摘要：原癌基因c-Myc虽然在许多肿瘤组织中特异性高表达,但它也是机体正常细胞生长与增殖所必需的因子,然而目前家畜诱导多潜能干细胞(iPS)研究中关于多功能转录因子cMyc的报道很少。为此,研究拟利用蛋白转导区域(PTD)的跨膜作用,构建TAT-bc-Myc-9R融合表达载体,并对其进行原核表达,旨在为转录因子蛋白重编程牛体细胞奠定基础。试验以牛c-Myc基因编码区序列为参考,设计并合成含酶切位点、跨膜转导肽TAT和9R的引物,利用PCR等基因工程方法获得包括牛c-Myc、TAT和9R的重组原核表达载体(pTAT-HA-bcMyc-9R);酶切鉴定和DNA测序结果表明,试验成功获得bc-Myc-9R重组序列,成功构建重组质粒pTAT-bc-Myc-9R;不同IPTG浓度和诱导时间条件对该重组载体的诱导表达和SDSPAGE分析表明,TAT-bc-Myc-9R在0.6mmol/L IPTG和37℃诱导6h条件下表达约57KDa的目的蛋白。这些结果为PTD介导的转录因子蛋白直接重编程牛体细胞以获得iPS研究积累了科学资料。

摘要：根据已发表的猪瘟病毒(classicalswinefevervirus,CSFV)Shimen株的全基因组序列,设计2对引物P1/P2和B1/B2,在B1和B2的5′端分别加上EcoR和BamH位点,以CSFV-Shimen株脾毒为材料,一步法提取总RNA,并以此为模板采用反转录PCR(RT-PCR)和套式PCR(nPCR),成功地扩增出约1.2kb的E2基因。将PCR产物回收后与pMD18-T载体连接并转化,经PCR和酶切鉴定获得重组质粒E2-T。将E2-T经EcoR和BamH酶切消化、回收目的基因后,与经BamH/EcoR酶切的逆转录病毒载体pBABE-puro连接并转化,经酶切鉴定获得重组质粒pBABE-puro-E2。序列测定表明,目的基因的插入位置、方向和读码框完全正确。

摘要：试验采用单因子随机区组设计,选用31周龄尼克红商品代产蛋高峰鸡480只,随机分为5个处理,分别饲喂基础日粮及基础日粮中分别添加0.1%、0.5%、1.0%、2.0%虫源性壳聚糖的试验日粮,研究日粮添加壳聚糖对蛋鸡生产性能及蛋品质的影响。结果显示:饲料中添加1.0%的虫源性壳聚糖时,产蛋率比对照组提高了4.36%,蛋黄胆固醇含量比对照组降低了15.86%(P<0.05)。

摘要：为探讨根际促生菌在种子引发中的作用,以吲哚乙酸（IAA）、赤霉素（GA3）和1-氨基环丙烷-1-羧酸脱氨酶（ACCD）为筛选指标,从扁穗雀麦（Bromus cartharticus,Vahl）幼苗根系中分离出可修复种子老化的植物根际促生菌BCR5,同时采用四因素四水平正交试验设计,分析了人工老化时间（A,24 h、48 h、72 h、96 h）、菌浓度（B,1×10^6cfu/mL、1×10^7cfu/mL、1×10^8cfu/mL、1×10^9cfu/mL）、种子引发方法（C,H2O引发、MgSO_4引发、H2O2引发、不引发）和引发时间（D,6 h、12 h、18 h、24 h）对扁穗雀麦老化种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明：BCR5结合其他种子引发方法混合处理可降低丙二醛（MDA）含量,一定程度上恢复种子活力,提高老化种子的发芽率,并促进胚根和胚芽的伸长;菌浓度（B）是影响老化种子萌发和胚根伸长的主要因素,引发时间（D）主要影响胚芽生长;用菌株BCR5处理扁穗雀麦老化种子的最优方法为人工老化时间72 h、菌浓度1×107cfu/mL,结合H_2O_2引发处理18 h。此外,试验结果还表明适宜的人工老化处理可打破扁穗雀麦种子休眠。

摘要：本研究试图探明狗牙根草茎在不同播种深度和施肥方法下对高尔夫草坪备草区建植生长的影响。采用二因素随机区组设计,在高尔夫草坪备草区大田中对不同播种深度(1,2和3cm)和施肥措施(底肥和追肥)进行比较分析。结果表明,生长成坪期间草坪草的盖度、种群密度和株高随着播种深度的增加而增加,但是在成坪后期播深2和3cm对草坪质量的影响差异不显著;追肥比底肥效果好。在狗牙根草茎高尔夫草坪备草区建植生长中,播种深度是首要因素,其次是施肥方法;两因素交互作用显著。结合建植成本和工期,在生产实践中推荐采用播种深度应为2cm,播后1周内追肥,并建议施用速效肥。

摘要：目的克隆并在大肠杆菌中表达编码炭疽毒素受体(anthrax toxin receptor,简称ATR)的胞外区基因。方法收集CHO-K1细胞,提取其总RNA,经反转录成单链cDNA,以此为模板PCR扩增出编码ATR胞外区基因,将该基因克隆入载体pUC19中,测序正确后,亚克隆入表达载体pMal-c2x中进行表达。结果利用所设计的引物扩增出完整的编码ATR胞外区基因。以大肠杆菌为宿主在IPTG的诱导下获得表达,激光薄层扫描显示表达蛋白占总蛋白的39%。结论获得了编码ATR胞外区基因cDNA及其原核表达产物,为进一步研究炭疽毒素致病机理和炭疽病的防治奠定了基础。

摘要：本试验以研究伊犁马乳铁转运蛋白(lactotransferrin,LTF)基因多态性及其与泌乳性状的关系为目标,针对伊犁马LTF基因外显子和启动子设计了17对引物,以伊犁马DNA为模板,通过PCR扩增及PCR-RFLP法检测224匹伊犁马LTF基因多态性,并与其中73匹有产奶量记录的伊犁马进行关联分析,研究该基因多态性与泌乳性状之间的关系。结果显示,在伊犁马LTF基因中检测到1个SNP:c.173G>A,该SNP位点是发生在CDS区上的错义突变,致LTF编码蛋白第58位精氨酸突变为赖氨酸。与其120d日均产奶量进行关联分析,结果显示,虽然该位点不同基因型个体的日均产奶量差异并不显著(P>0.05),但可以发现各基因型的产奶量GG>GA>AA,由此可为中国乳用马的选育提供一定的参考。

摘要：马奶具有较高的营养价值,但目前关于马泌乳性能方面的研究很少。本实验对伊犁马生长激素受体(GHR)基因外显子和启动子设计13对引物,以DNA混合池为模板,采用PCR-RFLP法检测188匹伊犁马GHR基因多态基因型,并分析有产奶量记录的73匹伊犁马GHR基因多态性与泌乳性状之间的关系。结果表明:在伊犁马中检测到GHR基因启动子T-562C突变,CC、TC、TT 3种基因型,其基因型频率分别0.309、0.676、0.016;C为优势等位基因,频率为0.646,T基因频率为0.354;虽然各基因型间产奶量并没有显著差异(P>0.05),但各基因型的产奶量依次为TT>CC>TC,基因C突变为T可使产奶量有上升趋势,研究结果可为我国乳用马的选育提供一定的参考。

摘要：试验旨在克隆山羊碱性氨基酸转运载体基因SLC3A1cDNA序列,探究其表达的组织特异性及其在小肠中的表达发育模式。参考GenBank已发表的绵羊、牛SLC3A1基因mRNA序列设计引物,克隆山羊SLC3A1基因的cDNA序列,采用实时荧光定量PCR的方法分析其在1日龄山羊11种组织及其在1日龄、6月龄、8月龄、10月龄、12月龄山羊十二指肠、空肠、回肠中的mRNA表达情况。结果表明,成功克隆得到了山羊SLC3A1基因cDNA序列,其与绵羊、牛、野猪、人、小鼠、大鼠的同源性分别为99%、97%、88%、86%、80%和79%。SLC3A1基因转录表达有明显的组织特异性,其在1日龄山羊肾脏、回肠、空肠、结肠中表达量依次降低（P〈0.05）,其他组织中表达量很低。同一月龄山羊,SLC3A1基因在不同肠段的表达量数值上回肠〉空肠〉十二指肠。SLC3A1基因在不同月龄山羊十二指肠表达量以1日龄山羊为最高（P〈0.05）,6~12月龄山羊相同肠段之间表达量无显著差异（P〉0.05）;空肠表达量随山羊年龄的增加均呈现逐步降低的趋势;回肠表达量在各个月龄山羊之间差异不显著（P〉0.05）。结果说明,山羊碱性氨基酸转运载体基因SLC3A1的主要表达部位在肾脏和肠道,推测b0,＋碱性氨基酸转运系统转运氨基酸的主要部位为肾脏和肠道。SLC3A1基因在山羊小肠受肠段和发育阶段的影响,具有不同的表达发育模式。

摘要：【目的】建立牛奶中尿素氮的快速、无损检测方法,为牛奶中尿素氮的快速检测提供支持。【方法】对200个牛奶样品进行近红外扫描,并用多功能乳制品分析仪对牛奶样品中尿素氮的含量进行测定;剔除20个异常样品后,得到由180个牛奶样品组成的得分样品,将得分样品分为定标集(144个)和验证集(36个),将正交试验设计与主成分回归法(PCR)、偏最小二乘法(PLS)、改进偏最小二乘法(MPLS)3种定量校正方法和多种光谱预处理方法结合,建立牛奶中尿素氮的近红外检测模型,利用目标函数法对模型预测效果进行评定。【结果】建立了定量检测牛奶中尿素氮的最优模型,其定标相关系数(R2)和定标标准差(SEC)分别为0.986 4和0.238 4。用验证集对所建模型进行验证,其校正相关系数(RSQ)和预测标准差(SEP)分别为0.976 0和0.360 0。利用所有得分样品对预测结果进行监控,并绘制尿素氮测定值与模型预测值的线性相关曲线,相关系数r2为0.980 5。【结论】利用近红外光谱法建立的尿素氮定量检测最优模型具有很好的适用性和准确性,可用于牛奶尿素氮的快速定量检测。