摘要：2,3-二磷酸甘油(2,3-DPG)是血红蛋白氧亲和力的变构调节剂之一,它能与脱氧态血红蛋白(T态)结合,降低其对氧气的亲和力,增加血红蛋白在肌肉等组织中的释氧量,对维持机体缺氧有不可或缺的作用。而2,3-DPG由于透膜性较差,通过外源给药的方式起到的效果极为有限,设计可透膜的血红蛋白变构剂可为抗缺氧药物研究提供新的途径。本研究报道了2,3-DPG的作用方式、2,3-DPG类似物的研究进展及相关功能表征方法,为合成新的2,3-DPG类似物提供新的思路。

摘要：氮氧自由基HPN作为一种新型的自由基清除剂,具有良好的抗缺氧活性。为了改善HPN的溶解性和抗缺氧活性,根据活性基团拼接原理,合成了一系列糖基化三氮唑HPN衍生物。首先以乙腈为溶剂、碳酸钾为碱,HPN与1-溴丙炔反应将炔丙基引入HPN分子中,然后在CuI/DIPEA催化下和乙酰叠氮糖发生1,3-偶极环加成反应合成乙酰糖基化三氮唑HPN衍生物2a~2e,最后在CH_(3)ONa/CH_(3)OH条件下脱除乙酰基得到5个糖基化三氮唑HPN衍生物3a~3e。通过常压密闭缺氧实验和急性减压耐受实验考察化合物的抗缺氧活性,结果表明,化合物3a~3e均可以延长常压密闭缺氧小鼠的生存时间,降低急性减压小鼠的死亡率。化合物3a~3e合成方法简便,反应条件温和、产率较高,其中化合物3a~3d的水溶性明显改善,同时表现出类似或者优于HPN的抗缺氧活性。

摘要：目的:采用纳米晶体技术改善抗缺氧新结构化合物7-羟乙基白杨素(7-HEC)的溶解性,制备7-HEC纳米晶体,并进行理化性质表征和释放行为评价。方法:使用反溶剂沉淀结合超声分散法将7-HEC制备成纳米晶体,以平均粒径和PDI作为评价指标,进行单因素试验设计优化处方工艺,经差示扫描量热法(DSC)、X射线衍射法(XRD)对纳米晶体的晶型结构进行表征,并考察其体外释放行为。结果:筛选出7-HEC纳米晶体最佳制备工艺:HPMC和SDS以2∶1的比例作为稳定剂,药载比为2∶1,制得的7-HEC纳米晶体为乳状混悬液,粒径为(281.77±1.32)nm,PDI值为0.17±0.02。纳米化后的7-HEC晶型部分发生了变化,在84 h内,纳米晶体累积释放率达到84.65%,而原料药释放率仅为20.22%。结论:7-HEC纳米晶体粒径小且分布均匀,提高了释放率,这为7-HEC制剂进一步开发提供了依据,具有较好的应用前景。

摘要：目的构建SLC6A4基因RNA干扰(RNAi)-短发夹RNA(shRNA)慢病毒表达载体,建立慢病毒介导沉默SLC6A4基因的PC12细胞稳转细胞系,检测SLC6A4基因沉默对缺氧诱导的细胞凋亡的影响。方法设计合成3条针对SLC6A4基因的shRNA干扰序列,构建于慢病毒载体质粒GV248中,在293T细胞中共转染进行慢病毒包装。转染大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤PC12细胞,荧光显微镜观察GFP荧光,筛选最佳shRNA干扰序列,应用嘌呤霉素筛选出稳定转染的细胞株。应用RT-PCR方法检测SLC6A4基因的表达,Western blot方法检测蛋白5-HTT的表达变化,流式细胞术检测沉默SLC6A4基因对缺氧诱导的PC12细胞凋亡的影响。结果成功构建SLC6A4-shRNA慢病毒载体并转染PC12细胞,与正常对照组及干扰对照组比较,干扰组细胞内SLC6A4基因和蛋白表达明显降低(P<0.01),证实慢病毒载体能够有效沉默SLC6A4基因,沉默SLC6A4基因可以逆转缺氧诱导的细胞凋亡。结论通过shRNA慢病毒载体途径可有效沉默PC12细胞SLC6A4基因,沉默SLC6A4基因可以逆转缺氧诱导的细胞凋亡。

摘要：为了提高氮氧自由基HPN的靶向性和抗缺氧活性,本研究基于大中型氨基酸转运体(LAT-1)在脑组织高表达的特点,将HPN同酪氨酸通过不同长度烷基链相连,设计合成了2个脑靶向HPN衍生物。化合物7、8产率均在60%以上,产物结构经红外光谱(IR)、电子顺磁共振(EPR)、高分辨质谱(HRMS)分析确认。抗缺氧活性实验结果表明:两个化合物可以延长常压密闭缺氧小鼠的生存时间,降低急性减压缺氧小鼠的死亡率,并且在仅为HPN给药剂量一半的情况下表现出与HPN相似的抗缺氧活性。

摘要：目的:设计合成长链取代的2-(4′-羟基苯基)-4,4,5,5-四甲基咪唑烷-1-氧基-3-氧化物(HPN)衍生物,以增强HPN的抗缺氧活性。方法:以乙腈为溶剂、碳酸钾为缚酸剂,60℃反应条件下将HPN分别与6-溴己醇、6-溴己酸乙酯和6-溴己烷进行烷基化反应得到3个长链亲脂性HPN衍生物1、3和5;衍生物1在氢氧化钠甲醇/水体系下经过水解反应得到衍生物2;以二氯甲烷为溶剂,N,N′-二异丙基碳二亚胺为脱水剂,HPN与己酸进行酯化反应,得到衍生物4。采用红外光谱、电子顺磁共振和高分辨质谱表征衍生物1~5的结构,高效液相色谱法检测衍生物的纯度,计算油水分配系数(logP值)评估衍生物的脂溶性,并通过缺氧小鼠常压密闭缺氧实验和急性减压耐受实验考察HPN及衍生物1~5的抗缺氧活性。结果:5个衍生物的结构经红外光谱、电子顺磁共振和高分辨质谱分析确认,产率均在92%以上,纯度均在96%以上。衍生物1~5的logP值分别为2.78、2.00、2.04、2.88和3.10,均高于HPN(0.97);在给药剂量为0.3 mmol/kg时均能显著延长常压密闭缺氧小鼠的生存时间,并将急性减压缺氧小鼠的死亡率分别下降至60%、70%、60%、70%、40%。结论:衍生物1~5的合成方法简便,产率较高,且在剂量较小的情况下,仍然表现出类似或优于HPN的抗缺氧活性,其中衍生物5的活性最佳。

摘要：以4′⁃羟基⁃2⁃苯基硝基氮氧自由基(HPN)与四乙酰溴代葡萄糖为原料,CHCl3⁃H2 O混合体系为溶剂,四丁基溴化铵(TBAB)为相转移催化剂,碳酸钾为碱,设计合成得到HPN乙酰化葡萄糖苷,然后在CH3 ONa/CH3OH体系中脱去乙酰基得到了HPN葡萄糖苷,化合物结构经IR、EPR、EI⁃MS和元素分析确认.常压密闭缺氧实验结果表明:HPN葡萄糖苷能够显著延长小鼠在密闭甁中的存活时间,表现出显著优于HPN的抗缺氧活性.

摘要：为了提高天然产物白杨素的生物活性,以长链烷基为桥联基,通过2步反应将白杨素与线粒体靶向配体三苯基膦偶联得到了3个线粒体靶向白杨素衍生物。目标化合物分子结构经红外光谱(IR)、核磁共振谱(1H NMR和13C NMR)和质谱(MS)分析确证。常压密闭缺氧实验结果表明:3个衍生物均能延长缺氧小鼠的存活时间,且活性显著优于白杨素。

摘要：目的设计合成出一种可以提高氮氧自由基HPN抗缺氧活性及对脑组织具有靶向性的化合物。方法以氮氧自由基HPN和四种二溴取代烷烃为原料,通过取代反应得到四个烷基链偶联的双氮氧自由基衍生物,并通过小鼠常压密闭实验确定其抗缺氧活性。结果产物结构经电子顺磁共振、红外光谱、质谱和元素分析确认,与目标化合物一致,进一步通过常压密闭实验进行抗缺氧活性筛选,结果表明:四个衍生物均能延长缺氧小鼠的存活时间,且活性优于HPN(P<0.01)。结论采用的合成方法操作简单,条件温和、产率较高,并且这些衍生物均表现出了较好的抗缺氧活性。