摘要：目的利用R语言PMCMRplus包实现数值变量或等级资料多个独立样本两两比较的Nemenyi检验,为广大研究人员实现Nemenyi法检验提供参考。方法利用医学统计学教材和文献中的相关数据,演示用PMCMRplus包实现Krukal-Wallis检验和Nemenyi检验的过程和代码。结果R语言PMCMRplus包方便地实现了数值变量多个独立样本两两比较的Nemenyi检验,且能输出精确的χ2值和P值。结论R语言PMCMRplus包进行Nemenyi检验过程与代码易于解读、具有可操作性,为研究人员提供了实用的操作参考。

摘要：目的 初探白纹伊蚊唾液蛋白Antigen5-3(Alb-AG5-3)的结构与功能特征,并采用果蝇S2真核表达体系表达Alb-AG5-3。方法 采取同源比对的方式,从NCBI数据库中钓取Antigen5-3序列,根据白纹伊蚊分泌蛋白Antigen5-3基因参考序列(GenBank:AY826105.1)设计特异性引物,从白纹伊蚊安顺株中扩增基因全长。经序列比对后利用美国国家生物技术信息中心(NCBI)和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统(Expasy)以及生物信息学在线软件SignalP、TMHMM、SOPMA、SWISS-MODEL、AlphaFold等对该蛋白进行生物信息学分析。Trizol法提取白纹伊蚊雌蚊与雄蚊整蚊以及吸血前后雌蚊唾液腺RNA,qRT-PCR检测Alb-AG5-3在RNA相对表达量;以白纹伊蚊整蚊cDNA为模板,特异性扩增除信号肽外的Alb-AG5-3编码区,PCR产物经切胶回收纯化后与昆虫真核表达载体pMT/BiP/V5连接,构建真核重组质粒pMT/BiP/V5-Alb-AG5-3。随后转入果蝇S2细胞中,500μmol/L CuSO4诱导重组蛋白Alb-AG5-3的表达。收集上清,采用Western blot鉴定V5表达标签,镍柱亲和层析纯化重组蛋白Alb-AG5-3。结果 生物信息学分析该基因CDS(Coding sequence)区扩增全长为768 bp,编码255个氨基酸,二、三级结构预测以无规则卷曲和a-螺旋为主,具CAP超家族经典的PR-1结构域,该基因编码的蛋白是一种强亲水性(GRAVY:-0.864)的富含半胱氨酸的分泌蛋白。Alb-AG5-3 mRNA在雌蚊中表达量高于雄蚊且吸血后的表达量显著下调。成功构建了白纹伊蚊唾液蛋白pMT/BiP/V5-Alb-AG5-3真核表达质粒并通过果蝇S2表达体系表达出真核蛋白,镍柱亲和纯化后的Alb-AG5-3经Western blot检测能被V5标签蛋白抗体识别。结论 成功构建白纹伊蚊Alb-AG5-3真核质粒并在果蝇S2细胞中表达真核蛋白Alb-AG5-3,镍柱亲和纯化后获得单一的Alb-AG5-3蛋白以备后续分析。

摘要：传统生物制药技术教学中存在课堂教学以教师知识传授为主、学生学习知识点较为分散、不能及时跟进科学前沿等主要问题。因此,需要对生物制药技术课程的课前、课中、课后及线上、线下进行混合式教学设计,以顺应信息化时代的教育技术变革。本研究对生物制药技术课程采用“PBL+学习通”混合式教学模式,并初步在教学实践中对学生进行问卷调查和访谈。结果表明,混合式教学能充分调动学生学习的积极性,有效促进学生的自主学习,提高教学效果和课程满意度。

摘要：科研反哺教学能够有效提高专业教学的质量,基于科研成果设计的大综合实验能够训练学生的系统性科研思维,培养学生的创新实践能力。文章在前期开展生物技术大综合实验教学的基础上,通过问卷调查及总结分析发现,大综合实验教学能有效地提高学生的专业兴趣和学习积极性,符合大学生对专业课程学习的预期要求,但男女生对课程的认知以及学习过程中的课堂表现和学习效果存在一定的差异,后续进行适当的教学内容完善和教学设计优化将对培养高质量的生物医学专业人才起到积极的推动作用。