摘要：目的 :检测RhoC在胃癌细胞系中的表达 ,并构建其小干扰RNA(siRNA)表达载体。方法 :以Westernblot方法检测RhoC在多株胃癌细胞系中的表达。利用计算机辅助设计RhoC特异性siRNA ,体外合成siRNA基因并将其定向克隆入真核表达载体mU6pro。以脂质体法转染RhoC siRNA载体至高转移的人胃癌细胞系AGS中 ,以Westernblot方法鉴定RhoC siRNA对RhoC表达的作用。结果 :RhoC蛋白在具有高转移潜能的胃癌细胞系中表达增强。利用BbsⅠ和XbaⅠ双酶切法鉴定重组载体后 ,DNA测序证实合成的siRNA基因序列正确并已被准确克隆入mU6pro载体。RhoC siRNA载体可特异性抑制AGS细胞中RhoC的表达。结论 :RhoC特异性siRNA表达载体成功构建 。

摘要：目的探讨一种新的勿需缝合的完全腹腔镜下胃肠毕Ⅱ式吻合技术的安全性和可行性。方法2011年5．7月间第四军医大学西京消化病医院采用自行设计的吻合技术完成完全腹腔镜胃癌D2根治术12例。该术式采用环形吻合器行胃空肠吻合，再用切割闭合器于肠壁开口处行空肠输入袢或输出袢侧侧吻合，最后关闭肠壁开口。结果12例完全腹腔镜胃大部切除术均获成功，无中转开腹或中转腹腔镜辅助手术；手术时间（196．O±19．3）min，术中出血量（169．5±28．8）ml。切除淋巴结（25．1±3．3）枚，近端切缘和远端切缘分别为（8．8±2．4）cm和（6．9±5．5）cm。术后首次排气时间平均为（3．1±1．3）d，术后住院时间（4．5±1．9）d，住院期间内均未观察到明显并发症。结论该吻合技术操作简单、快捷，勿需镜下手工缝合．用于完全腹腔镜胃大部切除重建手术安全、可行。

摘要：目的： 拟获得编码ＩＰ１０ （ＩＦＮγｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ｐｒｏｔｅｉｎ１０） 和Ｃｒｇ２ （ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ ｇｅｎｅ２） 的ｃＤＮＡ 序列。方法： 针对ＩＰ１０ 和Ｃｒｇ２ 的ｃＤＮＡ序列设计相应引物， 通过反转录ＰＣＲ技术， 分别从用ＩＦＮγ及ＴＮＦα处理的人成纤维细胞及Ｂａｌｂ／ｃ 小鼠肝脏中， 扩增出编码ＩＰ１０ 和Ｃｒｇ２ 的全基因序列， 并将其克隆入载体ｐＵＣ１９及ｐＧＥＭ３Ｚｆ （＋ ） 中， 通过酶切及序列测定鉴定重组载体。结果： 经序列测定证实， 重组载体含有正确地分别编码ＩＰ１０ 及Ｃｒｇ２ 的ｃＤＮＡ序列。结论： 获得的阳性克隆分别含有３０６ｂｐ 和３１４ｂｐ 的重组片段， 为进一步对其生物学活性和配体进行研究奠定了基础。

摘要：目的 探讨胃癌新生血管靶向双模态分子探针在体MR和光学双模态成像的可行性.方法 将超顺磁性氧化铁纳米颗粒与Cy5.5-CX1耦联合成双模态分子探针DPs,测定探针的水合粒径和Zeta电位.取12只雄性裸鼠,建立胃腺癌皮下移植瘤模型.将12只鼠利用完全随机设计方法分为实验组与对照组,每组6只,分别通过尾静脉注射相同质量的DPs（实验组）和Fe3O4-Cy5.5（对照组）.于注射前及注射后4、8、12、18、24 h行T2WI,测量肿瘤内信号强度,计算对比噪声比（CNR）,并采用方差分析进行比较.选择2组肿瘤注射前及注射后（12 h）相同层面MR图像,计算信号降低百分比,并采用配对t检验进行比较.实验组和对照组鼠于注射药物后即刻及2、6、20、28、48 h行活体光学成像,观察体内的荧光分布.注射探针48 h后,处死各组实验鼠,分离皮下移植瘤及器官行离体荧光成像和病理检查.结果 常温下,Fe3O4-Cy5.5的平均水合粒径为（38.23±0.06）nm,平均Zeta电位为（0.29±0.16）mV;DPs的平均水合粒径为（39.49±0.16）nm,平均Zeta电位为（-4.15±0.79）mV.酶标仪检测偶联阳性率＞90％.实验组与对照组的肝、脾等网状吞噬系统MRI信号降低显著.实验组注射前及注射后4、8、12、18、24 h小鼠肿瘤的CNR分别为18.27±2.19、18.40±2.00、10.22±1.97、9.25±0.44、20.28±1.46和22.41±1.71,差异有统计学意义（F值=49.55,P＜0.01）,在注射探针后8、12 h CNR较注射前明显降低;对照组上述时间小鼠肿瘤的CNR分别为13.52±1.05、11.38±1.28、13.03±1.38、12.89±1.20、12.06±0.81和13.58±1.74,差异无统计学意义（F值=2.306,P＞0.05）.实验组肿瘤最外围信号降低百分比为（33.0±2.7）％,中央带为（22.0±1.6）％;对照组最外围信号降低百分比为（8.3±1.2）％,中央带为（3.8±0.9）％,2组肿瘤最外围的信号降低均比中央层显著,差异均有统计学意义（t值分别为-7.872和6.678,P均＜0.01）.实验组在注射探针后2～48 h肿瘤的荧光强度明显高于背景,对照组肿瘤与背景荧光强度差别不明显.离体组织显示荧光主要分布在肿瘤和肺脏.病理示肿瘤新生血管主要分布于肿瘤周边区域.实验组肿瘤内散在蓝染颗粒,实验组肾脏与对照组肾脏、肿瘤未见蓝染铁颗粒显示.结论 DPs可选择性聚集于胃癌,可用于MR光学双模态成像技术进行检测.

摘要：目的:构建用于RNAi的shRNA(small hairpinRNA)表达载体及检测其对低氧诱导因子-1(Hypoxia-inducibleFactor-1,HIF1)基因的沉默效果。方法:从人血基因组中PCR扩增出H1基因启动子,克隆入酶切处理后的pEGFP-C1载体片段中,此载体命名为pWH1。以人HIF1cDNA基因为靶标设计引物,退火后克隆入pWH1。新的载体转染SGC7901细胞,然后用RT-PCR和Western blot检测HIF1基因的表达改变。结果:构建的pWH1载体能很好地表达针对HIF1基因的shRNA,RT-PCR和Western blot的结果显示HIF1基因的mRNA和蛋白表达水平均明显下降。结论:成功构建了shRNA表达载体pWH1,这对于基因的功能研究具有重要的意义。

摘要：背景:构建大鼠小肠移植模型是研究小肠移植排斥反应的重要基础,实验中对动物无法进行长期持续的静脉输液成为延误实验顺利开展的最大障碍。目的:将自制旋转持续静脉输液装置与大鼠异位小肠移植模型相结合,验证输液装置的可靠性和动物模型的稳定性。设计、时间及地点:随机区组,对照观察实验,于2008-03/06在解放军第四军医大学西京医院消化病研究所全军医学重点实验室完成。材料:选用健康雄性近交系F344/NCrl BR大鼠48只为供体,LEW/Crl大鼠48只为受体,建立同种异体节段性异位小肠移植模型。方法:将移植后的大鼠以随机化完全区组设计分为3组(n=16):对照组、输液组和他克莫司治疗组。对照组大鼠仅行小肠移植,移植前后不做持续静脉输液。输液组大鼠给予持续输注肠外营养液。他克莫司治疗组持续输注肠外营养液+静脉注射他克莫司0.5mg/(kg·d)。主要观察指标:移植后观察移植大鼠的一般状况和存活时间,并于移植后3,5,7d分别取各组大鼠移植肠标本(n=3)进行组织病理学检查,每组剩余的大鼠作存活时间观察,观察期限为5周。结果:对照组大鼠平均存活时间为(5.4±1.7)d,手术成功率56.3%。采用旋转输液装置的输液组和他克莫司治疗组大鼠手术成功率为90.6%,与对照组比较,差异有显著性意义(P30d,存活时间超过5周,与对照组和输液组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组和输液组大鼠术后3,5,7d移植肠组织病理学检查分别符合轻、中、重度排斥反应。他克莫司治疗组大鼠术后3,5,7d未见明显排斥反应征象。结论:旋转持续静脉输液装置制作简单,固定安全可靠,能成功地为研究大鼠连续输液30d以上,与异位小肠移植模型联合应用,能建立稳定可靠的排斥反应模型。

摘要：目的　研究西安地区人乳头瘤病毒 (HPV)的感染与胃癌的关系 .方法　运用 PCR方法 ,同时设计 HPV共同引物和 HPV16型和 HPV18型巢式引物 ,对胃癌组织 (n=40 )、癌旁组织和非肿瘤组织 (n=10 )进行 HPV DNA的检测 .结果　胃癌 40例组织中 HPV 检出 15例 ,总检出率为37.5 % ;癌旁组织和非肿瘤组织未检出 .HPV的检出以HPV16型为主 ,占检出阳性的 80 .0 % ,且与癌组织的分化程度密切相关 .结论　 HPV的感染 ,主要为高危型

摘要：目的　构建以胃癌 MG7- Ag模拟表位为基础的DNA疫苗 .方法　将 H ind 酶切位点、MG7- Ag模拟表位和通用性辅助性 T细胞 (Th细胞 )表位编码序列的反向互补序列顺次设计于下游引物中 ,通过 2次聚合酶链式反应将 2种表位连接于一段载体基因 ,H ind 酶切位点位于载体片段与表位基因之间 .将目的基因插入 p UCm - T载体 ,酶切鉴定和序列测定证实后 ,利用 p UCm- T载体和 pc DNA3.1(+)载体共有的 Kpn 和 Xba 酶切位点 ,将目的基因亚克隆入真核表达载体 pc DNA3.1(+)载体 .酶切鉴定后 ,利用目的基因和pc DNA3.1(+)载体上的 H ind 酶切位点 ,H ind 酶切去除载体基因片段 ,得到胃癌 MG7- Ag模拟表位和通用性 Th细胞表位的真核表达载体 .结果　经序列测定证实 :PCR产物为载体基因、H ind 酶切位点、MG7- Ag模拟表位及通用性Th细胞表位的融合片段 ;最终得到的重组 pc DNA3.1(+)质粒含有正确编码以上 2种表位的基因片段 .结论　以胃癌MG7- Ag模拟表位为基础的 DNA疫苗构建成功 。

摘要：目的探讨体表检测小肠电的方法和肠易激综合征（ＩＢＳ）患者体表小肠电的主频有无变化。方法应用自适应滤波方法通过自行设计的生物电检测分析系统检测正常对照组２４例及ＩＢＳ组２６例受检者的小肠体表电活动。结果体表检测小肠电活动波形清晰；经功率谱计算对照组和ＩＢＳ组小肠体表电的主频分别为１０．８８±０．７０周次／分（ｃｐｍ）和１１．０３±０．８４ｃｐｍ，范围均为９－１２ｃｐｍ，两组比较ｐ＝０．１０６。结论本实验方法可在体表清晰地记录小肠电活动，ＩＢＳ患者空腹状态下体表小肠电主频可能与正常人一致。

摘要：在实验设计中，心理因素是非常重要的影响因素，如果控制不当，就会影响实验结果的可靠性和稳定性。本文针对发表在《美国医学会杂志》（JAMA）2008年9月的一篇文章，就运动对Alzheimer病高危人群的认知保护作用的研究进行了认真的分析，希望能带给科研工作者一些启示。