摘要：该研究旨在建立散装即食食品中沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌3种食源性致病菌的多重荧光定量PCR检测方法,根据沙门氏菌侵染上皮细胞表面蛋白的invA基因、金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶(nuc)基因、蜡样芽孢杆菌的cer A基因分别设计3对特异性引物与探针,并对体系中引物探针的浓度以及退火温度等反应条件进行优化筛选,建立多重荧光定量PCR检测方法,同时评估其特异性、灵敏性及重复性,并应用该方法检测散装即食食品样本中致病菌,同时与国标法比对。结果表明,建立的多重荧光定量PCR检测方法能特异性地扩增沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌3种目标菌,其他菌株均不扩增,灵敏度分别为4×10^(2)、3×10^(2)、2×10^(2)cfu/mL,且批内和批间变异系数均小于2%,重复性和稳定性良好。同时用国标法和多重荧光定量PCR法对100份散装即食食品样本进行检测比对,多重荧光定量PCR法的阳性检出率略高于传统国标法,且检测时间大幅缩短。综上所述,建立的多重荧光定量PCR检测方法特异性强、灵敏度高、快速准确,在食源性致病菌快速筛查方面具有良好的应用前景。

摘要：目的优选三叶青热风干燥工艺。方法以干燥后药材中总黄酮、多糖、总多酚和β-谷甾醇为评价指标,采用CRITIC法计算权重系数,结合正交设计法,考察润软时间、切片厚度和干燥温度对干燥工艺的影响。结果 CRITIC法得出三叶青中总黄酮、多糖、总多酚和β-谷甾醇权重系数分别为0.21,0.34,0.19,0.26,正交设计法得出热风干燥最佳工艺条件为润软3 h,切片厚度7 mm,干燥温度60℃,总黄酮、多糖、总多酚和β-谷甾醇含量分别为18.1,91.3,8.81,0.36mg·g^(-1)。结论 CRITIC法确定的权重系数客观、真实,可以反映三叶青药材中各活性成分信息;优选得到的热风干燥工艺稳定可行,重复性好,适合产业化推广。

摘要：肉类真假鉴定是食品检测工作的内容之一,目前已有多种基于PCR的肉类鉴定方法,但是鉴定种类和效率受限。本研究设计了一对基于普通PCR技术可同时鉴定8种动物源性成分的通用引物并建立了鉴定方法。该引物以线粒体DNA为靶标,利用扩增产物中不同物种间的插入缺失多态性片段大小即可鉴定山羊、绵羊、鹿、水牛、牛、牦牛、猪和骆驼8个物种,扩增后分别得到728 bp、704 bp、504 bp、453 bp、448 bp、431 bp、396 bp和326 bp的片段,每种PCR产物经Ssp I酶切后产生数量和大小不同的片段,可以进一步清晰鉴别8个物种。引物特异性测试表明和其他常见肉类动物DNA无交叉反应,DNA检测最低限度在0.01~0.05 ng。应用本方法对40份市场肉类及产品的检测表明,羊肉串、羊肉卷以及特色畜产品如驼肉、鹿肉和驴肉存在较多的掺假行为。与其他现有PCR检测方法相比,该方法具有简便易行和高通量的优点,可以作为肉类掺假筛选检测的常规方法。

摘要：建立了三引物PCR鉴定牛羊猪源性成分的方法,为肉类及产制品掺假鉴定或肉品溯源提供了简单易行的方法。通过对比牛羊猪的线粒体DNA(mt DNA)全序列,在保守区设计通用引物,在特异性区域设计特异引物并结合三引物PCR技术,扩增3个物种的特异性片段,羊、牛和猪产生片段大小分别为570、549、420 bp,依据片段大小可以在一次PCR中鉴定3个物种。建立的方法简单易行,特异性和灵敏度好,可以在肉类及产制品鉴定和溯源中应用,提高了检测效率。

摘要：目的：观察健脾消癌方联合mFOLFOX6化疗对胃癌患者增效减毒的作用。方法：将55例胃癌患者随机分为对照组25例和治疗组30例,其中治疗组和对照组分别有2例和3例脱落病例,对照组采用mFOLFOX6化疗方案：静脉滴注奥沙利铂（85 mg/m^2）和1-LV（100 mg/m^2）连续2 h,随后快速静注5-FU（400 mg/m^2）,接着静脉维持5-FU（2400 mg/m^2）46 h。于化疗1周后口服健脾消癌方,1贴/d,连续服药8周。所有患者均按化疗方案治疗10个周期。观察两组胃癌患者的临床疗效,生活质量,不良反应和相关肿瘤标志物并进行比较。结果：两组患者近期疗效评估显示,治疗组RR为71.4%,DCR为89.3%;对照组RR为40.9%,DCR为81.3%。χ2检验结果显示,两组患者RR：χ2=4.711,P=0.030（P〈0.05）;DCR：χ2=0.571,P=0.450;KPS评分表明治疗组患者生存质量提高率为71.4%,对照组为45.4%;两组患者在治疗过程中均有一定比例患者产生不良反应,与对照组相比,治疗组患者白细胞、血小板异常,肝肾功能异常,胃肠道反应和外周神经毒性发生率均显著性降低,且差异具有统计学意义（P〈0.05）;与治疗前相比,两组患者治疗后CEA、CA125、CA199和CA724均明显下降,且统计结果均有显著性差异（P〈0.05）,且治疗组各肿瘤标志物降低程度更大,其中CEA下降较对照组差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：健脾消癌方联合mFOLFOX6化疗能有效提高患者的临床疗效,改善患者的生存质量,减轻不良反应和相关肿瘤标志物。

摘要：目的筛选适于鉴定乌贼的DNA条形码,建立鉴定舟山常见乌贼种类的DNA条形码技术体系。方法用聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)对现有5组DNA条形码引物组合进行了筛选,设计一对新的DNA条形码引物以供筛选备用。结果现有引物与部分乌贼的DNA模板存在错配而缺乏通用性,在部分乌贼DNA的扩增受阻。本实验设计的12S rRNA基因引物可以特异性扩增乌贼的DNA,提高了乌贼鉴定的准确度。结论本研究设计的12S rRNA基因引物可以作为现有乌贼DNA条形码鉴定的补充。