摘要：单克隆抗体 (ｍＡｂ)Ｖ区ｃＤＮＡ序列的克隆是构建单链抗体 (ＳｃＦｖ)的关键一步[1 ] 。通常是在抗体Ｖ区序列两头 5′和 3′端设计带简并碱基的引物 ,用普通ＰＣＲ法进行扩增[2 ] 。该法虽看似简单 ,但局限性很大 ,若遇到同源性差且复杂的序列 ,则难以获得。同时 ,因带有简并碱基 ,可使ＰＣＲ产物不纯 ,而影响蛋白的表达及其功能。我们在构建抗人宫颈癌ＳｃＦｖ过程中 ,用常规ＰＣＲ法扩增出ＶＬｃＤＮＡ序列 ,经多种方法尝试 ,均未获得ＶＨ ｃＤＮＡ序列。随后 ,采用反向ＰＣＲ技术扩增并经测序证明 ,确为ＶＨ ｃＤＮＡ序列 ,为重组制备ＳｃＦｖ奠定了基础。1　材料和方法1.1　材料　抗

摘要：目的:克隆人HOGG1基因并构建其真核表达载体,进行序列测定.方法:提取人胎肝总RNA,设计HOGG1特异性引物,通过RT-PCR扩增,将HOGG1基因克隆到pCMV-Myc载体,菌落PCR鉴定阳性克隆并测序验证.结果:获得人HOGG1基因全长,并成功构建pCMV-Myc/HOGG1真核表达载体.结论:HOGG1真核表达载体的构建为HOGG1基因生物靶向治疗药物的开发提供一种新的手段.

摘要：目的 :探讨宫颈癌放疗患者的焦虑状况 ,并分析相关影响因素 .方法 :采用zung焦虑自评量表 (self ratinganxi etyscale ,SAS)及自行设计的多项目问卷调查 15 8例宫颈癌放疗患者 ,对资料完整的 12 5份进行统计分析 .结果 :宫颈癌患者放疗前期SAS≥ 5 0分者 5 9例 ,占 4 7.2 % ;放疗中期SAS≥ 5 0分者 2 5例 ,占 2 0 .0 % ;放疗后期SAS≥ 5 0分者 77例 ,占6 1.6 % .多重比较LSD法分析结果为放疗前与放疗中SAS评分具有显著性差异 (P <0 .0 5 ) .一元线性回归分析提示影响宫颈癌放疗患者焦虑症状的因素有无故害怕、发疯感、心悸、恶梦、癌症分期、文化程度、经济负担和疼痛 ;多元逐步回归分析结果表明发疯感、心跳加速是影响宫颈癌放疗患者焦虑症状的重要因素 .结论 :焦虑是宫颈癌放疗患者普遍存在的症状 ,并受多种因素影响 .因此 。

摘要：目的探讨针刺不同效应阶段是否会引发中枢神经信号不同的传导通路。材料与方法采用非重复事件相关的实验设计模式和多元格兰杰因果有效连接度分析方法。结果研究表明针刺即时效应仅引发大脑微弱、稀疏的因果有效连接,包括经丘脑的体感上行传导通路与由额叶皮层投射到疼痛反应区的自上而下的控制通路。持续性效应阶段,仅在针刺足三里穴后会引发广泛大脑区域的更为紧密的因果连接模式。结论针刺效应可能涉及大脑网络多水平层面信息流的整合与交互。