摘要：建立了一种简单处理单个卵子和早期胚胎制备DNA模板的方法———KOH/DTT-Triton X裂解法,并与TE-蛋白酶K法比较了PCR扩增效率。结果表明:采用KOH/DTT-Triton X裂解法处理单个卵子或2-细胞胚、8-细胞胚、桑椹胚、囊胚后,作为DNA模板直接进行PCR扩增线粒体DNA片段,3对引物的PCR扩增总成功率为100%(70/70),而TE-蛋白酶K法处理的单个卵子的PCR扩增总成功率为92.9%(65/70),二者差异显著(P<0.05)。但两种方法所制备模板的PCR假阳性率均为0。实验设计的KOH/DTT-Triton X裂解法是一种有效的单个早期胚胎的DNA模板制备方法,经一次PCR扩增即能获得清晰的目的DNA条带,能够满足早期胚胎遗传物质检测的需要。

摘要：用改良的SDS-CTAB酶裂解法提取了根瘤菌基因组DNA的模板,从100个10bp的随机引物中筛选出了16条在20个菌株上均能扩增出清晰的片段。应用L16(45)正交表研究了DNA模板、Mg2+、Taq酶d、NTPs和引物浓度对扩增迁移率重现性的影响,用这种方法建立的根瘤菌RAPD-PCR优化反应体系为:20μl体系中含2.5mg/L的DNA模板、2.00mmol/L的Mg2+、1.00U的Taq酶、0.05mmol/L dNTPs、0.35μmol/L随机引物。

摘要：以UM和MS为基本培养基,通过调整激素种类与浓度等培养条件,按正交实验设计的原则,摸索出建立百脉根组织培养体系的最佳条件:愈伤诱导最佳培养基为UM+2,4-D 2 mg.L-1+KT3 mg.L-1;最佳分化培养基为MS+NAA0.1 mg.L-1+6-BA 1 mg.L-1;最佳生根培养基为MS+NAA0.05 mg.L-1。