摘要：动物实验课是医学及生命科学相关专业中重要的实践教学环节,对医学类研究生的实验技能、科学思维和创新能力的培养具有重要意义。然而,传统的动物实验课教学方式存在内容单一、研究生参与度不高等问题。为更好地促进研究生主动学习和创新思维的培养,本文旨在探讨动物实验课的教学改革。首先,介绍动物实验课教学改革的背景和意义,强调其对研究生能力培养的重要性。其次,提出动物实验课教学改革的原则,包括以研究生为中心、注重问题解决和实践探索、促进跨学科融合等,同时将中国实验动物福利伦理审查贯穿其中。然后,从课程设计、教学方法、评价方式等方面,详细阐述动物实验课教学改革的具体措施。在课程设计上,应注重选取有挑战性和探索性的实验项目,充分考虑研究生的兴趣和专业需求。在教学方法上,应鼓励研究生主动参与、探索和合作,引导他们进行问题解决和创新思维的培养。在评价方式上,应采用多样化的评价手段,如实验报告、小组讨论和项目展示等,以全面评估研究生的综合能力和创新思维。最后,通过实践验证和效果评估,总结动物实验课教学改革的经验和成果,并提出进一步完善的建议。

摘要：目的优选甘草制巴戟天Morindae Officinalis Radix Praeparata的最佳炮制工艺,并考察其炮制前、后总寡糖对雄性小鼠睾丸支持细胞(TM4)氧化损伤的保护作用。方法采用多指标-响应面法,以D-果糖、D(+)-无水葡萄糖、蔗糖、蔗果三糖、耐斯糖、1^(F)-果呋喃糖基耐斯糖共6种糖类成分的含量为评价指标,利用层次分析法(analytical hierarchy process,AHP)-熵权法计算各评价指标的权重系数和综合评分;进一步利用Box-Behnken设计-响应面法(Box-Behnken design-response surface method,BBD-RSM)考察甘草用量、闷润时间、煎煮时间对甘草制巴戟天炮制工艺的影响,优选最佳炮制工艺;按照最佳炮制工艺制备甘草制巴戟天,并评估甘草制前、后巴戟天总寡糖对H_(2)O_(2)诱导的TM4细胞氧化应激损伤的保护作用。结果甘草制巴戟天的最佳炮制工艺为100 g生巴戟天饮片,甘草用量8 g,闷润时间1.0 h、煎煮时间35 min。药效实验结果表明,甘草制巴戟天总寡糖可显著增强谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、过氧化氢酶(catalase,CAT)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性(P<0.01)、减少丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量(P<0.05),且抗氧化应激损伤作用优于生品总寡糖。结论运用AHP-熵权法结合BBD-RSM优选制巴戟天炮制工艺,结果准确、可行;药效实验结果为巴戟天甘草制的合理性提供实验依据。

摘要：目的建立四神丸方(汤剂)19种成分同时定量分析的UPLC法,并对其提取工艺进行优化。方法采用Accucore RP-MS C_(18)色谱柱(150 mm×2.1 mm,2.6μm),乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,检测波长245 nm,建立19种成分的含量测定方法。以层次分析法获得的综合评分为评价指标,进行Box-Behnken设计-响应面试验,并对得到的最优提取工艺进行验证。结果建立了四神丸方(汤剂)中19种成分的UPLC含量测定方法,方法学考察结果均符合要求。四神丸方(汤剂)最佳提取工艺为加水14倍量,浸泡30 min,提取3次,每次48 min。结论建立的含量测定方法准确可靠,为该制剂质量控制和药效物质基础研究提供参考。优化的提取工艺合理可行,为四神丸方(汤剂)工业生产提供依据。

摘要：目的 优化百药煎的纯菌种发酵工艺,以实现百药煎质量稳定、可控,保证临床应用安全、有效,为国家及地方炮制规范提供技术支持。方法 收集根霉曲、宝山酒曲、中药特曲、红薯酒曲和安琪酿酒曲;采用酒曲发酵百药煎,以百药煎中没食子酸含量和外观性状为指标,筛选最佳发酵酒曲;从筛选出的酒曲分离发酵优势菌种,采用显微形态学及分子生物学方法对菌种进行鉴定;采用L_9(3~4)正交设计,以发酵温度、发酵时间、菌种接种量作为考察因素,以百药煎中没食子酸、(-)-表没食子儿茶素、没食子酸甲酯、2,4,6-三-O-没食子酰-α-D-葡萄糖、2,4,6-三-O-没食子酰-β-D-葡萄糖的含量作为考察指标,采用主成分分析(principal component analysis,PCA)法对5种成分进行综合评价,以计算出的总因子得分(F)为综合指标,对百药煎的纯菌种发酵工艺进行优化。结果 5种酒曲发酵百药煎中没食子酸质量分数分别为14.41%、13.73%、9.41%、9.78%、7.16%,根霉曲发酵百药煎表面长有白色菌丝,与传统发酵百药煎性状最接近。从根霉曲中分离出1个菌种,菌丝无隔膜,具分枝和假根,顶端有孢子囊,孢子囊近似球状,孢子呈球形或近似球状;测序结果通过BLAST与NCBI(***)Gen Bank数据库中的菌株序列进行比对,结合传统的形态学鉴定和分子生物学鉴定,最终鉴定结果为米根霉Rhizopus oryzae。正交法优化米根霉发酵百药煎最佳工艺为每五倍子粉末100 g,加绿茶叶10 g,茶叶加15倍量蒸馏水煎煮20 min,煎煮3次,过滤,合并滤液,浓缩约100 mL;将茶渣、适量茶汁与五倍子粉混合均匀制软材,使软材含水量约45%,并于115℃高压蒸汽灭菌锅中灭菌30 min,放凉;接种9%浓度为1×10^(8)个/mL的米根霉孢子混悬液,在温度34℃、湿度85%的条件下发酵时间52 h,取出,烘干。5种成分没食子酸、(-)-表没食子儿茶素、没食子酸甲酯、2,4,6-三-O-没食子酰-α-D-葡萄糖、2,4,6-三-O-没食子酰-β-D-葡萄糖含量高。结论 纯菌种米根霉发酵的百药煎工艺稳定,可以为纯种发酵百药煎的规范化的生产提供依据和指导。

摘要：目的:优选曼地亚红豆杉最佳酒炙工艺并建立酒炙曼地亚红豆杉饮片质量标准。方法:采用HPLC法测定紫杉醇、银杏双黄酮、金松双黄酮含量;运用AHP-熵权法结合Box-Behnken设计-响应面法考察加酒量、闷润时间、炮制时间和炮制温度对酒炙曼地亚红豆杉饮片质量的影响,优选曼地亚红豆杉酒炙工艺参数,观察酒炙曼地亚红豆杉饮片性状及粉末显微特征,并通过10批样品中的水分、总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物及紫杉烷类和黄酮类成分的分析,建立酒炙曼地亚红豆杉饮片的质量标准。结果:优化所得最优酒炙工艺参数为加酒量14.91%,闷93.60 min后,在102.89℃温度下炒16.06 min;测得炮制品浸出物的含量为34.10%~36.44%,紫杉醇、银杏双黄酮、金松双黄酮含量分别增加了17.29%、16.78%和73.02%。结论:优选的曼地亚红豆杉酒炙工艺稳定、合理,质量标准可控性强,可为酒炙曼地亚红豆杉饮片的规范化生产及应用提供参考。