摘要：本研究旨在辅助羊场生产数据规范化管理及良种繁育智能科学化应用,采用MySQL数据库及Java、R编程语言,基于Spring Boot+Vue框架设计了一套羊场综合管理系统软件。该系统优化了羊只信息管理、羊场配种方案,实现生产数据可视化,设置预警功能帮助羊场及时掌握羊只产羔时间与生产性能情况;系统设计羊只基本信息管理、生产信息、疫病信息、繁殖信息、药品管理、饲料管理、统计报表与预警、科学育种八个模块。其中,在科学育种管理子模块中,根据羊场育种需求,构建了三种育种值计算模型(BLUP模型、GLMM模型、平均表现型模型),结合种公母羊实际表现,实现种公母羊的等级排序并自动生成近交系数,得到科学合理的配种方案。本系统在陕北某集约化肉羊场、横山区某绒山羊养殖联合育种户、富平县某奶山羊养殖场进行为期半年的实际生产应用,通过跟踪核心群体,完善与优化系统各项功能,为羊场智慧化、数字化育种管理提供了数据平台,同时也为实现智慧羊场的发展增添了新版本1.0。

摘要：为了构建绵羊PLC-γ1基因shRNA慢病毒干扰载体,并在人胚肾细胞(HEK-293T细胞)中筛选及鉴定载体干扰效果,试验采用Invitrogen BLOCK-iTTM RNAi Designer在线软件设计PLC-γ1基因的4条shRNA干扰序列(PLC-γ1-shRNA-1~4)和1条阴性对照序列(PLC-γ1-shRNA-NC),将其分别克隆至慢病毒干扰载体pLentiLox3.7(pLL3.7)中构建PLC-γ1-shRNA慢病毒干扰载体,用其转染HEK-293T细胞,48 h后通过倒置荧光显微镜观察荧光蛋白表达情况,并利用实时荧光定量PCR法和Western-blot检测HEK-293T细胞中PLC-γ1基因和蛋白质的表达情况,筛选出干扰效率最高的PLC-γ1-shRNA干扰序列并计算慢病毒含量。结果表明:试验成功设计出PLC-γ1-shRNA慢病毒干扰载体,大小为120 bp。PLC-γ1-shRNA慢病毒干扰载体均具有较高的干扰效率,在倒置荧光显微镜下均可观察到绿色荧光蛋白表达,其中PLC-γ1-shRNA-2序列的干扰效率最高,其PLC-γ1基因和蛋白质的相对表达量最低,极显著低于PLC-γ1-shRNA-NC的干扰(P<0.01),慢病毒含量为1.1×10^(7)IU/mL。说明针对PLC-γ1基因筛选出的PLC-γ1-shRNA慢病毒干扰载体从基因和蛋白质水平上均能有效地抑制PLC-γ1的表达。

摘要：随着动物功能基因组研究以及高通量组学技术的发展,畜禽育种已经从基于表型的选择方法过渡到以分子标记技术、基因编辑技术等分子生物学技术手段为主的现代育种新策略上。生物育种是现代生物技术育种的统称,是衡量农业科技竞争力的重要标志,包括标记辅助选择、全基因组选择育种、转基因和基因编辑育种、胚胎工程技术体系等育种手段。生物育种作为畜禽遗传改良的重要手段持续推动着我国的种质资源创新。本文详细介绍了生物育种的关键技术及其特点,包括不同育种方法在畜禽种质开发和遗传改良上的研究进展,探讨分析了当前畜禽育种的现状与问题,以期实现生物育种核心技术的突破与发展。

摘要：[目的]为探讨酿酒酵母培养物对泌乳牛血清指标、免疫因子及瘤胃微生物的影响;[方法]采用单因子配对试验设计方法。[结果]试验组血清白蛋白含量(40.68)显著高于对照组(40.07,P<0.05),添加酿酒酵母培养物(sc)血清白蛋白含量,谷丙转氨酶、总蛋白、β-羟基丁酸平均值(29.92、74.10、0.32)显著低于对照组(30.60、77.47、0.37,P<0.05),降低了奶中体细胞的数量,提高机体免疫力;试验组瘤胃液中的菌群多样性逐渐增加(P<0.05)奶牛瘤胃菌群的相对丰度发生了变化,降低了变形菌门和厚壁菌门的比例,增加了拟杆菌门的比例;[结论]日粮中添加SC增加了血清白蛋白含量,降低了谷丙转氨酶、总蛋白、β-羟基丁酸值,提高了机体免疫力、增强了肝细胞保护力,降低了奶中体细胞数量;降低了变形菌门和厚壁菌门的比例,增加了拟杆菌门的比例。

摘要：在CRISPR/Cas9系统介导的基因编辑中,借助于双链DNA(double-stranded DNA,dsDNA)供体模板的重组效应能够实现对目标基因组靶位点的精确编辑和基因敲入,然而高等真核生物细胞中同源重组的低效性限制了该基因编辑策略的发展和应用。为提高CRISPR/Cas9系统介导dsDNA供体模板的同源重组效率,本研究利用大肠杆菌(Escherichia coli)乳糖操纵子阻遏蛋白LacI与操纵序列LacO特异性结合的特点,通过重组DNA技术将密码子人源化优化的阻遏蛋白基因LacI分别与脓链球菌(Streptococcus pyogenes)源的SpCas9和路邓葡萄球菌(Staphylococcus lugdunensis)源的SlugCas9-HF融合表达,通过PCR将操纵序列LacO与dsDNA供体嵌合,构建了新型的CRISPR/Cas9-hLacI供体适配系统(donor adapting system,DAS)。首先在报告载体水平上对Cas9核酸酶活性、DAS介导的同源引导修复(homology-directed repair,HDR)效率进行了验证和优化,其次在基因组水平对其介导的基因精确编辑进行了检测,并最终利用CRISPR/SlugCas9-hLacIDAS在HEK293T细胞中实现了VEGFA位点的精确编辑,效率高达30.5%,显著高于野生型。综上所述,本研究开发了新型的CRISPR/Cas9-hLacI供体适配基因编辑系统,丰富了CRISPR/Cas9基因编辑技术种类,为以后的基因编辑及分子设计育种研究提供了新的工具。

摘要：TALE核酸酶(TALE nucleases,TALENs)是继锌指核酸酶(zinc-finger nucleases,ZFNs)技术以来的另一种能够对基因组进行高效定点修饰的新技术.TALENs技术是基于植物病原体黄单胞菌(Xanthomonas)分泌的一种转录激活子样效应因子(transcription activator–like effectors,TALEs)而设计和构建的.TALEs蛋白是由N端分泌信号、中央DNA结合域、1个核定位信号和C端激活域构成;TALE核酸酶是将TALE蛋白中的DNA结合域与FokI核酸内切酶的切割域融合,设计和构建的能在特定位点产生双链断裂的TALENs.研究结果显示,人工构建的TALENs能够对动植物细胞的基因组进行高度特异和高效的修饰.TALENs的活性在酵母、植物和哺乳动物包括人的细胞中已经相继得到验证.本文介绍了TALENs的结构特点、作用原理、构建方法和双链断裂的修复机制及其在动植物细胞基因组定点修饰中的应用,剖析了该技术可能存在的问题,展望了TALENs应用前景.

摘要：通过对科技期刊主编的人员管理和业务管理两方面能力的分析,论述了主编管理艺术对提高编辑部人员人文素养、编辑部总体业务能力和对科技期刊品质的影响。

摘要：为寻找新纤维素酶和纤维素酶基因资源,以羧甲基纤维素钠(CMC)改良的BHM培养基筛选菌株,经初筛和复筛筛选出目的菌株后,采用革兰氏染色法和16SrDNA基因片段比对法对筛选出的菌株进行鉴定;设计引物对P扩增其纤维素酶基因,连于pET-28a(+)载体构建原核表达载体并转入大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,表达结果采用SDS-PAGE和测定表达产物活性的方法来检验。结果显示,本研究成功筛选出一株新的具有较高纤维素酶活的短小芽孢杆菌BY-1,该菌所产纤维素酶具有较好的热稳定性和酸碱稳定性,最适宜温度和pH分别为55℃和7.45,在此条件下最高酶活性为0.921 6μmol/(***);此外,还成功克隆出1个1 851bp的纤维素酶新基因bglC-BY,具有GH9/CBM3纤维素酶结构,经IPTG诱导,SDS-PAGE图谱上于70ku有1个明显的蛋白条带,表达产物酶活性为0.541 3μmol/(***)。本研究筛选出的短小芽孢杆菌内切纤维素酶活较高,具有一定的应用前景。

摘要：基因组编辑技术能够实现基因组的精确修饰和改造,是后基因组时代研究基因功能和遗传信息的主要手段。传统的基因打靶技术通过低效率的细胞自发同源重组实现目的基因的定点修饰。真核细胞中DNA双链断裂介导的同源重组效率远高于自发同源重组,利用人工核酸内切酶特异性地在基因组靶序列处引入双链断裂,通过提供适当形式的、含有一定长度同源臂的供体DNA,能够实现相对高效的基因组靶向编辑。本文系统总结了环状质粒、线性化质粒、聚合酶链式反应产物及单链寡聚脱氧核苷酸4种类型的供体DNA在基因组精确编辑研究中的应用及候选原则,以期为以后相关研究中供体DNA的选择、设计提供参考和借鉴。

摘要：【目的】研究含不同水平硫酸钠日粮对陕北白绒山羊瘤胃纤维素降解率的影响,为选择适宜的硫添加水平提供理论依据。【方法】选择4只健康、体质量（28~32 kg）相近且安装永久性瘤胃瘘管的陕北白绒山羊为试验动物,采用4×4拉丁方单因素试验设计,试验分4个时期进行,每个时期14 d,分别饲喂硫酸钠添加水平为0（对照组）,2.0,4.8,6.4 g/kg的4种日粮,测定瘤胃内青贮饲料干物质（DM）、中性洗涤纤维（NDF）、酸性洗涤纤维（ADF）的动态降解率,计算青贮饲料瘤胃DM、NDF、ADF的有效降解率（PED）,并进行显著性检验。【结果】与对照组相比,日粮中添加硫酸钠对瘤胃食糜外流速率（Kp）无显著影响;提高了瘤胃内青贮饲料DM、NDF、ADF的PED值,而且当硫酸钠添加水平分别为4.8和6.4 g/kg时,PED值有显著或极显著提高。【结论】日粮中添加硫酸钠可以提高陕北白绒山羊非产绒期瘤胃内粗饲料纤维的PED值,且PED值随着硫酸钠添加水平的增加而增大,当硫酸钠水平为6.4 g/kg时,青贮玉米PED值最大,从而使青贮玉米得到了更好的利用。