摘要：嵌合抗原受体T(chimeric antigen receptor T,CAR-T)细胞治疗近年来发展迅速,已在某些血液系统的恶性肿瘤治疗中取得了惊人的疗效,但在实体肿瘤的治疗中进展不大。目前在CAR-T细胞治疗中需要解决的问题主要有:(1)增强CAR-T细胞的杀伤活性;(2)解除肿瘤免疫抑制状态;(3)使CAR-T细胞进入实体瘤;(4)增强CAR-T细胞治疗的安全性。通过CAR结构的优化设计,可以克服CAR-T细胞治疗中的一系列缺陷,增强CAR-T细胞的疗效和减缓并发症的发生。本文对近年来在CAR结构设计上的一些优化改进措施及方法进行总结分析,探索提高CAR-T细胞治疗过程中有效性和安全性的策略和措施。

摘要：基因编辑技术是一种对生物体目标基因进行定点“编辑”的工程技术,近年来发展非常迅速,已冲击到生命科学的各个领域,是世界范围内竞争最为激烈的下一代核心颠覆性生物技术。基因编辑技术已应用于农作物改良、畜牧业育种、遗传与代谢性疾病的治疗、抗细菌和病毒感染、药物筛选、制备新型生物燃料等领域。其在军事医学领域也有重要用途:通过基因编辑技术,使病原体危害性增大、毒性增强;靶向病原体的保守序列设计药物、疫苗等,可以防御多个毒株和变异体的感染;靶向宿主,CRISPR/dCas9系统介导的表观遗传基因编辑,不改变DNA遗传性状,也能可逆性增强人体效能,抵抗生物、化学、放射损伤;靶向基因编辑器自身的核酸酶和引导RNA,能精准调控基因编辑技术,防御基因编辑技术谬用和新型基因类生物战剂造成的危害。基因编辑技术在传染病诊治领域也具有显著优势,能彻底治愈某些类型的传染病。

摘要：干细胞生物学在临床医学和生物学领域的应用与研究中都发挥着重要作用,多种人类重大疾病治疗的突破都有赖于干细胞生物学研究的快速发展。在医学院校针对研究生开设干细胞生物学课程具有重要意义。作者从课程的教材选取、课程大纲设计、授课内容、考核方法、教学反思等几个方面阐述了在医学院校研究生中开设干细胞生物学教学内容的设计和实施方法,为在医学院校研究生中讲授《干细胞生物学》课程提供参考和借鉴作用。

摘要：目的:利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建CDH1基因缺失的人乳腺癌MCF-7稳定细胞系。方法:根据CRISPR/Cas9靶点设计原则,设计能特异性针对CDH1基因的sgRNA,以lentiCRISPR v2质粒为骨架构建能表达此sgRNA和Cas9蛋白的重组质粒。测序鉴定后,将重组质粒与逆转录病毒包装质粒VSVG、PAX2在氯化钙介导下共同转入HEK293T细胞进行病毒包装,转染48 h后收集病毒上清,直接感染人乳腺癌MCF-7细胞。采用嘌呤霉素筛选CDH1缺失的乳腺癌MCF-7细胞,通过DNA测序、Western印迹及免疫荧光染色实验验证获得的MCF-7细胞。结果:构建了靶向CDH1的CRISPR/Cas9质粒;DNA测序和Western印迹实验结果表明获得了稳定敲除CDH1的人乳腺癌MCF-7细胞。免疫荧光染色结果显示,相比对照组,稳定敲除CDH1的MCF-7细胞中已无法明显观察到E-钙黏蛋白的表达分布。结论:通过CRISPR/Cas9基因编辑技术构建了CDH1基因缺失的MCF7细胞系,为进一步研究CDH1在肿瘤免疫治疗中的作用提供了基础。