摘要：从猪下丘脑、胃等组织中提取总RNA,根据已发表的猪GhreklinmRNA序列设计合成引物,通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)进行cDNA扩增,获得了282bp的片段,克隆于pMD 18T载体后进行序列分析,确认PCR产物为GhrelincDNA。检测结果表明:初生仔猪的下丘脑和90d生长猪下丘脑、胃底部、十二指肠、空肠、回肠、胰腺、肝脏、肾脏、心脏等部位组织中均有GhrelinmRNA分布。

摘要：用异硫氰酸胍 -酚 -仿一步抽提法提取病料细胞总RNA并进行反转录 ,再以此产物为模板对CSFV可疑病料进行了PCR扩增。结果用CSFV特异性引物扩增能得到与设计片段大小相同的产物 (2 72bp) ,并且不扩增猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒的核酸 ;其敏感性要高于猪瘟荧光抗体染色法、猪瘟强弱毒酶标单克隆抗体染色法和电镜负染法 ,为临床上猪瘟的诊断提供了一个快速、有效的诊断方法。

摘要：根据 Gen Bank中致病性嗜水气单胞菌气溶素 (Aer)基因的序列设计引物 ,以国内嗜水气单胞菌分离株为模板 ,扩增出 Aer基因的全长序列。经 T载体克隆和序列测定 ,证实克隆了国内分离株的不含信号肽的 Aer全长基因。将该基因以正确的读码框架与表达载体 p ET2 8b连接 ,经 IPTG诱导、SDS- PAGE检测 ,外源基因获得高效表达。诱导 4 h的培养物中 ,融合蛋白的表达占菌体总蛋白含量的 4 8.5 7%。 Western-印迹结果显示 ,利用纯化包涵体制备的兔抗血清可以很好地识别嗜水气单胞菌产生的天然毒素 。

摘要：为了寻求防治动物过敏性疾病的中药方剂 ,根据中兽医病因病理学理论 ,制定了养血润肺、疏风解表和散寒防湿的防治法则 ,借鉴传统中药方剂学理论与现代研究成果 ,设计了 3组抗动物过敏性疾病的中药配方 ,并进行了药效学比较观察。结果表明 ,所选中药配方提取液均可显著抑制多种变应原所致的炎性反应 ,其中方 1的效果最好 ,对大鼠 RPA足肿胀抑制率为 6 5 .0 2 %～ 72 .5 0 %;对大鼠角叉菜胶性足肿胀抑制率为4 3.6 4 %～ 5 7.2 9%;对豚鼠 RPA皮肤出血抑制率为 4 0 .1 6 %;对大鼠棉球植入所致的炎性肉芽肿形成抑制率为 4 2 .6 2 %;对小鼠二甲苯性耳肿胀抑制率为 5 3.82 %;对小鼠醋酸性腹腔毛细血管通透性增加的抑制率为 6 6 .6 7%。该方经进一步临床试验 。

摘要：以MDBK细胞培养致细胞病变型牛病毒性腹泻病毒 (BVDV)NCD毒株 ,采用异硫氰酸胍一步法提取总RNA ,并根据BVDVNADL参考株序列设计合成的 1对引物 (W 1与W 2 ) ,进行反转录PCR (RT PCR) ,扩增出P12 5基因区约40 0bp的片段。经 pGEM T载体连接后克隆、测序 ,并与已发表的NADL、Osloss、SD 1、184、D、H、Yak等BVDV毒株序列进行比较。结果表明 :NCD株P12 5基因区无插入或缺失变异 ,但存在着核苷酸的替换 ;经聚类分析初步认为NCD株属于Ⅰa型。NCD株与长春 184、H株核苷酸序列差异较大 ,而亲缘关系较近 。

摘要：首次对犬冠状病毒(CCV)V1株纤突蛋白(S)基因进行了克隆和测序。根据GenBank中报道的CCVV54株S基因序列,设计了一对特异性引物,对CCVV1野毒株S基因进行了RT-PCR扩增。将扩增得到的PCR产物纯化后克隆到pGEM-T中得到重组质粒pTS,用于序列测定。结果该基因全长4362bp,编码1453个氨基酸,N端前18个氨基酸为推测的信号肽序列,后1435个氨基酸构成成熟蛋白。将V1株S全基因与GenBank中已发表的6个CCV毒株S基因进行了比较,结果核苷酸序列同源性在91.0%～99.0%之间;推导的氨基酸序列同源性在93.0%～99.0%之间;同时发现CCV变异区主要集中在S基因前1/2处,其中350-370、439-478、1718-1818三个区域碱基变异较大,而1060-1700区碱基却十分保守。基于S全基因聚类分析结果表明,S基因分型结果与CCV毒力强弱并不一致;V1野毒株推导的S蛋白潜在的N-联糖基化位点与CCVV54强毒相同,均为34个,比Insavc-1弱毒多一个;其中第566-568位糖基化位点是多数强毒拥有而弱毒Insavc-1没有的。推导的V1株S蛋白疏水性及抗原表位与Insavc-1株有一定的差异,这些差别对病毒致病性和免疫原性等影响需进一步的研究。

摘要：根据巴氏杆菌基因序列设计合成一对引物,以临床分离的动物源性巴氏杆菌抗链霉素耐药菌株为模板,通过PCR技术,扩增出StrA基因350-1153bp序列.PCR产物及表达载体通过粘端连接,将长约804bp的StrA目的基因片段克隆到pGEM-T载体上,构建了克隆载体质粒***基因片段测序结果与文献报道的结果同源性为99.8%.只有一个碱基发生突变,但所编码的氨基酸没有改变.

摘要：用薄膜分散法制备利福平脂质体，在单因素考察的基础上进行正交试验设计，筛选出利福平脂质体的最佳制备工艺条件。结果表明，成膜后，在初次乳化温度为20℃，氯仿：PBS（v:v)为1：5，药脂比（g:g)为1：7，乳化速度为400r/min的条件下，先乳化30min，再将乳化温度升至30℃乳化30min，所制得的脂质体微球形态圆整，粒径在2.5-10μm范围内的占总数82.4%，其中5-10μm的占33.8%，包封率32.8%。

摘要：根据 Gen Bank中 Wesseling发表的犬冠状病毒 K378株纤突蛋白基因序列 ,设计合成了能扩增 372 bp基因片段的套式引物。用异硫氰酸胍—酚—仿一步抽取法提取细胞总 RNA进行反转录 ,再以此产物进行套式 PCR扩增 ,并筛选出最佳套式 PCR扩增条件。结果经套式 PCR扩增能得到与设计大小相同的产物 ,并且不扩增犬细小病毒、犬瘟热病毒、犬 型腺病毒、狂犬病病毒的核酸。敏感性试验表明 ,此法能扩增出犬冠状病毒强毒细胞培养物 (毒价为 1 0 -4.2 TCID5 0 / 0 .1 ml) 1 0 -6稀释的反转录产物 ,远高于常规 RT PCR。经初步应用表明 。