摘要：背景:bag-1是一种抗凋亡基因,其分泌蛋白是一种已经被确认的多功能结合蛋白。目前bag-1被认为可以作为早期诊断乳腺癌的一种生物标记,但其对乳腺癌预后的评估是否有意义?目的:探讨抗凋亡基因bag-1在乳腺癌组织中的表达及与预后的关系。设计:以乳腺癌、乳腺良性肿瘤及正常乳腺组织为研究对象的对照性实验。单位:解放军第四军医大学西京医院血管内分泌外科。材料:选择1995-05/2000-05手术切除的乳腺癌石蜡包埋组织块100例及2000-03/2000-05手术切除的10例乳腺良性肿瘤和10例正常乳腺组织石蜡标本作对照,以上均来自解放军第四军医大学西京医院病理科存档标本。方法:采用免疫组化链霉素-抗生物素-生物素-过氧化酶复合物法观察100例乳腺癌与10例乳腺良性肿瘤及10例正常乳腺组织的石蜡标本切片中bag-1的表达。主要观察指标:①乳腺癌、乳腺良性肿瘤及正常乳腺组织中bag-1表达水平。②不同bag-1表达水平乳腺癌患者的5年生存率。结果:bag-1在乳腺癌组织中、乳腺良性肿瘤中、正常乳腺组织中阳性表达率分别为85%,10%,10%,差异有显著性(χ2=29.98,P=0.00);在Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期的乳腺癌组织中bag-1阳性表达率分别为88%,82%,88%,差异无显著性(χ2=0.61,P=0.75);在导管癌、小叶癌及特殊型癌中bag-1阳性表达率分别为86%,85%,80%,差异无显著性(χ2=0.16,P=0.95)。对94例获随访的乳腺癌患者中,bag-1阳性表达者5年生存率为79%,bag-1阴性表达者5年生存率为9%,两者差异有显著性(χ2=0.07,P=0.04)。结论:bag-1在乳腺癌组织中高表达,bag-1在乳腺癌组织中的表达与肿瘤的临床分期,病理分型无关;bag-1可以作为乳腺癌预后的一个生物指标。

摘要：背景：同种异体移植排斥反应是影响移植物功能和存活的最大障碍，小肠移植排斥反应的诊断与治疗尤为困难。目的：探讨移植肠RANTES的表达在小肠移植急性排斥反应中的意义，以及他克莫司对它的影响。设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2003-09／2005—03在解放军第四五一医院普通外科、解放军第四军医大学附属西京医院胃肠外科实验室、解放军第四军医大学基础部电子显微镜中心为大专院校的实验室完成。材料：选用健康成年雄性SD和Wistar大鼠各72只。以SD大鼠为供者，Wistar大鼠为受者，施行异位小肠移植。方法：实施大鼠异位小肠移植，按照不同品系的组合将移植大鼠分为4组（n=18）：非手术对照组，Wistar大鼠作为正常对照，不实施小肠移植；同基因移植组，将Wistar大鼠的小肠移植给同品系的Wistar大鼠；异基因移植未治疗组，将SD大鼠的小肠移植给Wistar大鼠，移植后不给予免疫抑制剂治疗；异基因移植他克英司治疗组，将SD大鼠的小肠移植给Wistar大鼠，移植后0～7d肌肉注射他克莫司，1mg／（kg·d）。移柏后3，5，7d每组各处死6只大鼠，切取移植肠标本进行组织病理学检查，并采用免疫荧光染色和激光扫描共聚焦湿微镜技术对移植肠RANTES的表达进行连续定量测定。主要观察指标：①各组大鼠移植肠的组织病理学改变。②不同时间点移植物内RANTES阳性细胞的表达变化。③他克莫司对异基因移植大鼠移植肠RANTES表达的抑制作用。结果：72只受体大鼠均进入结果分析。异基因移植未治疗组大鼠后3，5，7d移植肠符合轻、中、重度急性排斥反应的病理学诊断标准；他克莫司治疗组大鼠和同基因移植对照组大鼠在观察期内未发现明显排斥反应征象。异基因移植未治疗组大鼠的移植肠RANTES表达在术后均显著高于其他3组（P〈0．01），其动态变化与急性排斥反应的进程呈正相关；他克莫司治疗组大鼠移植肠RANTES的表达明显低于未治疗组（P〈0．01）。结论：RANTES阳性细胞在小肠移植急性排斥反应中发挥了重要作用，动态检测移植肠RANTES的表达变化，可能成为小肠移植急性排斥反应有效的诊断指标之一。

摘要：目的:克隆人GDDR基因的启动子;构建GDDR启动子的报告基因载体并进行活性分析。方法:设计合成GD-DR启动子引物,采用PCR技术从人基因组DNA中扩增GD-DR启动子;将扩增片段插入T载体并利用酶切与测序进行鉴定;亚克隆该基因至pGL3-Basic荧光报告基因载体;瞬时转染细胞,用双荧光素酶报告基因系统检测报告基因载体的活性。结果:PCR扩增得到人GDDR基因启动子;成功构建pGL3-GDDR-promoter报告基因载体,测序结果表明启动子序列正确;双荧光素酶报告基因检测系统证实构建的报告基因载体具有启动子活性。结论:成功地构建人GDDR基因启动子的克隆及其报告基因载体的构建,为深入研究GDDR转录表达的调控机制提供基础。

摘要：目的:自行设计管状骨髓腔内骨整合式纯钛螺旋状种植体组件,通过动物实验,观察种植体-骨组织界面的骨整合情况,为临床指缺损患者种植体式手指赝复体修复提供材料及依据。方法:实验于2005-08/12在第四军医大学西京医院整形外科实验室完成。采用国产纯钛制做螺旋形柱状种植体,根据成人正常掌骨和近节指骨及其髓腔的解剖学特点及临床应用的可行性,借鉴Bmnemark螺旋型种植体,自行开发研制纯钛种植体。选择新西兰大白兔10只,在麻醉显效后,胫骨髓腔内种植纯钛螺旋状种植体10枚,分别于术后2,4,8,12,16周各处死2只动物取材,X线摄片观察骨结合形成情况。结果:所有实验动物均进入结果分析,种植体无脱落。制备出掌指骨髓腔内骨整合式纯钛螺旋型种植体组件及配件。①X线观察结果:术后2周时,种植体与骨组织间可见到较明显透光间隙,种植体-骨界面未见骨小梁及新骨形成,术后4～6周,种植体与骨组织间透光间隙减小,可见种植体周围骨密度增高,种植体螺纹间新骨形成明显,术后8周,种植体与骨组织间已无明显透光间隙,均被高密度区替代,种植体周围骨密度增高,种植体螺纹间新骨形成明显,形成更完善的骨界面,界面骨成熟,术后12周与8周相比,变化不大。②大体及光镜观察结果:术后2周时,种植体与骨组织间为软组织界面,未见新骨生成;术后4～6周,种植体周围大量新生骨样组织形成;种植体周围及螺纹间新骨形成明显,形成骨性界面;术后12周与8周相比,骨性界面进一步形成。结论:该掌指骨髓腔内骨整合式纯钛螺旋状种植体组件,术后8周可以与周围骨组织形成完全骨结合。

摘要：背景:肢体负压治疗周围动脉闭塞性疾病的机制尚不清楚。目的:观察肢体负压对周围动脉闭塞性病变犬皮肤中降钙素基因相关肽calcitoningene-relatedpeptide,CGRP免疫反应阳性神经纤维的影()响。设计:随机对照的实验研究。地点和材料:在第四军医大学西京医院动物实验室完成。健康杂种犬17只(由第四军医大学西京医院动物实验室提供),体质量12～18)kg,(雌雄不限。方法:犬17只,随机分治疗组9只,非治疗组5只和正常对照组3只,治疗组和非治疗组均将动物制作左后肢缺血模型,治疗组在模型制作后14d,开始行患肢负压治疗10d(压力为-12kPa,15min,1次/d;)非治疗组不做负压治疗。3组均行左后肢趾皮肤免疫组化染色。主要观察指标:3组CGRP免疫反应阳性纤维变化。结果:皮肤中CGRP免疫反应阳性神经纤维正常对照组为(20.70±5.6)%,非治疗组为(51.46±7.9)%,治疗组为(29.75±4.8)%。非治疗组较正常对照组明显增多(t=7.073,P<0.01),治疗组较非治疗组减少(t=6.536,P<0.01),但仍较正常对照组增多t=2.280,P<0.05)。(结论:提示肢体负压疗法可促进皮肤感觉神经纤维中CGRP的释放。

摘要：目的对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)与重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)诱导成骨能力的量效关系进行研究。方法280只BALB/c小鼠采用掷硬币方法随机分为8组,每组35只,实验组rhBMP-2的剂量均为0.5mg,bFGF的剂量分别为0,2,10,40,80,300,500活性单位(IU);设立单纯牛松质骨载体为对照组。按实验设计,分别将rhBMP-2混悬液及bFGF-PVP溶液与牛松质骨载体充分混匀,负压下真空抽吸,冻干。将复合植骨材料植入小鼠右侧股部肌袋内,各组分别于术后3,5,7,9,14,21d共6个时间点取材,进行组织学、X线分析以及钙含量测定,观察各组的诱导成骨情况。结果①bFGF剂量为10～80IU时,间充质细胞增殖、分化,软骨细胞及新生骨形成均早于其他各组,成骨量多于其他各组,组织钙含量明显高于其他各组(t=4.44,P<0.05),提示此剂量bFGF使rhBMP-2的诱导成骨能力明显增强。②bFGF剂量为0,2,300IU时,各组在间充质细胞增殖、分化,软骨细胞及新生骨形成以及组织钙含量方面差异均无显著性意义(t=0.73,P<0.05),提示此剂量bFGF对rhBMP-2的诱导成骨能力无明显影响。③bFGF剂量为500IU时,术后21d,仅1例标本可见散在的极少量新骨形成,其组织钙含量明显低于其他各组(t=6.15,P<0.05),提示此剂量bFGF明显抑制了rhBMP-2的诱导成骨能力。④术后21d,单纯松质?

摘要：背景:作为软骨组织工程的基质材料在体内降解过快或过慢,影响组织再生及塑形改建,是长期困扰学者们的难题之一。目的:在体外将骨髓基质细胞扩增、诱导为软骨细胞后,探讨以聚乳酸/聚羟基乙酸共聚物为载体修复兔关节软骨缺损的可行性。设计、时间及地点:同体对比观察实验,于2002-06/2008-06分别在解放军第四军医大学全军骨科研究所及解放军空军总医院中心实验室完成。材料:选取2月龄新西兰兔36只,自双侧股骨转子处抽取骨髓4～6mL,行原代及传代培养,传代培养时培养液中含骨形态发生蛋白2(100μg/L),培养瓶底预涂高分子透明质酸诱导为软骨细胞。调整第3代细胞浓度为2.0×1010L-1,与聚乳酸/聚羟基乙酸共聚物共培养24h,即制成聚乳酸/聚羟基乙酸共聚物-细胞复合物。方法:在36只兔髌股关节股骨髁部造成直径4mm,深达髓腔的缺损,在右侧36个膝关节植入聚乳酸/聚羟基乙酸共聚物-细胞复合物,为实验组,左侧18膝植入聚乳酸/聚羟基乙酸共聚物,为单纯载体组,另18膝造成缺损后作为空白对照。主要观察指标:术后4,8,12,24周取材,行大体及组织学观察,组织学评分。结果:单纯载体组与空白对照组在各时间点大体及组织学表现相似,故一并描述,统称为对照组。24周时实验组缺损内充填白色半透明新生软骨组织,色泽与正常软骨相似,质韧,表面平整,与正常软骨界限消失,表面细胞平行于关节面,深层细胞排列紊乱,有柱状排列的趋势,基质异染广泛,软骨下骨形成及潮线恢复正常,与周围正常软骨连接良好。对照组缺损边缘细胞呈团块状增生,底部为纤维组织。组织学评分经统计学分析,24,12周分别与8,4周时比较差异具有显著性意义(P<0.01),各时间点实验组与对照组比较差异具有显著性意义(P<0.01)。结论:用骨形态发生蛋白2和高分子透明质酸成功地在体外将骨髓基质细胞诱导为软骨细胞;聚乳酸/聚羟基乙酸共聚物在新生软骨形成的同时,逐渐降解吸收,是组织工程修复关节软骨缺损适宜的支架材料。

摘要：背景：实验室前期工作中采用牛心包材料，经去细胞处理，降低其免疫原形，进而进行染料介导的光氧化处理，得到了生物力学特性稳定、优良的生物瓣膜构建材料。目的：拟参照材料生物学评价标准评价亚甲蓝介导光氧化处理去细胞牛心包的细胞毒性。设计、时间及地点：以细胞为对象的观察对照实验，于2007-07／2008—03在解放军第四军医大学西京医院心脏外科实验室完成。材料：L929细胞株由解放军第四军医大学口腔生物学教研室提供。方法：①间接接触细胞毒性试验：L929细胞经亚甲蓝介导光氧化处理去细胞牛心包浸提液培养后，采用四甲基偶氮唑盐比色法测定其相对增殖率。根据国内医疗器械生物学评价标准评定材料毒性程度。②直接接触细胞毒性试验：将L929细胞与亚甲蓝介导光氧化处理去细胞牛心包直接接触培养，于培养不同时间点观察细胞生长状态。③将L929细胞种植于亚甲蓝介导光氧化处理去细胞牛心包表面，应用扫描电镜观察其生长情况。主要观察指标：①间接及直接接触细胞毒性试验结果。②扫描电镜观察结果。结果：①亚甲蓝介导光氧化处理去细胞牛心包性质稳定，细胞毒性程度为0-1级。②L929细胞与心包材料直接接触培养生长良好，形态学无明显改变。结论：染料亚甲蓝介导光氧化处理去细胞牛心包细胞相容性好。

摘要：背景:雌激素对中脑黑质多巴胺含量的影响在国内外已有报道,雌激素的神经细胞保护作用还正处于研究中。目的:观察雌激素对去卵巢大鼠中脑黑质多巴胺能神经元的作用,探讨雌激素对帕金森病防治的可能性。设计:以实验动物为研究对象,随机对照的验证性研究。单位:一所军医大学医院的全军神经外科研究所。材料:实验于2003-10/2004-02在解放军第四军医大学西京医院全军神经外科研究所进行试验,选择一级健康雌性Wistar大鼠50只。干预:50只大鼠随机分为5组,第1组为正常对照组,第2组为假手术组,第3,4,5组为去卵巢组:第3组术后给予10μg(2次/d)的苯甲酸雌二醇,第4组给予雌激素的同时给予雌激素受体拮抗剂三苯氧胺5μg(2次/d)。第5组不给药物。每组10只。应用立体定向技术注射6-羟基多巴胺于大鼠中脑黑质,采用免疫组织化学的方法对黑质TH阳性神经元进行标记、记数。同时,对大鼠的行为学进行观测。主要观察指标:①各组大鼠在阿朴吗啡诱导下的旋转圈数。②各组大鼠手术后30d中脑黑质TH阳性神经元数量。结果:正常对照组、假手术组与应用雌激素各组之间差异无显著性意义(P>0.05)。手术后苯甲酸雌二醇组与无药组之间差异有显著性意义(P<0.05)。应用雌激素同时应用三苯氧胺组与苯甲酸雌二醇组差异有显著性意义(P<0.05);与?

摘要：背景:排斥反应的发生是导致小肠移植失败的主要原因,趋化因子及其受体介导的细胞免疫在急性排斥反应中具有重要作用,以趋化因子受体为靶位的治疗方案,可能为临床小肠移植的免疫治疗提供借鉴。目的:观察趋化因子RANTES(Met-RANTES)对同种异体大鼠异位小肠移植术后移植物的存活时间和组织病理学改变的影响,以及与小剂量他克莫司的协同效应。设计、时间及地点:随机数字表法区组,对照观察实验,于2003-09/2005-03在解放军第四军医大学西京医院胃肠外科实验室完成。材料:健康成年雄性大鼠180只,90只SD大鼠作为供体,90只Wistar大鼠作为受体,施行异位节段性小肠移植。方法:小肠移植后,大鼠随机分为3组,30只/组:对照组,只做异位小肠移植,不给予任何药物治疗,Met-RANTES治疗组:移植后0～7d,腹腔注射Met-RANTES200μg/d;Met-RANTES联合小剂量他克莫司治疗组:移植后0～7d,腹腔注射Met-RANTES200μg/d+肌肉注射他克莫司0.5mg/(kg·d)。主要观察指标:观察移植大鼠的一般状况和存活时间,并于移植后第1,3,5,7天每组各处死6只大鼠,切取移植肠标本进行组织病理学检查和组间比较。结果:移植后的90只受体大鼠全部进入结果分析。对照组大鼠存活时间中位数为7.2d(1.5),全部死于急性排斥反应及感染。组织病理学检查显示移植后第3,5,7天分别符合轻、中、重度排斥反应。Met-RANTES治疗组大鼠存活时间中位数为19.2d(16.4),与对照组相比存活时间明显延长(P<0.01)。Met-RANTES+小剂量他克莫司治疗组大鼠存活时间中位数为30.9d(9.0),与前两组有显著差异(P<0.01)。Met-RANTES治疗组和Met-RANTES+小剂量他克莫司治疗组大鼠组织病理学检查无明显排斥反应征象,可长期存活。结论:Met-RANTES能明显抑制小肠移植急性排斥反应,有效保护移植肠功能,显著延长移植物的存活时间,并可增强小剂量他克莫司的免疫抑制作用。