摘要：试验采用三因素五水平二次回归通用旋转组合设计方法对黑曲霉β-葡萄糖苷酶水解大豆异黄酮的条件进行研究。建立了水解后游离型苷元含量与时间、温度、酶量之间的数学模型;并获得最佳水解条件:水解时间5.3 h,水解温度55.4℃,酶量68.7 U/g。

摘要：以关中奶山羊所产的鲜羊奶为原料,采用二次回归正交旋转组合设计,对影响羊奶干酪出品率的凝乳酶添加量、酸化条件和氯化钙添加量进行优化,建立了各因子与羊奶干酪出品率关系的数学回归模型,得出最佳的工艺条件为:凝乳酶添加量7259SU,原料乳酸化pH6.4,氯化钙添加量0.03%,羊奶干酪出品率可达10.47%。

摘要：为了探讨支链氨基酸(BCAAs)对奶牛胰腺消化酶分泌的影响及其交互作用,该研究利用体外组织块培养的方法设计2个试验:试验1采集5头荷斯坦奶牛胰腺组织,切成小块并置于分别含有不同浓度的亮氨酸(Leu)、异亮氨酸(Ile)或缬氨酸(Val)的Krebs Ringer bicarbonate buffer(KRB)溶液中,3种氨基酸的浓度梯度分别为0、2.62、5.24和10.48 mg/mL,每个处理5个重复,培养60 min后取胰腺组织和KRB培养液,测定消化酶浓度;试验2采用2×2×2试验设计,亮氨酸、异亮氨酸或缬氨酸浓度分别为0和5.24 mg/mL,共8个处理,每个处理5个重复,培养时间为60 min,培养后收集胰腺组织和KRB培养液。结果表明:(1)亮氨酸显著增加组织中胰蛋白酶和糜蛋白酶活性(P0.05),对脂肪酶活性存在极显著交互作用(P<0.01)。综合上述结果,亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸可影响奶牛离体胰腺组织分泌α-淀粉酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶的功能,3种BCAAs之间不存在广泛的交互作用。

摘要：为了比较亮氨酸对不同动物胰腺消化酶分泌的影响及其是否存在种间差异,试验利用体外组织培养的方法进行研究。试验一:选取5头西门塔尔育肥牛,屠宰后立即取出胰腺组织,切成小块置于含不同浓度亮氨酸的Krebs Ringer bicarbonate buffer(KRB)溶液中,亮氨酸梯度设置为0、2.62、5.24、10.48 mg/mL,每个处理5个重复,培养1 h后取胰腺组织和KRB培养液,测定消化酶活性;用相同方法处理羊、猪、鸡。试验二采用双因素交互试验设计,取牛、羊、猪、鸡胰腺组织,亮氨酸梯度设置为0、5.24 mg/mL,每个处理5个重复,培养1 h后收集胰腺组织和KRB培养液测定酶活性。结果表明:(1)亮氨酸可以线性提高牛胰腺组织释放的α-淀粉酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶活性(P0.05),动物种类与亮氨酸对胰腺组织消化酶分泌有交互影响(P<0.05)。综上所述,亮氨酸能够提升牛、羊、猪、鸡体外胰腺组织消化酶的分泌和释放,且亮氨酸对不同动物体外胰腺组织消化酶的分泌存在种间差异。

摘要：通过对Ⅰ群禽腺病毒(Fowl adenovirus,FAdV)血清4型毒株Penton基因的克隆及原核表达,获得可溶性表达的Penton蛋白。依据GenBank已公布的Ⅰ群禽腺病毒4型Penton全基因设计引物,对实验室保存有Ⅰ群禽腺病毒血清4型毒株进行PCR扩增及测序分析,并将Penton基因克隆至pCold-SUMO载体,然后进行诱导表达。测序结果及序列分析表明,Ⅰ群禽腺病毒血清4型毒株为近几年国内流行毒株的新型突变株,命名为SX17株(GenBank登录号为MF592716);SDS-PAGE电泳及Western blot结果表明,获得可溶性表达的Penton蛋白,且Penton蛋白表达、过柱的效果较好,分离后蛋白纯度可达到80%~90%。原核表达获得了可溶性表达的Penton蛋白,且纯化出的蛋白具有较高的纯度,为后续研究Ⅰ群禽腺病毒4型Penton蛋白的生物活性以及制备其蛋白抗体奠定了基础。

摘要：本研究旨在通过构建腺病毒介导的体外超表达载体,探究腺苷甲硫氨酸转移酶(MAT2B)对猪肌内脂肪细胞分化的影响。本研究以猪脂肪组织为试验材料,提取总RNA,并反转录得到cDNA,参考GenBank收录的猪MAT2B基因mRNA序列设计引物,PCR扩增并连接到腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV,进行测序鉴定。结果表明,构建的穿梭载体与骨架载体pAdEasy-1可以实现同源重组,即腺病毒重组载体pAd-MAT2B构建成功;用PacⅠ限制性内切酶酶切线性化pAd-MAT2B载体并回收质粒大片段转染293A细胞可以实现病毒的成功包装,病毒滴度测定可满足原代细胞侵染需要。转染猪原代肌内脂肪细胞后,MAT2B的mRNA和蛋白水平实现了显著的上调。油红O染色结果表明,过表达MAT2B促进了肌内脂肪细胞脂质积累;实时定量结果证明,MAT2B促进成脂标志基因PPARγ和aP2表达的显著上调。综上所述,腺病毒介导的体外表达载体可以成功的实现MAT2B基因超表达;MAT2B正向调控猪肌内脂肪细胞分化。

摘要："植物学实验"课程是高等农林院校重要的专业基础实验课,在提高学生的专业知识、动手能力、科研能力及创新精神等方面具有重要的作用。针对"植物学实验"课程教学中存在的实验内容陈旧、教学方式单一;实验课时少,无法开展综合性和研究性试验;分类部分实验受季节影响大,植物材料缺乏等问题,探索了将微课这一新的教学手段引入到"植物学实验"课程教学中的途径:首先要制定微课教学大纲;其次,微课设计和制作要符合实验课教学的要求;第三,微课要和课堂教学内容合理融合。"植物学实验"课程教学引入微课后,节约了课堂时间,丰富了课堂实验内容;同时,还调动了学生学习的积极性,学生的学习成绩明显提高。

摘要：为阐明浙江省温州地区奶牛隐孢子虫感染情况及其种类分布,对地处温州市的乐清市、瑞安市和平阳县的3个奶牛场85份新鲜荷斯坦奶牛粪便样品进行DNA提取,并基于隐孢子虫小亚基核糖体核苷酸(SSU rRNA)基因位点设计特异扩增引物,进行隐孢子虫PCR扩增、测序和序列分析。结果显示,3个奶牛场奶牛隐孢子虫的总感染率为34.1%(29/85),其中,平阳县感染率最高,达42.6%(20/47);在不同年龄段奶牛中,断奶前犊牛感染率最高,达64.3%(18/28)。共检出4种隐孢子虫,分别为牛隐孢子虫(Cryptosporidium bovis)、瑞氏隐孢子虫(***)、安氏隐孢子虫(***)和奇异隐孢子虫(***),且在29份阳性样品中,***的占比最高(34.5%,10/29),分布范围最广,成为该地区奶牛感染隐孢子虫的优势虫种。结果提示,温洲地区奶牛隐孢子虫感染较为普遍,且种类较多。研究结果可为该地区奶牛隐孢子虫病的防控提供基础数据。

摘要：[目的]本研究旨在对牛ANGPTL4基因进行SNPs检测,并研究其与天祝白牦牛部分经济性状的相关性。[方法]以36头天祝白牦牛为研究对象,采集其血样并提取基因组DNA,设计ANGPTL4基因的特异引物对P1和P2,对ANGPTL4基因的部分序列进行扩增,并利用PCR-SSCP结合测序的方法检测扩增产物序列的多态性。[结果]以自行设计的上述两对引物扩增分别获得长为260 bp（位于GenBank公布序列NC-007305.2的296~555 bp间）和170 bp（位于序列NC-007305.2的4 610~4 779 bp间）的天祝白牦牛ANGPTL4基因的两个片段。引物对P1的扩增产物经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,出现两种带型：AA和AB。AA和AB两种基因型频率分别为0.9444和0.0556。多态信息含量是0.1000,为低度多态。对具有不同带型的个体测序结果表明,引物对P1的扩增片段上有两处发生碱基突变,分别位于ANGPTL4基因的第466 bp处（T→C）和479 bp处（T→C）,导致相应的氨基酸改变Cys→Arg,Phe→Ser。在引物对P2的扩增片段上没有发现SNPs位点。[结论]引物对P1的扩增位点可以尝试作为天祝白牦牛品质改良的辅助选择标记。

摘要：　比较生长激素(GH)基因在不同物种间的相似性,设计引物,用PCR方法从波尔山羊基因组中扩增出一条长约2.0kb的DNA片段,然后用PMD-18T载体在感受态DH5α株大肠杆菌中获得GH基因克隆子。DNA测序结果表明,波尔山羊GH基因DNA序列全长1951bp(不含引物序列),含完整的5个外显子编码区。应用ClustalW软件进行同源性分析,结果表明,波尔山羊GH基因与Tokara山羊、澳洲美利奴羊和黄牛的GH基因的相似度分别为98.5%,97.0%和95.4%;内元比外元的变异程度高,在5个外元中,第一外元的保守性最高,其他区域的变异程度随物种亲缘关系的增大而升高,在分子水平上符合物种进化原理。