摘要：本文设计了兔侧胸部动脉化静脉皮瓣模型，将胸外侧静脉与同侧肱动脉吻合使之动脉化，胸背静脉保留作为回流静脉。与常用静脉皮瓣模型相比具有面积大，平整无死腔及不易污染等优点。静脉构筑形式及血流分布情况亦更接近人体皮瓣模式。此外本模型还可进行经典动静脉皮瓣的研究。

摘要：背景:近年研究表明,生长因子作为一种分子信号调控细胞的增殖、分化、迁移与代谢,其表达与调控在慢性创面愈合中起着很重要的作用。目的:观察血管内皮生长因子对创伤组织血管内皮生长因子受体,碱性成纤维细胞生长因子和血小板源性生长因子mRNA表达的影响,分析其促进损伤组织修复的作用途径。设计:对照动物实验。单位:解放军第四军医大学西京医院整形科。材料:实验用新西兰白兔6只,兔龄48～60个月。纳米微囊包裹的重组质粒DNA真核表达载体pcDNA3.1/myc-hisA-血管内皮生长因子165(VEGF165)由第四军医大学西京医院整形外科贾宁硕士惠赠。方法:实验于2004-10/2005-06在西京医院整形外科实验室完成。①以血管内皮生长因子165为目的基因,构建真核表达载体pcDNA3.1/myc-hisA-VEGF165,利用纳米微囊包裹制成纳米微囊-血管内皮生长因子165复合体。兔经麻醉后,在其耳腹侧制成直径为6mm的3个圆形创面,暴露软骨。以明胶海棉薄片蘸取纳米微囊-血管内皮生长因子165复合体100μL覆于每只兔一侧耳创面,外层覆盖无菌密封薄膜,作为血管内皮生长因子组;对侧每一创面以明胶海棉薄片蘸取100μL纳米微囊-空载质粒覆于创面作为对照组;在环切部位近端的兔耳皮肤作为正常皮肤组。②利用反转录聚合酶链反应方法观察术后14d损伤组织血管内皮生长因子受体,碱性成纤维细胞生长因子和血小板源性生长因子mRNA的表达变化。③术后14d,以创面为中心,切取1cm×1cm正方形组织块(含兔耳全层),制成标本,苏木精-伊红染色,光镜下观察新生肉芽组织的生长情况。主要观察指标:创伤组织血管内皮生长因子受体、碱性成纤维细胞生长因子和血小板源性生长因子表达。结果:①苏木精-伊红染色显示,血管内皮生长因子组创面肉芽生长及上皮爬行速度明显快于对照组。②反转录聚合酶链反应显示,血管内皮生长因子组损伤组织内血管内皮生长因子受体,碱性成纤维细胞生长因子和血小板源性生长因子mRNA的表达水平明显高于对照组(P<0.05)及正常组(P<0.01)。结论:外源性血管内皮生长因子可以上调创伤组织中血管内皮生长因子受体,碱性成纤维细胞生长因子和血小板源性生长因子的表达,血管内皮生长因子可能作用于其受体,通过与其他细胞因子的协同作用来实现其对伤口愈合的促进作用。

摘要：背景:既往实验表明,炎性因子与内皮细胞的功能有密切的关系,观察保护和损伤因素对体外培养人血管内皮细胞炎性因子作用的报道较少。目的:实验拟观察姜黄素和肿瘤坏死因子α对人脐静脉内皮细胞分泌核因子κB以及单核细胞趋化蛋白1mRNA的影响。设计、时间及地点:细胞观察实验,于2006-12/2007-08在解放军第四军医大学组织工程实验室完成。材料:健康人脐带由解放军第四军医大学唐都医院提供。内皮细胞培养采用M199完全培养基。方法:实验分为3组,正常对照组为无血清M199培养基;肿瘤坏死因子α组:在正常细胞培养液中加入浓度为10μg/L的肿瘤坏死因子α诱导损伤1.5h;姜黄素组:先在培养液中加入10μg/L的肿瘤坏死因子α30min诱导损伤,再分别加入终浓度为6.25,12.5,25,50,100mg/L的姜黄素孵育1h。主要观察指标:①四甲基偶氮唑盐法检测不同浓度姜黄素对人脐静脉内皮细胞增殖的影响。②免疫细胞化学染色法观察胞核内核转录因子κB的表达。③反转录-聚合酶链反应检测单核细胞趋化蛋白1mRNA的表达。结果:姜黄素可以提高肿瘤坏死因子α诱导损伤的人脐静脉内皮细胞活性(P<0.01),并呈一定剂量依赖性。肿瘤坏死因子α可刺激核因子κBp65表达的强度,姜黄素可以减少核因子κBp65的表达。与正常对照组相比,肿瘤坏死因子α作用30min后,单核细胞趋化蛋白1mRNA相对表达量明显增高(P<0.01);加入不同浓度的姜黄素作用1h后,单核细胞趋化蛋白1mRNA相对表达量明显减低(P<0.05,P<0.01)。结论:姜黄素对损伤的内皮细胞具有保护作用,其作用途径可能通过抑制核转录因子κB活性,并下调单核细胞趋化蛋白1mRNA的表达,从而阻滞了单核细胞的聚集。

摘要：目的:设计、筛选、构建并鉴定Mmp-9小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),并构建其慢病毒表达载体,为血管化疾病的防治提供理论依据及实验室数据。方法:针对基质金属蛋白酶9靶基因设计siRNA序列,并合成小发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)结构的DNA,与经AgeΙ和EcoRΙ酶切的pSIL-RFP连接、转化大肠杆菌感受态细胞,构建成携带Mmp9-shRNA慢病毒质粒载体(pSIL-RFP/MMP9-shRNA),PCR及测序鉴定后,Western blot筛选出携带最佳siRNA的慢病毒质粒载体,并利用慢病毒包装质粒(pHelper1.0和pHelper2.0)将其制备成MMP9-shRNA慢病毒,并测定病毒滴度为1×1010pfu/l。结果:PCR和DNA测序证实合成的含基质金属蛋白酶9短发卡RNA慢病毒载体寡核苷酸链正确插入pSIL-RFP载体,表明实验成功构建基质金属蛋白酶9RNA干扰慢病毒表达载体。结论:成功的构建并筛选出针对小鼠Mmp9基因沉默的特异性shRNA重组慢病毒,为血管化性疾病的防治研究提供基础。

摘要：目的探讨CT血管造影(computed tomographic angiography,CTA)及三维重建技术在背阔肌皮瓣游离移植修复头皮撕脱伤伴大面积颅骨外露创面中的应用价值。方法 2007年10月-2012年6月,收治9例严重头皮撕脱伤伴大面积颅骨外露女性患者。年龄23～54岁,平均38岁。致伤原因:机器绞伤6例,交通事故伤2例,高处坠落伤1例。其中3例伤后行头皮原位回植后坏死,6例行清创包扎。伤后至入院时间8 h～7 d,平均1 d。头皮撕脱范围为头皮面积的75%～90%,平均81%;颅骨外露范围为头皮面积的55%～70%,平均63%;2例伴单侧耳廓撕脱。术前对面颈部及背部血管行CTA及三维重建,分析颞浅动、静脉,面动脉,颈外静脉和胸背动、静脉解剖结构并测量管径。根据CTA检查结果,7例以背阔肌皮瓣修复创面,2例以背阔肌肌瓣联合植皮修复。7例患者根据术前设计顺利完成手术;2例术前颞浅血管显示较差者,以大隐静脉作为移植血管与相关血管吻合。背阔肌皮瓣切取范围20 cm×14 cm～25 cm×20 cm,供区减张缝合后植皮修复;肌瓣切取面积分别为23 cm×16 cm及16 cm×10 cm,供区直接缝合。结果术中血管管径测量结果与术前比较差异较小,不影响血管吻合。手术时间6～8 h,平均6.5 h。术后背阔肌肌(皮)瓣及植皮均成活,创面Ⅰ期愈合;供区切口Ⅰ期愈合。患者均获随访,随访时间3个月～2年,平均6个月。皮瓣质地柔软,皮肤无破溃。结论采用背阔肌皮瓣游离移植修复头皮撕脱伤伴大面积颅骨外露创面时,术前可行CTA检查明确供、受区可供吻合的血管解剖结构及管径,指导手术方案设计及实施,以缩短手术时间,提高术中血管吻合准确率。

摘要：目的:评价高分辨率超声检测技术在轴型皮瓣移植术前检测供区血管中的应用,了解轴型皮瓣的血供分布状况。方法:采用Acuson sequoia 512彩色超声检测仪彩色多普勒血流成像(CDFI)及彩色多普勒能量图(CDE)技术对15例轴型皮瓣内深部动脉于及其肌皮穿支动脉血管的数目、内径、走行方向及分布范围进行检测,进一步做出血流动力学定量分析。结果:彩色多普勒超声对15例拟行移植皮瓣的供皮瓣区动脉血管所作的超声影像和血流动力学检测,检出供区皮瓣内深部动脉干15条,肌皮穿支动脉49条,均与临床手术中检查动脉的内径、长度及其分布范围的情况相符,上述供区轴型皮瓣深部动脉干及肌皮动脉穿支检出率为100％,未见血管变异及缺如现象。通过彩色多普勒超声血流显像仪和脉冲多普勒血流频谱图,测得下列各项血流参数:收缩期最大血流速度(Vmax),舒张末期血流速度(Vmin),平均血流速度(Vmean),阻力指数(RI),每分血流量(CQ)。结论:高分辨率超声这一直观、无创性检测方法可以为术前正确选用轴型皮瓣类型,合理进行手术设计,以及准确评价轴型皮瓣供区血管状况提供科学依据。

摘要：目的:修饰hTERT核心启动子,构建shRNA表达载体,实现肿瘤特异性RNA干扰。方法:使用人工TATA盒修饰hTERT核心启动子,重建转录起点。将含有修饰后hTERT启动子的MluI/XhoI片段克隆至pGL3-OCP-shLuc的相应酶切位点,获得pGL3-mhTERT-shLuc。设计针对p53的shRNA编码序列,并以XhoI/XbaI克隆至pGL3-mhTERT-shLuc的相应酶切位点之间,获得pGL3-mhTERT-shp53。使用pGL3-mhTERT-shLuc与pGL3-control共转染人骨肉瘤细胞U2OS、MG-63和HOS,48h后测定虫荧光素酶活性,计算相对活性。使用pGL3-mhTERT-shp53不同的人骨肉瘤细胞,利用Western Blot分析转染前后p53的表达水平。结果:双酶切鉴定和DNA测序证实pGL3-mhTERT-shLuc和pGL3-mhTERT-shp53的序列与设计完全一致。pGL3-mhTERT-shLuc与pGL3-control共转染实验发现,在hTERT-U2OS细胞虫荧光素酶相对活性与对照组相比没有明显差异,而在hTERT+的MG-63和HOS细胞在转染后虫荧光素酶相对活性显著降低,与对照组相比抑制效率可分别达到69.7%和71.0%。Western Blot分析表明,与转染pGL3-mhTERT相比,使用pGL3-mhTERT-shP53转染MG-63和HOS后可显著抑制p53的表达,而U2OS的p53的表达水平与对照组没有明显改变。结论:我们成功使用TATA盒对hTERT核心启动子进行了修饰,利用其构建了shRNA表达?

摘要：目的　研究组织扩张对预构轴型皮瓣血供范围的影响 ,为临床上获取更大面积的预构轴型皮瓣提供理论指导。方法　在同一只兔子腹部的左右侧分别设计、完成以股动、静脉为轴型血管的预构皮瓣 ,右侧腹部仅预构皮瓣未埋置扩张器 (未扩张组 ) ,左侧预构皮瓣下埋置扩张器进行扩张 (扩张组 ) ,分别于预构术后 1、3、5、7、10、14、2 1、2 8、5 6天对扩张组与未扩张组预构皮瓣血供范围进行相关检测。结果　预构皮瓣经扩张后其轴型血管供血范围明显大于未经扩张的预构皮瓣 (P <0 .0 5 )。结论　扩张术可加速皮瓣预构进程 。

摘要：目前,临床上对于下睑袋矫正方法很多,主要有外路法(包括肌皮瓣法、皮瓣加肌皮瓣法)及内路法(结膜入路法).依据下睑眼袋形成的机理和解剖形态学特征,手术处理时,主要应从加强睑袋前壁(皮肤、肌肉、筋膜)和处理好眼袋内容物(眶脂肪)两方面着手进行[1].除上述两个关键点外,针对不同类型的眼袋采取不同的处理方法.本文就我们所做的300例临床资料论述具体手术操作时的经验和体会.

摘要：鼻尖是鼻的最突出部分,最为引人注目,是鼻整形术中最需注意的部位,同时也是最难以解决的部位.软骨缝合法往往由于东方人软骨发育薄弱,难以取得足够的鼻尖抬高和鼻尖改形效果;自体软骨植入法由于要增加自体软骨供区的额外创伤,难以让国内的受术者接受[1].因此,需要根据东方人的鼻解剖特点和美学要求,探讨适合东方人的鼻尖整形术式,我们根据以前自己的一些实验研究情况,对东方人鼻尖畸形的原因进行了划分,并据此设计了不同的手术方法.笔者矫治了17例这类病人,近期效果尚可,远期效果还有待于进一步追踪.