摘要：庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）基因组为单链、正股ＲＮＡ，全长９３９２ｂｐ。根据５’－非编码区基因序列设计合成两对引物。随机选取酶联抗－ＨＧＶ阳性病人血清３份，阴性病人血清６份，应用逆转录－巢式聚合酶链反应进行检测。结果２份抗－ＨＧＶ阳性血清可见较强的特异扩增带，１份抗－ＨＧＶ阳性血清可见较弱的特异扩增带，其余６份抗－ＨＧＶ阴性血清均无特异性扩增带。特异扩增片断大小与设计相符，并经序列分析及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交给予证实。

摘要：笔者采用Ｘ射线照射大鼠腹部导致慢性脾虚的实用性病证相结合的动物模型。动物出现一系列典型的脾气虚征候群，符合脾气虚证的一些生化、组织学指标相应变化。造模大鼠后Ｄ－木糖血清浓度明显降低（Ｐ＜０．０１），经健脾益胃中药治疗后，Ｄ－木糖浓度恢复接近正常值，并可使脾气虚症状及其他异常生化指标也得到相应恢复。证明该模型符合中医脾虚证研究的设计要求。

摘要：G4射波刀治疗计划系统提供了射线追踪算法和蒙特卡罗算法（MC算法）两种剂量算法。射线追踪算法利用射线追踪函数来计算计划设计中每个射束的靶区体素（最大剂量点）的累积剂量，只对主要路径上不均匀介质的校正。MC算法采用的是随机抽样的模拟方法，模拟光子在入射路径上的能量沉积，考虑了非均匀介质的散射剂量的影响。MC算法是与福克斯·蔡斯癌症中心（美国）联合开发，采用了方差缩减方法，利用体素模型将各种材料视为与密度可变的水等效，利用电子迁移算法计算可变密度水的吸收剂量。

摘要：由于全长丙型肝炎病毒NS5B的疏水性 ,其表达和纯化非常困难。为了分泌表达NS5B ,作者对NS5B进行截短 ,缺失其疏水部分从而在大肠杆菌细胞中分泌表达HCVNS5B基因 ,并测定其活性。用逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)的方法 ,设计截去NS5B疏水部分 ,PCR引物以HCV全长质粒pBRTM/HCV 1为模板 ,克隆到pGEM Teasy载体中 ,双酶切后回收连接到pET 2 1b中表达。大肠杆菌培养上清过柱纯化 ,进行十二烷基磺酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和Western免疫印迹分析 ,并用液闪近端分析 (SPA)法分析NS5BRdRp活性。成功地构建了NS5B基因大肠杆菌表达载体 ,Western免疫印迹显示NS5B蛋白在大肠杆菌细胞中表达。表达产物在大肠杆菌培养上清中存在 ,分子量 6 8kD左右 ,而且 [3 H]总掺入率达 6 90 0cpm。NS5B蛋白在大肠杆菌上清中表达成功 ,经过活性测定 。

摘要：目的　探讨乙型肝炎病毒 (HBV )准种在慢性乙型肝炎患者中的存在状态。方法　以已知中国株HBV基因序列为依据 ,设计特异性聚合酶链反应 (PCR)引物 ,自 3例慢性乙型肝炎患者体内扩增HBV全S基因片段 ,克隆入 pGEMTeasy质粒 ,用限制性片段长度多态性(RFLP)法确定HBV的变异现象 ,DNA测序确定病毒的变异程度。结果　分别自 3例患者血清中克隆出 2 9、2 8和 8个阳性克隆 ,以EcoRI酶切患者 1和 2的RFLP结果提示各有 5种不同的长度带型 ,PCR产物XhoI酶切RFLP结果表现为高度保守 ,测序结果发现HBV体内毒株DNA序列高度一致 ,同一患者两株全S区序列测序结果表明DNA序列的同源性大于 97%。结论　慢性乙型肝炎患者体内有HBV准种共存 ,且呈现出一定的优势克隆现象 ,可能与患者预后有关。

摘要：目的采用自行研制的“微量核酸释放剂(micronucleicacidreleasingreagent,MNRR)”,建立微量血清直接进行PCR扩增的“一步法”实时荧光PCR检测拉米夫定治疗后YMDD变异的情况,探讨乙肝病毒YMDD变异与肝脏功能损伤程度的关系。方法设计包含YIDD和YVDD变异区和无变异参照的三条下游引物,与同一上游引物和探针建立3管荧光PCR扩增体系,变异Ct值与参照Ct值之差在3.3之内判断为阳性变异。建立将血清标本直接加到含有MNRR的扩增管进行核酸处理和PCR扩增的“一步法”检测。将0.2ml的PCR扩增管按3管/份标本排放到核酸提取仪,每管加入3.5μl的MNRR和3.5μl待测血清,用带虑芯吸头的加样器轻轻吹打混匀,加30μl无菌石蜡油覆盖,于80℃静置8min和10℃静置1min,直接加入PCR扩增液,封盖后移至实时荧光PCR仪进行扩增。对154例采用拉米夫定治疗1年后的乙肝患者YIDD变异发生率进行分析,并研究其与肝脏功能损伤程度之间的关系。结果拉米夫定治疗1年后YIDD变异率为15.9%;YVDD变异率为9.6%,YIDD和YVDD共生变异率为4.4%。发生YIDD/YVDD共生变异的患者其血清HBVDNA含量显著高于单一发生YIDD变异的患者(P<0.05),发生YMDD共生变异的乙肝患者其肝脏功能损伤的程度明显较单一发生YIDD变异者严重。结论拉米夫定治疗发生共生变异的患者其血清HBVDNA含量显著高于单一发生YIDD或YVDD变异的患者;发生YMDD共生变异的乙肝患者其肝功能损伤的程度明显重于无变异或单一发生YMDD变异的患者。

摘要：目的:了解非传染病医院妇产科医务人员对于乙型病毒性肝炎母婴传播和阻断相关知识的掌握情况。方法:设计包括传播途径、新生儿喂养、联合免疫、乙肝患者孕期的特殊治疗等内容的调查问卷。共有105名妇产科医护人员参与问卷调查,获得有效问卷93份。统计分析各题目回答总的正确率以及医生、护士回答问题正确率的差异。结果:回答正确率>80%的题目为乙肝的传播途径、与垂直传播关系最密切的检查项目,医护间回答正确率无统计学差异;正确率超过50%的项目有:联合免疫包括的内容、联合免疫的阻断效率,其中关于联合免疫的阻断效率医生回答的正确率显著高于护士,其他各问题医护间无统计学差异。回答正确率小于30%的项目有:需要暂缓妊娠的人群、妊娠期乙肝的治疗。护士回答的正确率显著低于医生。结论:非传染病院妇产科医务人员乙肝母婴垂直传播与阻断相关知识还需要加强学习,开展继续教育十分必要。

摘要：目的采用中心组合设计法优化超临界CO2技术提取大黄蒽醌的工艺。方法以提取温度、提取压力、夹带剂流速为自变量,大黄蒽醌提取率、纯度和提取总量为因变量,通过对自变量各水平的多元线性回归及二项式拟合,用效应面图和重叠等高线图选取较佳工艺,并进行验证分析。结果确定超临界CO2提取大黄蒽醌最优工艺为超临界提取温度39.7℃、提取压力42.9MPa、夹带剂流速3.14mL·min-1或提取温度50.3℃、提取压力42.9MPa、夹带剂流速2.15mL·min-1。结论中心组合设计法能够优选超临界CO2提取大黄蒽醌的工艺,方法简便,参数设置精度更高。

摘要：为了解急性腹泻病人空肠和结肠弯曲菌的感染率，建立了空肠和结肠弯曲菌的ＰＣＲ检测方法。引物设计在结肠弯曲菌鞭毛Ａ基因高度保守区，扩增产物为４５０ｂｐ。结果显示该方法仅在空肠和结肠弯曲菌ＤＮＡ有扩增产物出现，最小检测量达５０ｆｇＤＮＡ，而其它细菌如幽门弯曲菌，亲水气单胞菌，豚鼠气单胞菌，副溶血弧菌和产肠毒素性大肠埃希菌均未见扩增产物。检测急性腹泻患者粪便１００份，１１例为阳性。

摘要：目的研究血浆中可溶型B7-H3(sB7-H3)与乙型肝炎病毒相关性肝癌(HBV-HCC)的关系。方法选择在解放军第302医院住院治疗的HBV-HCC患者23例及健康体检者(HC)15例,采用ELISA检测外周血浆中sB7-H3含量;设计sB7-H3基因特异性引物,采用相对实时定量PCR(qRT-PCR)方法检测外周血单个核细胞(PBMC)、癌和癌旁组织中sB7-H3 mRNA的表达;采用免疫组织化学染色检测癌和癌旁组织中的膜型B7-H3(mB7-H3)表达。结果 HBV-HCC患者血浆中sB7-H3含量显著高于健康对照组(P0.05);而肝癌切除术后HBV-HCC患者血浆中sB7-H3含量显著下降(P<0.05),同时HBV-HCC患者癌和癌旁组织中表达的sB7-H3 mRNA比其PBMC显著升高,分别可达到PBMC中sB7-H3 mRNA表达量的60倍和1 800倍;癌旁组织中的sB7-H3 mRNA水平高于自身癌组织近30倍;癌旁组织中mB7-H3表达显著高于癌组织。结论肝癌及癌旁组织是外周血中sB7-H3的主要来源之一,sB7-H3可作为HBV-HCC的辅助诊断标志物。