摘要：目的 依据失血性休克发生的理论基础和长期的临床实践经验,配制一种新的＂复合型战地抗休克液＂,并利用大鼠失血性休克模型进行评价.方法 建立大鼠失血性休克模型.以乳酸林格液和羟乙基淀粉的2∶1混合液（LH）作为对照组休克复苏液;以添加地塞米松和呋塞米的LH作为加药组休克复苏液;复苏4 h后取血和器官标本检测生化、肝功能指标和肺组织含水量,并观察组织病理学变化.结果 两组液体均可使失血性休克大鼠平均动脉压恢复到基础值.与对照组比较,加药组血生化指标均无明显差异,但大鼠复苏后肺组织湿/干重比值明显降低（4.56±0.14比4.88±0.29,P＜0.05）,丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）水平显著下降[ALT：（73.02±41. 89）U/L比（193.85±104.49）U/L;AST：（199.06±108.70）U/L比（395.25±137.08）U/L,均P＜0.05],利尿作用明显[开始排尿时间：（76±20）min比（153±14）min;尿量：（9.6±5.2）ml比（1.5±2.2）ml,P＜0.01和P＜0.05],腹水量减少[（1.3±0.6）ml比（5.0±3.0）ml,P＜0.05].肝、肺和小肠组织病理学观察也显示加药组损伤轻于对照组.结论 本研究中设计的＂复合型战地抗休克液＂配方简单,用于大鼠失血性休克复苏可快速恢复并稳定血流动力学,同时可起到减轻组织水肿及肝、肺、小肠损伤的作用.

摘要：目的设计并构建适合国内肝移植实际情况的数据库系统,探讨利用数据库技术进行肝移植数据管理、临床研究应用、多中心应用的可行性及前景.方法进行肝移植数据库系统的可行性及临床需求分析,采用MicrosoftSQLServer作为后台数据库,利用Dephi进行编程设计应用程序,应用于临床,测试系统性能.结果完成了数据库、服务器端与客户端应用程序及相应的数据转换、自定义查询工具的构建,已投入临床使用.结合互联网可实现多中心联合应用.结论肝脏移植数据库管理系统能够显著提高肝移植数据的管理和分析效率,同时提供临床决策支持,结合多中心可实现国内肝移植的登记与数据分析、整理,具有良好的实用价值和应用前景.

摘要：胆肠吻合术是许多消化外科疾病手术治疗的基本术式之一,也是消化外科医师必须掌握的基本手术技能。正确选择胆肠吻合术的适应证和术式常是决定整个消化外科手术成功的关键因素。手术适应证的选择须综合考虑胆道生理性重建的可行性、Oddi括约肌的功能状态以及近侧胆管病灶能否去除等因素。虽然胆肠吻合术的手术方式经历过纷繁复杂的演变和改良,但胆管空肠Roux-en-Y吻合仍是适用范围最为广泛、疗效最为确切的术式,应作为胆肠吻合术的标准术式。预防胆管空肠吻合术后反流性胆管炎的关键仍在于通过良好的手术设计和精准的手术操作保证吻合口及近侧胆管的畅通。

摘要：自从首例在腹腔镜下施行胆囊切除术之后,胆道外科技术经历了革命性的改变。当前,已经有越来越多的传统外科手术方法被腹腔镜外科所取代。然而,腹腔镜胆囊切除术并非平安无事。当前,由于影像学技术的发展,例如对肝内、外胆道的虚拟现实、三维重建等,可以有助于对复杂胆道外科问题如肝内胆管结石和其他肝内病变的手术前评估和手术设计。约占原发性肝癌5%～10%的肝内胆管癌由于其与肝细胞癌有不同的病理-生物学特点,故在治疗措施选择上应得到特殊的关注,一般应该施行广泛的肝切除手术而不是局部切除或消融。关于肝门部胆管癌的治疗,扩大的肝切除术可以改进早期的、无淋巴结转移病变治疗结果。当前,在微创外科时代,许多传统的外科手术将在微创外科理念下重新受到检验。

摘要：目的应用噬菌体随机肽库展示技术筛选能与整合素αvβ3分子具特异性结合功能的小肽分子,并对其功能进行初步鉴定。方法根据整合素αvβ3分子细胞外配体结合区域的晶体结构及蛋白质序列设计①～⑤号5条短肽,并作为筛选配基,分别经过3轮"吸附-洗脱-扩增"后,ELISA鉴定阳性克隆,DNA测序和分析,粘附试验进一步分析化学合成多肽的功能。结果经3轮亲和筛选后,噬菌体克隆得到有效富集,以⑤号肽为代表,ELISA鉴定显示7个阳性克隆能与⑤号合成短肽有较强结合活性。进行DNA测序,多重序列分析获得2个多肽基序:****HRH,HWR****。粘附试验表明化学合成多肽FITC-HLPWHRH,FITC-HWRLHPH与表达整合素αvβ3的细胞株具有一定的亲和性,且结合能被αvβ3分子配体纤维连接蛋白所抑制。结论通过噬菌体随机展示肽库技术在体外对合成的短肽进行筛选,可以获得与整合素αvβ3分子具特异性结合能力的小肽分子。

摘要：目的探讨腹腔镜胆肠内引流术的设计及手术疗效。方法对8例胆管结石患者使用Endo-GIA实施腹腔镜胆总管-空肠Roux-en-Y吻合术,其中2例使用Hand-PortSystem辅助。结果8例患者均痊愈出院,无并发症出现,术后造影显示吻合口通畅,术后生活质量良好。结论腹腔镜胆肠内引流术在理论与技术上均是可行的,但手术难度较大,对术者要求较高,同时手术费用明显增高,故需严格掌握手术适应证、禁忌证,并探索出适合国情的腹腔镜胆肠内引流术手术方式。

摘要：背景:有研究显示,凋亡相关蛋白酶—胱天蛋白酶3被认为是动物和人脑中细胞凋亡过程中的关键酶,正常人或阿尔茨海默病患者的脑中有该酶的表达,这与对成年啮齿动物脑研究的结果之间存在着矛盾。目的:揭示胱天蛋白酶3在啮齿类动物和猕猴脑中的表达有无差异,分析该酶在猕猴脑中的表达水平有无年龄差异,以及不同猕猴脑区间有无差别。设计:单变量均数的平行比较。单位:解放军总医院肝胆外科研究所,香港中文大学解剖学系。材料:实验于2003-08/2005-02在解放军总医院肝胆外科研究所及香港中文大学解剖学系进行的,所用的2,12,24和48周龄(每周龄组n=5)SD大鼠、ICR小鼠和快速衰老小鼠(senescence-acceleratedmice,SAM),雌雄不限,由香港中文大学实验动物服务中心提供;健康雌性4岁和20岁猕猴各4只,均购自解放军总医院医学实验动物中心(SCXK-(京)2003-002)。以上动物均在无任何实验干预的标准条件下养殖。方法:①所有脑组织标本均从猕猴和啮齿动物中新鲜切取,制成匀浆后通过免疫印迹法检测啮齿类动物和猕猴脑组织中胱天蛋白酶3蛋白的表达;②用同样的方法比较两个年龄组猕猴的大脑皮质、海马和小脑中该蛋白的表达量,并通过免疫组织化学法显示胱天蛋白酶3在猕猴3个脑区中的细胞分布状态。主要观察指标:①胱天蛋白酶3在啮齿类动物和猕猴脑中的免疫印迹检测;②胱天蛋白酶3在猕猴3个脑区中的细胞分布状态。结果:①免疫印迹检测结果:胱天蛋白酶3在3种2周龄的鼠脑中表达模式相同,在其它年长鼠脑中未检测到该酶;胱天蛋白酶3在成年和老年猕猴脑中均有持续表达,表达量低于2周龄鼠。胱天蛋白酶3在猴脑中以酶原(Mr32000)的形式存在,未发现该酶在猕猴脑中的表达量有年龄和脑区差异。②免疫组织化学法显示结果:猕猴大脑皮质胱天蛋白酶3的免疫反应性很低,海马的CA1、CA3和CA4区可见低至中度阳性染色的锥体细胞,小脑皮质的少数浦肯野氏细胞呈强阳性染色。老年猕猴除运动皮质第V层偶见呈强阳性染色的大锥体细胞外,其余与成年猴无明显差别。结论:啮齿类动物成年后,脑中胱天蛋白酶3的表达迅速下降至测不出,而该酶在成年及老年猕猴脑中仍维持在一定水平,其表达量和阳性细胞的分布状态无明显的年龄差异。

摘要：目的:应用新的噬菌体删减筛选技术筛选能与整合素αvβ_3具特异性结合功能的小肽分子,并简单分析其生物学功能。方法:以高表达整合素αvβ_3分子的M2黑色素瘤细胞株为靶细胞,以低/不表达整合素αvβ_3分子的C23黑色素瘤细胞株为吸附细胞,对噬菌体随机七肽库进行消减筛选,ELISA鉴定阳性克隆,DNA测序和分析。结果:经过4轮亲和筛选,3轮删减筛选,经固定ELISA鉴定,随机选取50个克隆得到2个能特异性与M2细胞结合而不与C23细胞结合的阳性克隆,进行DNA测序后,其多肽序列如下:HTPPYIL;MNFNAML。结论:通过噬菌体噬菌体删减筛选技术获得与整合素alpha v beta 3具特异性结合能力的小肽分子,为基于整合素alpha v beta 3的肿瘤血管生成的早期诊断及治疗的多肽药物前体设计提供实验依据。

摘要：目的采用计算机3D重建模型,研究肝动脉的解剖和肝脏第4段动脉的解剖,并讨论其在活体肝移植中的意义。方法采用该中心99例低位梗阻性黄疸病例的DICOM格式的薄层增强CT影像,以Intrasense Myrian®工作站进行肝脏、肝动脉、门静脉、胆管的3D模型重建,并对肝动脉和A4进行描述性解剖学研究。结果99例均成功完成肝脏、肝动脉、门静脉和胆管的3D重建。按照改良的Hiatt分型,肝动脉的解剖类型1型79例(79.8%),2型14例(14.1%),3型3例(3.0%),4型2例(2.0%),5型1例(1.0%)。Couinaud分段第4段动脉参考Jin等的分型分为3型,1型38例(38.4%),2型52例(52.5%),3型9例(9.1%)。结论肝动脉及A4均存在各种变异形式,对活体肝移植具有重要影响。计算机3D重建是评估肝脏脉管解剖的良好工具。术前利用计算机3D重建进行个体化解剖学评估有利于手术设计和手术安全。

摘要：目的对胆管癌相关基因FXYD6基因的功能区进行克隆和表达,以便进一步展开该基因功能研究。方法借助生物信息学方法分析FXYD6基因,设计FXYD6基因信号肽剪切后功能区蛋白体外表达序列,并将其克隆到pBV220表达载体上,继而以大肠埃希菌为表达系统,使功能区蛋白(不含信号肽)获得体外表达。结果该基因主要功能位点位于18～95 aa。PCR扩增出剪切掉信号肽序列的功能区序列(即包含18～95 aa的肽链段),并成功构建pBV220/FXYD6-ex基因功能区重组表达质粒克隆,其在大肠埃希菌DH5α中表达量最高,表达产物主要以包涵体形式存在。结论获得胆管癌相关FXYD6基因融合蛋白表达产物,为后续研究打下基础。