摘要：背景:突触密度是脑组织结构和功能的重要指标,与认知功能密切相关。在人脑老化及阿尔茨海默病的发病过程中伴有突触脱失,可使突触密度发生变化。目的:观察正常人增龄过程中突触素表达的变化,以及脑老化中不同部位突触密度的改变,并与阿尔茨海默病患者比较。设计:抽样调查。单位:解放军总医院老年神经科。对象:选择1996-06/2002-12解放军总医院病理诊断无重要神经系统病史及神经病理改变的病理资料,共纳入28具尸体的脑组织(正常增龄组),其中男23例,女5例;年龄23～100(65±22.8)岁,按年龄分为3组,即成年组9例(23～55岁)、老年组7例(64～72岁)、>75岁组12例(76～100岁)。另选取经临床病理确诊为阿尔茨海默病的6具尸体脑海马标本(阿尔茨海默病组),男5例,女1例,年龄76～94(83±7.7)岁。方法:因突触素免疫化学反应强度在人体死亡后4～8h 之后保持相对稳定,故所有病例于死亡后8～72h 尸检常规取脑,而甲醛对突触素的影响也发生在75岁组与阿尔茨海默病组海马CA3区吸光度值的差异进行非参数检验。主要观察指标:①正常增龄组各部位突触素吸光度,并分析其与年龄之间的相关性。②比较正常>75岁病例与阿尔茨海默病患者脑海马CA3区突触素吸光度的差异。结果:纳入分析脑标本共34例,全部进入分析结果。①光镜下可见突触素免疫反应阳性物质呈大小不等的颗粒,弥散分布于脑皮质、壳核及海马灰质神经毡内,神经细胞、胶质细胞胞体内及血管穿行部位和白质无阳性表达。额叶皮质Ⅱ,Ⅲ层较其他各层密度高,枕叶皮质Ⅳ层密度较其他各层高。②正常老年脑额叶、枕叶、壳核及海马CA3区突触素吸光度与年龄呈负相关(r=-0.688,-0.592,-0.458,-0.619,P=0.000,0.001,0.014,0.000)。③阿尔茨海默病患者海马CA3区突触素吸光度低于正常>75岁病例(0.0313±0.0030,0.0407±0.0053,Z=-2.997,P=0.001)。结论:①脑老化过程中额叶、枕叶及脑海马CA3区与壳核突触密度随年龄增加而下降,尤其是脑额叶、枕叶及脑海马CA3区的这种变化与年龄的相关性更为显著。②阿尔茨海默病患者突触密度较正常增龄病例有所降低,其认知功能减退可能与突触脱失有关。③尸检取材操作均在死亡后8～72h 完成,甲醛固定时间均在6周以上,避免了对突触素稳定性数据的影响。

摘要：背景:自体干细胞移植治疗可以克服异体干细胞移植治疗的局限性,但目前对于进行性肌营养不良模型mdx鼠骨髓间充质干细胞生物学特性及肌分化潜能研究未见报道。目的:拟建立体外分离培养mdx鼠骨髓间充质干细胞的方法,并观察其成肌分化能力。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2006-01/07在中山大学附属第一医院神经病学实验室完成。材料:4～6周龄纯系雄性mdx鼠10只,购自美国Jackson实验室,饲养于中山大学北校区动物实验中心。碱性成纤维细胞生长因子和兔抗鼠MHC抗体为Chemicon公司产品。方法:全骨髓法体外分离mdx鼠骨髓间充质干细胞,差速贴壁法纯化扩增,胰酶+EDTA消化传代。取传至第3代的细胞,按1×104/孔接种于24孔板,置于含两性霉素B、碱性成纤维细胞生长因子、胎牛血清的DMEM培养基中向肌细胞方向诱导分化,2周后更换为不含两性霉素B、但添加马血清的DMEM培养基继续培养2周。主要观察指标:鼠骨髓间充质干细胞形态、表面标志、生长曲线及成肌诱导分化。结果:原代培养24h后,鼠骨髓间充质干细胞约80%贴壁生长,第3代细胞多呈梭形,形态比较均一。鼠骨髓间充质干细胞表达CD29和CD44等间质类细胞的表面分子,不表达CD11B和CD45等淋巴造血细胞的表面分子。接种后第一两天细胞处于潜伏期,第3天细胞增殖旺盛,进入对数生长期,至第4天细胞数增长一倍,第5天进入平台期。两性霉素B诱导后细胞有少量死亡,停用后更换马血清促进细胞成肌,7～10d可见有肌管样细胞形成,免疫荧光染色可见肌管样细胞呈MHC阳性,DAPI复染后可见肌细胞内有多个细胞核。结论:在两性霉素B与马血清依次诱导条件下,体外可成功分离培养基因缺陷mdx鼠骨髓间充质干细胞,并证明其具有成肌分化潜能。

摘要：目的　研究糖尿病患者脑卒中的危险因素 ,为糖尿病脑卒中的防治提供依据。方法　在对首都钢铁公司 2 9859名职工进行糖尿病患病率调查的基础上 ,采用 1∶1配对病例对照研究设计 ,对所检出的糖尿病 92 3例进行脑卒中危险因素调查。主要危险因素包括血压、血糖、胆固醇、甘油三酯、糖化血红蛋白及高密度脂蛋白等。结果　糖尿病组脑卒中 59例 (6 .39% ) ,对照组 1 7例 (1 .84% ) ,优势比值为 3 .6(95 %置信区间 :2 .1 1～ 6 .2 9,P <0 .0 1 )。其中糖尿病组脑梗死 51例 ,占 5 .53 % ,是对照组 (1 .1 9% )的 4 .6倍 ;糖尿病组脑出血 5例 ,占 0 .54 % ,与对照组 (0 .43 % )比较差异无显著性意义。糖尿病组高血压、冠心病的患病率及糖化血红蛋白、甘油三酯及血糖明显高于对照组 (P <0 .0 1 )。Logistic多元回归分析结果表明 ,糖尿病患者脑梗死的其他危险因素中 ,冠心病优势比值最高为 6 .1 2 ,其次为高肌酐血症、高糖化血红蛋白、高血压和高甘油三酯。结论　糖尿病是脑梗死的重要危险因素。冠心病、高肌酐血症、高糖化血红蛋白。