摘要：斜纹夜蛾核型多角体病毒Ⅱ(Spodoptera lituramulticapsid nucleopolyhedrovirus,SpltMNPVⅡ)是一种新发现的繁殖率和毒力极强的病毒株,其全基因组序列已经测定,共149个ORFs。对SpltMNPVⅡBV和ODV的质谱分析表明,ORF59位于ODV中,是一个功能未知的ORF。本研究根据SpltMNPVⅡORF59基因序列设计引物,经PCR扩增,克隆了ORF59基因。核苷酸序列分析表明,克隆片段上游具有4个TATA box,一个早期启动子CAGT和一个晚期启动子ATAAG。读码框含645 bp,编码214个氨基酸的蛋白质,推定分子量为25.4 ku。将ORF59片段克隆至原核表达载体pET-28a(+),经IPTG诱导后在大肠杆菌BL21中融合表达,SDS-PAGE分析表明在约29 ku处有特异性表达条带,经Western blot验证该蛋白即为融合表达的目的蛋白。融合表达产物经纯化后,免疫新西兰大白兔获得ORF59多克隆抗体。上述结果为深入研究ORF59的结构与功能提供基础。

摘要：试验通过在异育银鲫日粮中添加FeSO4·7H2O,补充量分别按照100、200、300、400、500mg/kg5个浓度梯度设计,而Cu、Mn、Zn在各试验组中分别按照3.5、30、120mg/kg添加,经过54d养殖试验,试验结果显示:①铜的主要贮存器官是肝胰脏、心脏和肾脏,分别占器官中铜总量的14.96%、14.44%、12.15%;锰在脊椎骨(11.91%)、脾脏(11.50%)、肾脏(11.12%)含量较高;锌在肠道中含量最高,平均值达到(1120.00±19.45)mg/kg,占22.28%。②日粮铁补充量与头骨中铜呈显著的正相关(R=0.88,P<0.05),与肝胰脏铜呈显著的负相关(R=-0.88,P<0.05);日粮铁补充量与鳃盖骨中锰含量呈显著正相关(R=0.91,P<0.05);日粮铁和脾脏中锌含量呈显著正相关性(R=0.93,P<0.05)。

摘要：目的建立产时护理满意度评价体系及其应用方法,探索提高产时护理服务质量的途径。方法参照国内外成熟的临床患者满意度量表,设计并编制产科领域产时护理满意度调查表。在产妇和家属中设置对照组和干预组,通过人文干预比较满意度得分差异,评价干预效果。结果人文干预前产时护理满意度量表各条目得分以及四项因子得分相关分析结果显示,年龄与接产技术呈正相关(P=0.012),学历与产程进展(P=0.005)、镇痛法(P=0.036)、腹压(P=0.024)、接产技术(P=0.021)呈正相关,收入与自我介绍(P=0.030)、产程进展(P=0.039)、接产技术(P=0.019)呈负相关,与沟通呈正相关(P=0.041)。收入与主动沟通因子呈正相关(P=0.043),与专科技术因子呈负相关(P=0.033)。干预组产时的护理满意度各条目及四个因子的得分与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.001)。结论创新设计编制的产房专科产时护理满意度量表可及时发现产时护理服务质量问题,以及时采取切实有效的干预措施,可显著提高产时护理满意度。

摘要：为研究斜纹夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera litura multicapsid nucleopoledrovirus,SpltMN-PV)侵染规律,根据SpltMNPV中国株(G2)ORF135基因序列设计引物,经PCR扩增,从SpltMNPV日本株(B)基因组中克隆了pif-2基因。核苷酸序列分析表明,该基因是甜菜夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera exigua nucleopoledrovirus,SeMNPV)pif-2的同源物,读码框含1278 bp,编码425个氨基酸的蛋白质,推定分子量为48.6 kD。与其他杆状病毒的同源物比对显示,SpltMNPV-JP-B PIF-2蛋白中14个Cys残基高度保守。联配分析表明,SpltMNPV-JP-B pif-2的核苷酸序列与其他13种核型多角体病毒的同源性有较大差异。将pif-2克隆至原核表达载体pET32a(+),经IPTG诱导后在大肠杆菌BL21中获得了融合表达,SDS-PAGE分析表明在约69 kD处有特异性表达条带,经Western blot验证该蛋白即为融合表达的目的蛋白。

摘要：导致"环境因素对鼠妇分布的影响"实验失误的因素有很多,本文就双因子变量设计实验装置、实验设计方法的进阶及对实验结果的反思三方面进行探讨,寻找提高实验效果的办法。

摘要：目的建立逆转录环介导等温扩增快速检测风疹病毒RNA的方法。方法选取保守基因E1设计引物,建立并优化RT-LAMP反应体系,同时进行特异性和敏感性评估。在此基础上应用建立的方法对46例ELISA检测阳性的孕妇血清标本进行检测,并与RT-PCR相比较。结果建立的方法仅对风疹病毒RNA扩增出特有的梯状条带,酶切结果与预期相符。46例孕妇标本经RT-PCR和RT-LAMP检测,分别检出28例和29例。结论该方法特异性强、敏感性高、简便快速且成本低,有望在临床检测中发挥一定的作用。

摘要：本试验通过在日粮中添加FeSO4·7H2O,补充量分别按照100、200、300、400、500mg·kg-15个浓度梯度设计,以异育银鲫为试验对象,经过54d养殖试验,测定了14种器官中铁元素含量,其结果是铁主要贮存在脾脏中,平均含量为1993.27±171.63mg·kg-1,占总量的16.14%;而鳍条、鳃盖骨、头骨中含量最低,3者共占12.32%。相关性分析显示日粮铁补充量和肾脏、鳍条中铁含量呈显著性相关关系,相关系数R分别为0.91、0.90(P<0.05)。

摘要：设计一对特异性的引物,以苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)基因组为模板,经PCR克隆出类芋螺毒素基因(ctx-like gene)作为重组病毒的外源基因,并在具有强毒力的斜纹夜蛾核型多角体病毒株(SpltMNPVⅡ)的基础上,利用蜕皮甾体尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶基因(egt)同源重组臂DNA序列,构建了含有多角体基因启动子启动的类芋螺毒素基因和p10基因启动子启动的增强型绿色荧光蛋白基因(egfp)的重组转移载体psk-△egt-Pph-ctx-Pp10-egfp,为进一步研制高效重组SpltMNPV生物杀虫剂奠定了基础。

摘要：细胞周期素E（cyclinE）是调控细胞周期从G1期进入S期的关键因子。利用家蚕基因组数据库信息设计引物,克隆家蚕cyclinE在5龄幼虫不同组织表达的cDNA序列,获得该基因的6种不同剪切变体,这6种剪切变体前4个外显子和最后一个外显子都相同,变化主要集中在第5~7外显子处。同源性比对显示,不同物种来源的cyclinE周期蛋白盒区域具有较高的保守性,有35个氨基酸的共同保守序列,该区域可能也是家蚕cyclinE的特异识别并结合细胞周期素依赖蛋白激酶的功能区域。利用实时定量PCR分析显示,cyclinE在家蚕5龄第3天幼虫的中肠、脂肪体、丝腺、脑、马氏管、精巢、卵巢、血液等8种组织、器官中均有表达,并且在脂肪体中的表达相对较高,推测cyclinE基因在家蚕脂肪体细胞分裂过程中发挥重要作用。

摘要：为了探究饲料脂肪和添加水飞蓟素对草鱼鱼体脂肪酸组成的影响,试验采用2×3双因素设计,脂肪水平为4%和8%(LL和HL),水飞蓟素浓度为0、100、200 mg/kg(SM0,SM100,SM200),配制6组等氮等能饲料,饲喂360尾初重为(27.43±0.17)g的草鱼12周,每组4个重复。结果显示,增加饲料脂肪水平显著影响了鱼体组织脂肪酸组成(P0.05)。组织与饲料脂肪酸组成相关性结果显示,肌肉和腹腔脂肪组织相关性(r=0.91,0.91)均显著高于肝胰脏(r=0.59)(P<0.05);与LL组相比,HL组的腹腔脂肪组织的相关性显著提高了10.34%(r=0.96和r=0.87);而HL组肝胰脏的相关性则显著降低了44.74%(r=0.42和r=0.76);水飞蓟素添加显著影响了肌肉和腹腔脂肪组织相关性,SM100组肌肉的相关性显著高于SM200组,增加了3.33%(r=0.93和r=0.90;P<0.05);在低脂肪水平时,SM100(r=0.91)和SM200(r=0.87)组的腹腔脂肪组织相关性显著高于SM0组(r=0.84)(P<0.05)。研究表明,增加饲料脂肪水平,导致各组织与饲料脂肪酸组成的相关性存在较大差异,这可能与不同组织在应对饲料脂肪水平以及脂肪酸利用和转化等适应或调节策略不同有关。在低脂肪水平下,添加水飞蓟素有利于提高腹腔脂肪组织与饲料脂肪酸组成的相关性;水飞蓟素对不同组织与饲料脂肪酸组成的相关性的影响存在组织差异性。