有无混合感染的潜力。因而认为该系统是灵敏、准确、简易、快速的疟疾诊断新方法，值得推广使用。