摘要：本文选择种特异性引物MPV、PF检测采自云南混合流行区门诊病人的滤纸干滴血119例,并与传统镜检法比较。MPV引物根据P.v.线粒体细胞色素C氧化酶基因序列设计,扩增产物片断为374bp,PF引物根据p.f.中度重复序列PBK1-14基因序列设计,扩增产物片段为206bp。MPV引物系国内首次应用。血样本处理采用1％Tritonx-100裂解煮沸法,并作了改进。其研究结果显示:PCR法与镜检法符合率为86.6％。PCR法:P.v.阳性率为64.7％,P.f.阳性率为29.4％,混合感染率为7.6％,误诊为0,漏诊率为2.5％;镜检法:P.v.阳性率为58.8％,P.f.阳性率为2.7％,混合感染率为3.4％,误诊为2.5％,漏诊率为8.4％。本PCR诊断疟疾方法具有准确、敏感、快速、简易等特点,有潜在的现场应用价值。

摘要：用 ５ 种不同的 Ｐ．ｖ．引物分别对间日疟原虫 Ｄ Ｎ Ａ 进行 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增，在比较和分析各引物 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增结果的敏感性和特异性的基础上，筛选出一对根据间日疟原虫线粒体细胞色素 Ｃ氧化酶基因序列设计的引物为最佳引物，其检测敏感度可达到每μｌ血中 ０．２４ 个疟原虫。同时还对血样本处理方法进行了改进，从而建立了一种更为简捷、快速、经济且适用于现场应用的间日疟原虫 Ｐ Ｃ Ｒ检测方法。并利用该方法对２３８ 例门诊发热病人滤纸干血滴样本进行检测，与传统镜检法进行了比较。结果显示， Ｐ Ｃ Ｒ 方法对间日疟的误诊率（０）和漏诊率（１．７％ ）明显比镜检的误诊率（４．２％ ）和漏诊率（４．２％ ）低，具有比常规镜检法更敏感、特异的优点。

摘要：通过５ 对根据恶性疟原虫不同基因序列设计的引物筛选及７ 种从滤纸干血滴中快速制备疟原虫ＤＮＡ模板的方法的比较，以建立一种敏感、特异、简便、快速的聚合酶链反应（ＰＣＲ） 检测恶性疟原虫的方法。结果表明，根据恶性疟原虫中度重复基因序列ｐＢＲＫ１１４ 设计的引物，可从恶性疟原虫ＤＮＡ 中扩增出２０６ ｂｐ 大小的ＤＮＡ片段，而间日疟原虫、人白细胞ＤＮＡ均无此扩增带出现，并至少可检测出原虫血症为５ ×１０－ ７ 的感染水平，且适用于我国不同地理株恶性疟原虫的检测；滤纸干血滴样本经生理盐水溶血煮沸法处理的ＰＣＲ 扩增效果最为理想，且简易、经济、重复性好；在云南疟疾流行区采集的３６０ 份血样中，ＰＣＲ 法与镜检法符合率为９７ ．５％ 。本研究建立的ＰＣＲ 检测恶性疟原虫方法具有敏感、特异、简易和快速的特点，便于现场推广应用。

摘要：为构建弓形虫速殖子期表达的基因的完整长度cDNA文库 ,用CF 11纤维素柱快速提纯速殖子 ,以盐酸异硫氰酸胍 (AGPC)一步法抽提总RNA ,oligo dT纤维素分离mRNA后 ,用ClonTech公司的SmartTMPCRcDNA文库构建试剂盒 ,构建了弓形虫RH株的表达型文库。获得 5× 10 6个独立克隆 ,重组率为 99% ,插入片段的平均长度约为 1kb。根据已知序列设计引物 ,从cDNA文库中扩增出编码棒状体蛋白 1(ROP1)的基因 (不含编码信号肽的序列 ) ,本文库可望用于弓形虫疫苗研究的候选基因的筛选。