摘要：目的在定位于AUNX1基因座位内的非综合征型听神经病家系中进行GRIA3基因突变检测,分析基因与该家系表型的关系。方法AUNX1家系共有43人,其中听神经病患者7人,听力正常36人。GRIA3基因共有16个外显子,针对GRIA3基因的全部编码序列(第2～16外显子)设计15对引物,进行PCR扩增,对扩增产物进行2%的琼脂糖凝胶电泳,检测其纯度、浓度,应用PCR产物直接测序法进行基因突变检测;使用DNAStar软件进行测序序列的对比分析,检测基因突变。结果在GRIA3基因第9外显子上检测到一个同义突变1200T>C(N400N),家系43人中5人检测了此位点,其中1人(听力正常男性)出现了这种变化。在距离第6个外显子前的第16个核苷酸的内含子(DNA第210 646位)中检测到T>C纯合和T/C杂合两种改变,家系43人中14人(均为听力正常)发生T>C纯合突变,10人(均为听力正常)发生T/C杂合突变。结论在AUNX1家系成员中检测到两个位点的三种碱基改变(1200T>C,210646T>C纯合或210646T/C杂合),没有引起氨基酸的改变,考虑GRIA3基因可能不是AUNX1听神经病家系的致病基因,需进一步研究探索。

摘要：目的获得嘈杂语噪声背景下汉语短句识别率-信噪比(Performance-Intensity,P-I)函数的斜率和50%的得分所对应的信噪比(记为SNR50),并对所有短句的同质性进行评估和调整。方法采用16张(每张20句)新编嘈杂语噪声下汉语普通话短句识别表作为测试材料。选取年龄为21～25岁之间、听力/言语发育正常且日常以汉语普通话为交流方式的48名受试者按"随机区组设计"在-1、-4、-7、-10dB四种信噪比条件下进行言语识别率的心理声学测量。使用Statistica7.0软件进行P-I函数拟合和统计分析。结果320句语句在嘈杂语噪声下的言语识别P-I函数曲线的阈值呈正态分布,斜率呈不规则分布。剔除P-I函数强健性增长(斜率>55%/dB)的语句,并保留阈值变异度在±2!内的语句,精选出同质性良好的240句。结论逐个调整每句的SNR以实现同质性,可为编制"等言语识别阈级"的句表奠定扎实的心理声学基础。

摘要：目的对散发听神经病患者进行OTOF基因突变筛查,了解中国听神经病患者中是否存在该基因的热点突变位点。方法选取解放军总医院门诊2003～2005年确诊的散发听神经病患者76例,采集患者外周静脉血,提取基因组DNA;选取OTOF基因已经报道的存在突变或位于突变附近的9个外显子,应用Primer5软件设计9对引物,采取聚合酶链式反应(PCR)扩增,应用PCR产物直接测序法进行OTOF基因突变检测;使用DNAStar软件进行测序序列的对比分析。结果本研究共发现了OTOF基因的8种多态位点。1名温度敏感性听神经病患者检测到82769delAG缺失突变,位于OTOF基因第25外显子上的AG缺失突变导致氨基酸在993位发生改变,翻译截止于1000位氨基酸处,该患者并未检测到OTOF基因的其他突变。56842A/C、82885C/A、92905G/A为已知多态位位点,其中56842A/C和92905G/A多态在NCBI显示的不同人群的多态频率与本研究的多态频率无差异。2例患者发现76378C/T杂合突变(突变率2.63%)、3例患者发现82913G/A杂合突变(突变率3.95%),这两种突变分别位于第15内含子和第25内含子,考虑为本研究发现的新的单核苷酸多态。11例患者发现92995C/T杂合突变(突变率14.47%),5例患者发现96888C/T杂合突变(突变率6.58%),这两种突变分别位于第39外显子和第44外显子,但均没有引起氨基酸的改变。结论本研究在散发听神经病患者中发现了8种OTOF基因多态位点,并未发现国外报道的已知突变,这意味着中国听神经病患者可能存在OTOF基因新的突变,或者存在其它相关致病基因。

摘要：目的比较以整字和音位为单位计分进行单音节字识别测试的结果,探索更加合理的计分方式。方法将自行编制的每张词表包含25个单音节字的汉语单音节短词表共30张制作成测试CD。60名听力正常的受试者参加实验,男女各30名。测试采用拉丁方设计。每张词表在6个强度上进行测试。选择受试者听力较好耳进行测试。反应方式为受试者复述测试词。记录每个测试项的正确和错误模式。分别以整字和音位(声母、韵母、声调)为计分单位记录每张词表的测试项正确数目。使用Matlab对各张词表进行logistic曲线拟合,绘出每张词表在两种计分方式下的PI曲线,计算每张词表的识别阈值和PI曲线的斜率。使用SPSS11.5统计软件对数据进行统计学处理。首先使用配对t检验分别比较6个测试强度上两种计分方式得到的总测试项正确率;然后使用配对t检验比较两种计分方式所得的各词表PI曲线斜率和阈值。结果以音位为计分单位得到的50%识别阈明显低于以整字为单位(P<0.001),20%～80%斜率(P<0.001)和50%斜率(P<0.001)则明显小于以整字为单位得到的结果。按音位计分时在各个强度上的识别正确率均显著高于按整字计分(P<0.001),且得到的结果离散度较大。结论以音位为计分单位,测试信度有一定程度的增加,但同时测试项同质性变差,降低了测试的灵敏度。临床上使用短词表进行单音节识别测试时使用整字作为评分单位较为合理。

摘要：目的探讨突发性聋分型治疗的必要性。方法采用国际通用的标准化临床研究方法，统一设计、统一方案进行前瞻性临床多中心研究。收集年龄在18～65周岁之间，病程在2周以内，未经任何相关医疗处理的突发性聋患者，按照听力曲线分为低中频下降型，中高频下降型；平坦型和全聋型四种类型。每种类型有四种不同治疗方案，根据统一设计的随机表，随机选取其中一种方案进行治疗。其中低中频下降型为银杏叶提取物（金纳多）、泼尼松、巴曲酶（东菱迪芙）及其组合；中高频下降型为利多卡因、泼尼松、金纳多及其组合；平坦型或全聋型为东菱迪芙、金纳多、泼尼松及其组合。结果2007年8月至2011年10月全国33家医院共收集符合入组条件的单侧突发性聋患者1024例，其中男性492例（48．05％），女性532例（51．95％）。年龄为19—65岁，平均（41．2±12．8）岁。按照听力曲线分型，低中频下降型205例（20．02％），高频下降型141例（13．77％），平坦型402例（39．26％），全聋型276例（26．95％）。各种类型的总有效率：低中频下降型最高，为90．73％；平坦型次之，为82．59％；全聋型为70．29％；中高频下降型为65．96％；各型之间总有效率比较，差异具有统计学意义（X2=231．58，P=0．000）。1024病例中，痊愈378例（36．91％），显效229例（22．36％），有效198例（19．34％），无效219例（21．39％）；总有效率为78．61％。糖皮质激素对各型突聋均有效，联合用药优于单独用药。结论不同听力曲线类型的突发性聋患者预后差异很大，根据听力曲线进行分型选择不同的治疗方案具有重要意义。低中频下降型疗效最好，平坦型次之，中高频下降型和全聋型效果不佳。

摘要：目的：探讨GJB2全序列长链PCR方法和琼脂糖凝胶电泳方法，以及影响长链PCR和电泳结果的可能因素。方法应用Primer Premier 5.0软件和Oligo 6 Demo软件针对GJB2全序列设计引物，应用DNA聚合酶KOD FX Neo试剂盒进行两步法长链PCR扩增，调整加入DNA模板量、PCR延伸时间、循环次数等影响PCR产物量，通过0.8%琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物长度和量，调整加样槽的宽度、加样量、电泳电压、电流、电泳时间得到清晰条带，若PCR产物存在大片段碱基插入或缺失，用限制性内切酶BamHI进行内切酶反应，初步判断插入或缺失的大致位置。结果正向引物F：5’-AGATCGGGACCTCGAAGGGGACTTG-3’；反向引物R：5’-AGGTGGGCACGGGGTTAGGTAGAAA-3’，扩增片段长5887 bp。长链PCR条件为：50μl的反应体系中加入2μl（约40 ng）的基因组DNA，预变性94℃2分钟，变性98℃10秒，68℃延伸5分钟，共32个循环。电泳条件为：加样槽5 mm宽，每槽加样0.8μl PCR产物，电泳电压50 V，电流50 mA，电泳时间140分钟。结论应用DNA聚合酶KOD FX Neo试剂盒进行两步法长链PCR，可进行GJB2全序列扩增，影响PCR的可能因素为引物、DNA模板的质和量、延伸时间、循环次数等。0.8%琼脂糖凝胶电泳可获得较好的分离效果，影响电泳可能的因素为加样槽宽度、加样量、电泳电压、电流、电泳时间等。

摘要：目的对一个新定位的非综合征型低频感音神经性听力下降家系位点区域内的WHRN基因进行突变检测,分析WHRN基因突变与该家系表型的关系。方法针对WHRN基因的全部编码序列设计11对引物,进行WHRN基因的PCR扩增,对PCR产物进行双向直接测序,检测WHRN基因突变。结果在WHRN基因的12个外显子中,检测到位于第6和第10个外显子上的3种序列改变方式,均为杂合性突变,这3种突变未与耳聋表型相分离。结论这个新定位的非综合征型低频感音神经性听力下降家系耳聋表型不是由WHRN基因编码区的突变所致。

摘要：目的探讨微管亲和力调节激酶基因MARK4基因在小鼠不同组织(尤其耳蜗)中的表达情况,以及在不同发育期耳蜗中的表达变化,研究该基因与听觉系统功能的关系,为DFNA4型耳聋基因的定位克隆提供有意义的线索。方法分别取成年(30天)健康NIH小鼠的五种组织(心、肝、肾、脑、耳蜗)以及不同发育期(出生后6、11、15、30天)健康NIH小鼠的耳蜗组织,提取各组织的总RNA,针对小鼠MARK4基因的mRNA序列(NM_172279),设计引物进行逆转录多聚酶链反应(RT-PCR);同时,利用生物信息学方法了解MARK4基因与DF-NA4型耳聋基因座的定位关系。结果①成年小鼠(30天)五种组织中,除心脏组织外其余四种组织均有MARK4基因的表达,以肝、肾中表达量较高,而耳蜗和脑组织中表达稍弱,表现出一定的组织特异性;②处于新生期(6天)、幼年期(11、15天)、成年期(30天)的小鼠,其耳蜗组织中均有MARK4基因的表达,以新生期表达量最高,生长至成年期时较前稍有降低,但无统计学差异;③MARK4基因位于人类19号染色体的长臂上,恰位于中国DFNA4型耳聋家系的定位区域。结论MARK4基因在成年小鼠的表达具有一定的组织特异性,其在耳蜗组织的表达情况提示该基因与听觉功能相关,可能在小鼠听觉系统的发育过程中产生作用。MARK4基因无论从位置上还是功能上考虑,均是中国DFNA4型耳聋家系极好的候选基因。

摘要：目的观察钙通道阻滞药尼福地平和噪声暴露对耳蜗听神经复合动作电位(compounda ction poten-tial,CAP)阈值的影响,分析两种实验因素对耳蜗功能的交互作用。方法采用析因设计,根据耳蜗灌流尼福地平的浓度和是否暴露噪声,将80只豚鼠随机分为八组,每组10只:①人工外淋巴液组;②人工外淋巴液+0.15μmol/L尼福地平组;③人工外淋巴液+0.5μmol/L尼福地平组;④人工外淋巴液+3μmol/L尼福地平组;⑤人工外淋巴液+噪声暴露组;⑥人工外淋巴液+0.15μmol/L尼福地平+噪声暴露组;⑦人工外淋巴液+0.5μmol/L尼福地平+噪声暴露组;⑧人工外淋巴液+3μmol/L尼福地平+噪声暴露组。各组在灌流前和灌流120分钟后在圆窗记录CAP阈值。分析各组CAP阈值的变化及两种实验因素对耳蜗功能CAP阈值的交互作用。结果第1～4组灌流不同浓度尼福地平后CAP阈值升高,CAP阈移分别是2.5、5.5、28和21.5dB;第5～8组灌流不同浓度尼福地平并暴露噪声后CAP阈移分别是43.5、46.5、20和21.5dB。统计学分析发现两种实验因素对耳蜗功能有抑制作用,并存在交互作用。结论在本实验条件下钙通道阻滞药和噪声对耳蜗功能均有抑制作用,且两者的抑制作用不是相互叠加而是交互作用,其交互作用与钙通道阻滞药的浓度有关。