摘要：目的 :为解决中晚期肝癌临床切除率低、手术创伤大、转移率高等问题 ,设计了选择性胆管支、门静脉支联合结扎的方法 ,对大鼠移植性肝癌模型进行了治疗性研究 ,并观察了瘤周纤维增生特点。方法 :应用 R- 35大鼠肝癌瘤株制备 Wister大鼠移植性肝癌模型 ,分组实施含瘤肝叶的门静脉支胆管支联合结扎术及对照手术。对比观察大鼠病死率、转移率、治疗成功率 ;原位杂交检测α1( I)、α1( IV)型前胶原 m RNA表达及定位情况。结果 :手术组瘤周纤维包裹紧密与对照组相比病死率 31 .3%∶ 68.8%、腹腔转移率 31 .3%∶ 62 .5 %、肝内转移率 1 2 .5 %∶ 43.8%、腹腔转移合并肝内转移率 6.3%∶ 37.5 %、肺转移率 0∶ 1 8.8%、治疗成功率为 43.8% ;癌周纤维化早期 ,Ito细胞及 MF主要对α1( IV)前胶原 m RNA做出表达 ,中期α1( I)前胶原 m RNA杂交信号开始出现并增多 ,后期二者趋于稳定。结论 :联合结扎法可使肝癌团块周围发生广泛的肝纤维化 ,有效的包裹和限制了肝癌细胞团的膨胀性生长 ,显著地降低了肝癌病死率、腹腔和肝内转移率及肺转移率 ;Ito细胞是癌周纤维化过程中胶原生成的先驱细胞 ,激活后的 Ito细胞可进一步转变为 MF和 Fb,成为癌周纤维化过程中的主要胶原生成细胞 。

摘要：目的:构建5个拷贝的缺氧反应元件(5HRE)增强子和癌胚抗原启动子(PCEA)联合调控超抗原-中毒性休克综合症基因(TSST-1)与CD80分子跨膜序列(CD80TM)融合基因的逆转录病毒表达载体。方法:设计引物应用PCR法分别从人直肠癌基因组克隆PCEA,从野生株金黄色葡萄球菌基因组克隆TSST-1全长基因。利用重叠PCR法从pCMV-SPOR-T6-CD80载体克隆融合有中性linker的CD80TM基因片段。选择pLEGFP-N1为原始逆转录病毒表达载体,选取合适的酶切位点SphⅠ和BglⅡ,联合双酶切和PCR方法去除原始载体中巨细胞病毒即刻早期启动子(PCMVIE)。将上述基因片段与去除了PCMVIE的pLEGFP-N1重组,构建携带5HRE、PCEA、TSST-1、linker-CD80TM基因的逆转录病毒表达载体。结果:成功克隆PCEA和TSST-1基因。构建了融合中性linker的CD80TM,测序与预期相符。将上述片段重组到载体pLEGFP-N1上,酶切鉴定和DNA序列分析无误。结论:成功构建了逆转录病毒表达载体pLEFGP-N1-5HRE-PCEA-TSST-1-linker-CD80TM,为下一步的体外实验奠定了基础。

摘要：目的　检测人胰腺癌细胞株PC 2K ras基因点突变及其突变方式 ,明确基因治疗靶点的碱基序列。方法　针对K ras基因第 1 2位密码子点突变方式 (CGT、CAT、GTT)设计顺序特异性引物 (SSP) ,对人胰腺癌细胞株PC 2进行聚合酶链反应 (PCR) ,扩增产物借助聚丙烯酰胺凝胶电泳判定该细胞株有无K ras基因点突变及其突变方式。结果　人胰腺癌细胞株PC 2存在K ras基因点突变 ,突变方式为CGT。结论　PCR SSP法简便快速 ,特异性高 。

摘要：目的 分析2009至2013年我国西北五省（自治区）17家医院收治的胆囊癌患者临床特点.方法 采用统一设计的西北五省胆囊癌患者临床资料调查表,回顾性收集和分析西北五省17家三级医院2009年1月至2013年12月收治的2 379例胆囊癌患者的资料.采用Epi Data软件进行资料录入和核查.计数资料组间比较采用x2检验.结果 （1）17家医院近5年收治的胆囊癌患者占同期胆道疾病患者的1.6％ ～6.8％,平均2.7％;占普通外科疾病的0.4％～0.9％,平均0.7％.（2）胆囊癌好发于老年女性,男女比例为1.0∶2.1;发病平均年龄为（64±11）岁,农民较其他职业人群高发（x2=147.10,P＜0.01）.（3）57.2％的胆囊癌患者合并胆囊结石.（4）胆囊癌的病理类型以中低分化腺癌为主,恶性程度较高.就诊时TNMⅣ期病例占55.1％,晚期病例居多是导致预后较差的重要原因之一.（5）本组患者手术根治性切除率为30.4％.结论 胆囊癌病例中以老年女性和中晚期患者为主.对于高危人群,应采用超声等影像学手段进行普查及定期随访,以提高胆囊癌的早期诊断率,并采取手术治疗为主的综合治疗方法,改善患者的预后.

摘要：目的　为解决中晚期肝癌临床切除率低、手术创伤大、转移率高等问题 ,我们设计了含瘤肝叶胆管支、门静脉支联合结扎的方法 ,对大鼠移植性肝癌模型进行了治疗性研究。方法　应用R 35大鼠肝癌瘤株制备Wister大鼠移植性肝癌模型 ,分组实施含瘤肝叶的门静脉支胆管支联合结扎术及对照手术。对比观察大鼠死亡率、转移率、治疗成功率 ;原位末端检测观察癌细胞凋亡情况 ;免疫组化测定肝癌细胞MMP 9表达情况 ;免疫组化方法观察Ito细胞、Ⅰ、Ⅳ型胶原的增生情况 ;原位杂交检测α1Ⅰ、α1Ⅳ型前胶原mRNA表达及定位情况。结果　手术组与对照组相比死亡率 31 3%∶6 8 8%、腹腔转移率 31 3%∶6 2 5 %、肝内转移率 12 5 %∶4 3 8%、腹腔转移合并肝内转移率 6 3%∶37 5 %、治疗成功率为 4 3 8% ;对照组平均AI值 =4 32± 0 2 4 ,治疗组平均AI值 =12 80± 1 17;纤维包裹癌团MMP 9表达总阳性率为 2 4 2 4 %、强阳性率为 9 0 9% ,自由生长癌团MMP 9表达总阳性率为 87 88%、强阳性率为 4 2 4 2 % ;Ito细胞和Ⅳ型胶原完成早期瘤周纤维包裹 ,为I型胶原的沉积做出引导和铺垫 ;癌周纤维化早期 ,Ito细胞及MF主要对α1(Ⅳ )前胶原mRNA做出表达 ,中期α1(Ⅰ )前胶原mRNA杂交信号开始出现并增多 ,后期二者趋于稳定。结论　联?

摘要：目的:探索三维数字成像手术计划系统在肝切除术中的应用。方法:采用三维手术计划系统(Myrian)用于临床精准肝切除。2015年1月至2018年1月,95例肝癌患者,其中传统手术组67例采用传统肝切除,手术的设计、规划和实施都是基于传统的二维图像。3D组28例均采用三维数字成像手术计划系统指导下的精准肝切除。比较两组手术时间、出血量、住院时间和并发症。结果:(1)术前三维手术系统预估的病灶切除体积与术后肝脏实际切除体积差异无统计学意义(P>0.05);(2)3D组患者术后胸腔积液、胆漏、肺部感染、切口感染、肝衰竭的发生率以及1年生存率分别为5.26%、0、1.75%、2.6%、0、92.31%,传统手术组分别为8.9%、1.49%、4.47%、2.98%、1.49%、78.85%,两组差异无统计学意义(P>0.05)。3D组肿瘤复发率(7.69%)低于传统手术组(15.38%)(P<0.05);(3)传统手术组患者术中出血量、术后住院时间、手术时间、肝血管阻断时间、围手术期死亡病例数为(628.5±124.4)mL、(11.4±4.3)d、(117.1±32.4)min、(38.4±10.2)min、1例,3D组分别为(416.7±83.8)mL、(7.6±2.4)d、(178.5±40.9)min、(48.3±12.7)min、0例,两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论:三维重建技术对肝癌患者术前评估有利于术者优化、选择精准肝切除手术方案。

摘要：目的 分析2009-2013年陕西省胆囊癌的临床流行病学特点.方法 采用统一设计的“陕西省胆囊癌临床流行病学调查表”,回顾性收集分析陕西省10地市12家三级医院2009年1月至2013年12月收治的1 627例胆囊癌患者资料.采用Epidata软件进行资料录入和核查,采用SPSS13.0软件进行数据分析.结果 （1）陕西省12家三级医院2009-2013年胆囊癌占同期胆道疾病的2.54％,占同期普通外科疾病的0.87％,胆囊癌绝对发病例数呈逐年增加趋势.（2）胆囊癌发病平均年龄为（64.3±11.1）岁,男女比例为1.0：2.3;关中平原地区发病高于陕南和陕北地区;农民较其他职业人群高发;59.3％的胆囊癌患者合并胆囊结石.（3）胆囊癌的病理类型以中低分化腺癌为主,恶性程度较高;就诊时TNMⅣ期病例占58.3％,晚期病例居多是导致预后较差的重要原因之一.（4）手术切除率为42.6％.结论 陕西省胆囊癌仍处于高发水平.对于高危人群,应采用B超等影像学手段进行普查及定期随访,以提高胆囊癌的早期诊断率,并采取手术治疗为主的综合治疗,改善患者的预后.

摘要：目的 探讨利用靶向Notch1基因的高效siRNA真核表达载体抑制结肠癌细胞中Notch1表达的可行性.方法 根据Notch1 cDNA编码序列,设计并合成靶向Notch1基因的4对特异性RNA干扰片断,将其克隆入pSilencer4.1-CMV neo载体中.将重组载体及其阴性对照载体转染结肠癌细胞SW480,采用逆转录-多聚酶链反应（reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR）检测各组细胞中Notch1 mRNA表达水平,筛选获得能够高效抑制结肠癌细胞Notch1表达的siRNA真核表达载体.结果 成功构建了4个靶向Notch1基因的siRNA真核表达载体;转染结肠癌细胞SW480后,与对照组相比各干扰组细胞中Notch1 mRNA表达水平均明显下降,其中尤以psiNotch1-A组下降最为明显.结论 成功筛选出能够在结肠癌细胞中高效抑制Notch1基因表达的特异性siRNA真核表达载体,为进一步利用siRNA靶向Notch1治疗结肠癌奠定了基础.

摘要：背景:在细胞水平,胰岛素样生长因子结合蛋白3竞争性地与胰岛素样生长因子结合阻止了胰岛素样生长因子与其受体结合,从而抑制了胰岛素样生长因子的活性。目的:观察衰老细胞中调节性蛋白质胰岛素样生长因子结合蛋白3的生物学特征。设计、时间及地点:单一样本观察,于2006-09/2007-09在西安交通大学生物医学信息工程教育部重点实验室完成。材料:人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS)购于中国生物制品研究所。方法:用Northern的方法显示胰岛素样生长因子结合蛋白3基因的表达在年轻和衰老的2BS细胞中存在差异;聚合酶链反应扩增出人类胰岛素样生长因子结合蛋白3上游包括5'-UTR区的2kb的序列,并用酶切得到4组不同长短的胰岛素样生长因子结合蛋白3启动子片段并确定可调控转录活性的区域;通过重叠寡核苷酸凝胶阻滞实验确定在该活性区域中的增强子元件-IEE(IGFBP-3enhancer element)及其与蛋白结合的碱基序列等;用DNase I Footprinting法确定了IEE中与蛋白结合的核心序列。主要观察指标:①胰岛素样生长因子结合蛋白3基因在年轻和衰老细胞中的表达差异。②通过重叠寡核苷酸确定增强子元件。③通过凝胶阻滞试验证实该复合物结合活性与衰老相关的。④通过凝胶阻滞试验确定IEE与蛋白结合的碱基序列。⑤用DNase I Footprinting法确定IEE中与蛋白结合的核心序列。⑥判断与IEE结合蛋白的相对分子质量。结果:与年轻的2BS细胞相比,衰老的2BS细胞中胰岛素样生长因子结合蛋白3基因的表达升高;5'-cca gcc tgc caa gca gcg tgc ccc ggt tgc-3'是胰岛素样生长因子结合蛋白3的增强子元件;该元件与蛋白结合的核心序列是CTG CCA和GCG TGC CCC G,而且这种结合是与衰老相关的;结合蛋白的相对分子质量大约在27000。结论:在2BS细胞中发现了一个新的转录增强子,它与蛋白结合的核心序列是CTG CCA和GCG TGC CCC G,可与一个大约27000的蛋白结合;在衰老细胞中可选择性地促进胰岛素样生长因子结合蛋白3的表达。

摘要：目的:分析肝移植围手术期死亡的原因并探讨防治方法。方法:回顾性分析26例肝移植围手术期死亡病例的临床资料,观察术前曾行相关治疗、术中出血量及输血量、术中及术后并发症、围手术期手术次数及死亡原因。结果:死亡患者术前肝、肾、凝血功能较差,术前多数曾行相应手术治疗,术中出血量及输血量较多,术后并发症发生率高,死亡原因主要为MODS、感染及出血。结论:肝移植围手术期间应严密关注影响患者预后的每一个危险环节,术前应精密设计,术中要精细操作,术后需精心管理,做到预防为主,积极个体化治疗,提高肝移植的成功率。