摘要：目的综合评价首选玻璃体腔注射贝伐单抗(IVB)或曲安奈德(IVT)对比治疗视网膜中央静脉阻塞(CRVO)继发黄斑水肿时的疗效与安全性的差异。设计荟萃分析。研究对象Medline(1966~2012年)、EMbase(1966~2011年)、Cochrane图书馆(2011年)及中国生物医学文献数据库CBM(1979~2011年)有关贝伐单抗或曲安奈德对比治疗CRVO继发黄斑水肿的临床对照研究文献资料。方法采用Cochrane系统评价的方法,检索上述文献,按照纳入和排除标准限定研究对象,通过Jadad评分量表进行文献质量评估后,使用Cochrane协作网提供的RevMan 5.1统计软件进行Meta分析,以获得二者治疗CRVO继发黄斑水肿的疗效及安全性是否有差异的相关证据。主要指标中央黄斑厚度(CMT),最佳矫正视力,不良反应。结果共纳入玻璃体腔注射贝伐单抗或曲安奈德对比治疗CRVO继发黄斑水肿的临床对照研究6项(共242眼)。Meta分析结果显示,首选IVB组与首选IVT组的患者CMT降低幅度的差异为-33.22μm(95%CI:-74.85μm^8.42μm)(P=0.12),提高BCVA幅度的差异为0.01(95%CI:-0.13~0.14)(P=0.92)。首选IVB发生不良反应的比例低于首选IVT(合并比值比为0.03,95%CI:0.01~0.10)。结论采用首选IVB与IVT对比治疗CRVO继发黄斑水肿时,在降低CMT及提高BCVA方面二者疗效相仿,但安全性方面IVT明显较IVB差。二者间谁更适合作为CRVO继发黄斑水肿的首选治疗,尚需更多前瞻性大样本的临床随机对照试验数据支持。

摘要：目的综合评价玻璃体腔注射贝伐单抗(IVB)与曲安奈德(IVT)治疗糖尿病性黄斑水肿(DME)的疗效与安全性差异。设计荟萃分析。研究对象Medline(1966～2011年)、EMbase(1966～2010年)、Cochrane图书馆(2010年)及中国生物医学文献数据库CBM(1979～2010年)有关贝伐单抗与曲安奈德对比治疗DME的临床对照研究文献。方法采用Cochrane系统评价方法检索文献,按照纳入和排除标准限定研究对象,通过Jadad评分量表进行文献质量评估,使用Cochrane协作网提供的RevMan 5.1统计软件进行Meta分析,以获得二者治疗DME的疗效及安全性是否有差异的相关证据。主要指标中央黄斑厚度,最佳矫正视力,不良反应。结果共纳入IVB与IVT对比治疗DME的临床对照研究7项(共417眼)。首选IVB组与首选IVT组的患者中央黄斑厚度降低幅度的差异为-55.34μm(95%CI:-104.51～-6.17μm,P=0.03);提高最佳矫正视力幅度的差异为-0.06(95%CI:-0.13～0.00,P=0.06)。首选IVT组发生眼压升高的比例是首选IVB组的14.3倍(95%CI:4～50倍,P=0.000)。结论 IVT治疗DME在降低中央黄斑厚度方面优于IVB,在提高视力方面二者相似,但安全性方面较IVB差。二者谁更适合作为DME的首选治疗,尚需更多前瞻性大样本临床随机对照试验支持。

摘要：目的 综合评价玻璃体腔注射贝伐单抗（IVB）与玻璃体腔注射曲安奈德（IVT）对比治疗视网膜分支静脉阻塞（BRVO）继发黄斑水肿时的疗效与安全性的差异。 设计 荟萃分析（Meta分析）。研究对象 Medline（1966-2012年）、EMbase（1966-2011年）、Cochrane图书馆（2011年）及中国生物医学文献数据库（CBM）（1979-2011年）有关贝伐单抗与曲安奈德对比治疗BRVO继发黄斑水肿的临床对照研究文献资料。 方法 采用Cochrane系统评价的方法，检索上述文献，按照纳入和排除标准限定研究对象，通过Jadad评分量表进行文献质量评估后，使用Cochrane协作网提供的RevMan 5.1统计软件进行Meta分析，以获得两种治疗BRVO继发黄斑水肿的疗效及安全性是否有差异的相关证据。 主要指标 中央黄斑厚度（CMT），最佳矫正视力（BCVA），不良反应。 结果 共纳入IVB与IVT对比治疗BRVO继发黄斑水肿的临床对照研究8项（共376眼）。Meta分析结果显示，首选IVB组与首选IVT组的患者CMT降低幅度的差异为12.76 ＆mu;m（95%CI，-7.74 ~ 33.26 ＆mu;m，P=0.22）；提高BCVA幅度的差异为0.11 （95%CI，-0.00~0.23，P=0.06）。首选IVT组发生不良反应的比例是首选IVB组的20倍（95%CI，8.3~50倍，P=0.000）。 结论 采用首选IVB与IVT对比治疗BRVO继发黄斑水肿时，在降低CMT及提高BCVA方面两者疗效相仿，但安全性方面IVT明显较IVB差。二者间谁更适合作为BRVO继发黄斑水肿的首选治疗，尚需更多前瞻性大样本的临床随机对照试验数据支持。

摘要：目的评价荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）在生殖器疱疹（GH）诊断和分型中的应用。方法以单纯疱疹病毒（HSV）-1 DNA多聚酶基因和HSV-2糖蛋白D基因为靶基因区,设计合成正向、反向引物和探针,分别对HSV-1和HSV-2进行FQ-PCR检测,优化反应体系,进行方法学评价,并对疑似GH患者的生殖器棉拭子标本采用FQ-PCR进行检测和分型。结果建立的FQ-PCR对HSV检测和分型具有特异性;线性范围好（标准品的浓度为5×10^2～5×10^8 copies/ml,r=0.998）;灵敏度达到5×102 copies/ml;重复性较好,批内CV值为2.29%,批间CV值为4.76%。186例患者HSV阳性44例,阳性率为23.7%（44/186）;其中44例阳性者中HSV-1 8例（占18.2%）,标本病毒载量为8.5546×10^6 copies/ml,HSV-2 36例（占81.8%）,病毒载量为1.9 861×10^6 copies/ml。FQPCR与PCR法的HSV检出率与分型检测结果一致。结论建立的FQ-PCR方法具有高特异性和敏感性,分型、定量准确,方法快速、简便,可用于GH的诊断和分型。

摘要：目的探讨模拟失重对大鼠门静脉内毒素水平和肝脏超微结构的影响及意义。方法成年雄性Wistar大鼠84只,体质量280～310 g,按随机区组设计,2个因素组为模拟失重组和对照组,每个因素组设7个时相组(n=6),包括6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、5d、7 d。采用尾悬吊法建立模拟失重动物模型,应用动态浊度法鲎试验测定门静脉内毒素水平,透射电镜观察肝组织超微结构变化。结果实验组和正常对照组大鼠门静脉中均可检测到内毒素。与对照组比较,模拟失重6 h大鼠门静脉内毒素水平即明显增高(P<0.05),12 h形成高峰,随模拟失重时间延长,门静脉内毒素水平呈下降趋势,5 d组形成低谷,接近对照组水平,7 d组的门静脉内毒素水平又趋升高。透射电镜观察到模拟失重组肝细胞染色质浓缩边聚,线粒体肿胀,部分空泡变性,内质网扩张,出现凋亡小体。尾悬吊第1天、第2天最为明显。结论研究结果提示模拟失重导致门静脉内毒素血症和肝脏超微结构损失性改变。

摘要：目的表达纯化肠出血性大肠杆菌（EHEC）0157：H7的紧密黏附素（intimin）及突变体intiminN916Y，并构建其转位紧密黏附素受体（translocatedint intin receptor，Tir）结合片段（intiminbinding domain，Tir-IBD），通过BIACore技术检测紧密黏附素及突变体intiminN916Y与***蛋白质相互作用特性的变化，探索特定氨基酸的突变对其黏附结合功能的影响。方法设计引物采用PCR法自EHEC0157：H7基因组扩增Tir—IBD的编码基因tir-~d，TA克隆后构建原核表达质粒pET-21a（＋）-tir—ibd，经测序鉴定后转化最coliBL21（DE3），IPTG诱导表达，PAGE检测。目的蛋白经***亲和纯化后，再用阴离子交换柱ResourceQ和分子筛柱Superdex200进行纯化。同时按包涵体复性后纯化的方案制备紧密黏附素及突变体intiminNgl6Y，将所得高纯度目的蛋白Tir-IBD适当稀释后耦联BIACore3000配套的NTA芯片，在25℃和37℃条件下分别以紧密黏附素及突变体***916Y作为流动相进行BIACore检测。结果EHEC0157：H7基因组扩增出了约270bp的目的片段；原核表达质粒pET-21a（＋）-tir-ibd经酶切及测序鉴定与设计序列一致。转化EcoliBL21（DE3）后IPTG诱导目的蛋白表达率约15％；PAGE初步测定目的蛋白的相对分子质量（肘，）约10x103，破菌后电泳证实目的蛋白为可溶表达。Ni-NTA亲和纯化和阴离子交换纯化效果明显，高纯度的Tir-IBD蛋白耦联NTA芯片，在25℃和37℃条件下对紧密黏附素及突变体intiminN916Y与＇***相互作用的BIACore检测结果显示，intiminN916Y特定氨基酸的突变对其结合能力有明显影响并呈温度依赖性。结论EHEC0157：H7的紧密黏附素、突变体intiminN916Y及Tir-IBD经基因克隆后获得了较好的表达，纯化后获得高纯度的目的蛋白。在此基础上建立了蛋白相互作用的BIACore检测体系，证明intiminN916Y特定氨基酸的突变对其结合能力有明显影响并呈温度依赖性。

摘要：目的 荧光定量聚合酶链反应（FQ PCR）用于单纯疱疹病毒（HSV）分型检测的方法学评价及其初步应用.方法 以HSV-1 DNA多聚酶基因和HSV-2糖蛋白D基因为靶基因区,设计合成正向引物、反向引物和探针,采用FQPCR分别检测HSV-1和HSV-2标准株,对FQ-PCR进行方法学评价,并与病毒分离培养法相比较. 结果 建立的FQ-PCR对HSV检测和分型具有特异性;线性范围好（标准品的浓度在5×10^2 ～5×10^8 copies/ml,r=0.998）;灵敏度达到5×10^2 copies/ml;重复性较好,批内CV值为2.3％,批间CV值为4.8％.对120份生殖器棉拭标本用FQ-PCR和分离培养法进行分型检测,FQ-PCR的阳性率为25.8％,高于分离培养法的阳性率20.0％ （P＜0.05）. 结论 FQ-PCR方法具有快速、特异性好、敏感性高的优点,且分型准确,可用于HSV感染的早期诊断和分型.

摘要：目的:克隆表达并纯化肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7紧密粘附素胞外特异性片段(intiminC),摸索其免疫检测的初步应用。方法:设计引物采用PCR法自EHEC O157:H7基因组扩增紧密粘附素胞外特异性片段的编码基因eaeC,T-A克隆后构建原核表达质粒pET-21a(+)-eaeC,经测序鉴定后转化***21(DE3),IPTG诱导表达,PAGE检测。目的蛋白经包涵体洗涤,使用含谷胱甘肽氧化还原系统的复性缓冲液进行稀释并结合透析复性后,再用阴离子交换柱Resource Q和分子筛柱Superdex200进行纯化。将所得高纯度目的蛋白包被ELISA酶标板,对实验动物的免疫血清进行检测。结果:PCR法自EHEC O157:H7基因组扩增出了约570 bp的目的片段;原核表达质粒pET-21a(+)-eaeC经酶切及测序鉴定与设计序列一致。转化***21(DE3)后IPTG诱导目的蛋白表达率约35%;PAGE初步测定目的蛋白的相对分子质量(Mr)约20×103,破菌后电泳证实目的蛋白均以包涵体形式表达。包涵体复性后目的蛋白纯化效果明显,高纯度的intiminC蛋白包被ELISA板,对实验室动物免疫血清的检测效果良好。结论:EHEC O157:H7紧密粘附素胞外特异性片段经基因克隆后获得了较好的表达,复性纯化后获得高纯度的目的蛋白intiminC,在此基础上建立的ELISA检测方法对实验室动物免疫血清的检测效果良好。为进一步的人血清抗体检测及EHEC O157:H7感染的流行病学研究奠定了基础。