摘要：目的利用革兰阴性细菌外膜蛋白A高度保守的特性,设计和制备可识别多种食源性革兰阴性细菌的免疫磁珠,并对该免疫磁珠的识别和富集效果进行评价。方法利用革兰阴性外膜蛋白A序列高度保守的特性,从国际生物基因数据库(NCBI)提取该蛋白的氨基酸序列进行同源比对;使用抗原表位预测工具"BepiPred"预测具有免疫原性的抗原表位;将预测的多肽序列分两组混合免疫大耳白兔制备多克隆抗体,并利用间接ELISA法对抗体进行评价,挑选出优质抗体偶联磁珠捕捉细菌,利用平板培养计数的方法检验抗体的有效性和广谱性。结果经间接ELISA筛选,制备的多抗可识别阪岐克洛诺杆菌、肠出血性大肠埃希菌O157∶H7、弗氏志贺菌、肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌、小肠结肠炎耶尔森菌6种常见食源性致病菌,识别灵敏度为25μg/ml;使用该抗体制备的500 nm羧基免疫磁珠对6种细菌的捕捉率为0.47%~2.03%。结论与传统的免疫磁珠相比较,该项目制备的多抗免疫磁珠具有广谱性的特点,可提高检验效率,是一种具有应用前景的检测思路。