摘要：目的:采用问卷形式调查我国围术期中医适宜技术的实施现状。方法:2022年5月至6月,采用自行设计的调查问卷,在全国范围内通过微信平台将调查问卷向参与调查的麻醉医生发送,系统自动记录调查情况。结果:共6230名麻醉医生参与问卷调查,有效问卷6160份,有效率为98.88%。参与问卷调查的麻醉医生分布于全国16个省级行政区,其中来自三级医院的比率为32.59%,二级医院的比率为67.41%,围术期中医适宜技术的应用率为9.8%。围术期中医适宜技术在三级医院应用率高于二级医院(9.51%vs.6.31%,P<0.05),在中医医院应用率高于中西医结合医院和西医综合医院(26.15%vs.7.26%vs.2.49%,P<0.05)。在参与调查的省份中,广东省围术期中医适宜技术应用率最高(13.60%)。围术期开展中医适宜技术的麻醉医生中非药物治疗应用率最高(59.0%),在腹部手术中的应用率最高(47.4%),大部分(68.1%)的麻醉医生是根据患者的手术类型选取中医适宜技术。围术期应用中医适宜技术的麻醉医生认为中医适宜技术具有减少围术期恶心呕吐发生(66.8%)、减轻围术期疼痛(54.8%)、促进围术期胃肠功能恢复(49.8%)和减少围术期神经认知功能障碍发生(47.0%)等功效;围术期未应用中医适宜技术的主要原因依次为缺少规范化的技术培训和相关指南(87.11%)、缺乏相关收费项目(58.30%)、操作者的技术水平(46.20%)、外科医生不支持(43.40%)、病人不配合操作(27.10%)。结论:目前我国围术期中医适宜技术的应用率普遍较低,且不同省份、不同级别医院应用率差异较大。应该多渠道扩大宣传,开展多种形式的技术培训,不断优化中医适宜技术的实施方案及指南,加强围术期中医适宜技术的推广及应用。

摘要：目的构建大鼠shRNA-TRPC4重组腺病毒载体并观察其在大鼠内皮祖细胞(EPCs)中的转染效率。方法针对大鼠TRPC4序列设计4个RNA干扰靶点序列并合成双链DNA oligo,连接入干扰载体后转入大肠杆菌感受态细胞,培养后挑取转化子进行PCR鉴定及测序比对。利用Admax包装系统获得重组腺病毒Ad-shRNA-TRPC4小量扩增并测定病毒滴度,检测重组腺病毒对TRPC4表达的影响,最后将获得的重组腺病毒转染EPCs,在荧光显微镜下观察并用流式细胞仪测定其转染效率。结果 4组干扰质粒经培养后的转化子中均有阳性克隆,且阳性克隆与设计的干扰靶点序列一致;4组目的质粒均可抑制TRPC4蛋白的表达,合成的Ad-shRNA-TRPC4病毒滴度为5×1010 ifu/mL;倒置荧光显微镜和流式细胞仪检测重组腺病毒在大鼠EPCs的转染效率分别为(85.47±2.05)%和(67.27±2.94)%。结论本实验成功构建Ad-shRNA-TRPC4载体,其在EPCs的转染效率高。

摘要：目的研究严重创伤患者细胞免疫功能动态变化规律及其在创伤预后评估中的作用。方法采用前瞻性队列研究设计,连续纳入重庆市急救医疗中心2019年11月至2020年1月收治的创伤患者为研究对象。采集患者伤后1、3、5、7、14 d外周血,分离白细胞,采用流式细胞分析技术检测中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞表面CD64、CD274、CD279表达及CD3^(+)总T淋巴细胞、CD4^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞亚群。根据损伤严重度评分(ISS)和伤后28 d内是否发生脓毒症分组,分析患者细胞免疫指标的动态变化及与创伤严重程度、感染并发症的关系;进一步采用Pearson检验分析细胞免疫指标与急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEⅡ)、序贯器官衰竭评分(SOFA)、ISS评分的相关性。结果共纳入42例创伤患者,其中ISS>25分的严重伤患者8例,16分<ISS≤25分的重伤患者及ISS≤16分的轻伤患者各17例;伤后28 d内发生脓毒症6例,脓毒症发病率为14.3%。在创伤发生后不同时间点比较各细胞免疫指标动态变化显示,CD64指数和CD4^(+)T淋巴细胞亚群比例随时间延长逐渐增加(H=15.464、P=0.004,F=2.491、P=0.035)。伤后1 d和3 d,损伤越重的患者,其CD64指数及中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞CD279阳性率越高。伤后1 d轻伤、重伤、严重伤患者的CD64指数分别为2.81±1.79、1.77±0.92、3.49±1.09,中性粒细胞CD279阳性率分别为1.40%(0.32%,2.04%)、0.95%(0.44%,2.70%)、12.73%(3.00%,25.20%),淋巴细胞CD279阳性率分别为3.77%(3.04%,5.15%)、4.71%(4.08%,6.32%)、8.01%(4.59%,11.59%),单核细胞CD279阳性率分别为0.57%(0.24%,1.09%)、0.85%(0.22%,1.25%)、6.74%(2.61%,18.94%),其中严重伤患者CD64指数显著高于重伤患者,中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞的CD279阳性率显著高于轻伤和重伤患者(均P<0.05)。伤后3 d,严重伤患者CD64指数和淋巴细胞CD279阳性率均显著高于重伤患者〔4.58±2.41比2.43±1.68,7.35%(5.90%,12.28%)比4.63%(3.26%,6.06%),均P<0.05〕。发生脓毒症的患者伤后1 d CD64指数和单核细胞CD279阳性率显著高于未发生脓毒症的患者〔4.06±1.72比2.36±1.31,3.29%(1.14%,12.84%)比0.67%(0.25%,1.48%),均P<0.05〕,伤后3 d淋巴细胞CD279阳性率显著高于未发生脓毒症的患者〔8.73%(7.52%,15.82%)比4.67%(3.82%,6.21%),P<0.05〕。此外,相关性分析显示,伤后1 d,淋巴细胞CD279阳性率与SOFA和ISS评分呈正相关(r值分别为0.533、0.394,均P<0.05);单核细胞CD279阳性率与APACHEⅡ、SOFA和ISS评分呈正相关(r值分别为0.579、0.452、0.490,均P<0.01);中性粒细胞CD279阳性率与APACHEⅡ和ISS评分呈正相关(r值分别为0.358、0.388,均P<0.05)。结论CD64指数和中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞的CD279表达水平与创伤患者损伤严重程度及预后相关,监测细胞免疫功能可能对创伤预后评估具有重要意义。

摘要：目的探讨将放疗流程的中期评估作为临床质量保证(QA)和质量控制(QC)环节的必要性。方法111例同期放化疗Ⅲ期局部晚期非小细胞肺癌患者,放射治疗36~40 Gy时进行中期评估,根据评估结果分为修改靶区组(78例,重新定位、融合图像)和未修改靶区组(33例,执行原放疗计划);采用同期放化疗,化疗以铂类为基础的两药联合方案,放疗为调强放疗技术,初始和中期评估均采用相同的增强CT定位扫描、靶区勾画、计划设计和评估原则;观察2组剂量体积参数[双肺平均肺剂量(MLD)、全肺接收5Gy或以上辐射剂量的体积百分比(V5)、平均心脏剂量(MHD)]、放射性肺炎(RP)及放射性食管炎(RE);随访两组局部复发(LR)及局部无进展生存(LRPFS)情况。结果放疗疗程中期评估时,修改靶区组较未修改靶区组,在剂量体积参数中正常组织MLD、V5和MHD有降低,差异有统计学意义(P0.05),结果表明放射治疗流程中重新调整放疗计划的中期评估,对放射性肺炎、放射性食管炎及局部控制率无影响,修改靶区安全可行。结论放疗流程中期进行中期评估并对肿瘤缩小明显患者调整放疗计划不影响疗效,可作为放射治疗临床QA/QC质控环节。

摘要：目的建立基于实时荧光环介导等温扩增的人乳头瘤病58型基因检测体系,用于其快速检测和早期诊断。方法运用LAMP在线引物设计软件Primer Explorer V5,针对人乳头瘤病毒58型的L1区域保守基因设计引物,在反应前加入荧光核酸染料SYBR GreenⅠ,并对该反应体系中的dNTPs、Mg;和内引物（FIP、BIP）浓度进行优化,优化结果通过"S"型扩增曲线判断,并对优化后的实时荧光环介导等温扩增体系进行特异性、灵敏度检测及临床标本检测。结果针对人乳头瘤病毒58型所建立的实时荧光环介导等温扩增检测体系具有良好的特异性及灵敏度,且与临床实验室检测结果（qPCR方法）的符合率达100%,该检测方法的灵敏度可达10拷贝/μL。结论本研究建立了人乳头瘤病毒58型的实时荧光环介导等温扩增检测体系,它是一种耗时少、操作简便、特异性强、灵敏度高的方法,适用于HPV临床样本的快速检测。

摘要：目的探讨急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者直接经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后心肌微循环特征与冠状动脉高血栓负荷的相关性。方法选择2020年1月至2022年1月于贵州医科大学附属医院接受PCI的183例STEMI患者作为研究对象,根据血栓负荷状态分为高血栓负荷组(n=60)与低血栓负荷组(n=123)。比较两组患者的一般资料,以及PCI术前术后心肌微循环特征指标。采用析因设计方差分析比较PCI术后冠状动脉血流储备(CFR)与微循环阻力指数(IMR)的交互作用对冠状动脉血栓负荷影响。采用受试者工作特征(ROC)评估CFR和IMR对STEMI患者发生冠状动脉高血栓负荷的预测价值。另根据SYNTAX积分将STEMI患者分为高积分亚组(≥33分,n=75)和低积分亚组(<33分,n=108),比较不同严重程度的高血栓负荷患者临床资料。通过Logistic回归分析并构建校正模型,分析不同微循环特征指标与高积分亚组患者冠状动脉高血栓负荷的关系。采用Cox比例风险回归模型,分析CFR和IMR水平及SYNTAX积分对冠状动脉高血栓负荷的影响。结果析因设计资料的方差分析结果显示,CFR与IMR在冠状动脉血栓负荷方面存在交互作用。CFR和IMR对STEMI患者发生冠状动脉高血栓负荷的预测效能良好,且二者联合预测冠状动脉高血栓负荷,预测效能更高。通过Logistic回归分析可知,校正混杂因素后,CFR、IMR与高积分亚组患者冠状动脉高血栓负荷的OR值分别为0.806、1.980,得出CFR、IMR是高积分亚组患者冠状动脉高血栓负荷的独立危险因素(P<0.05)。交互作用分析发现,CFR、IMR与SYNTAX积分存在相乘交互作用。结论STEMI患者PCI术后CFR与IMR是冠状动脉高血栓负荷的影响因素,且对冠状动脉高血栓负荷的影响均存在相加及相乘交互作用。

摘要：目的:探讨3种不同问诊对象在病史采集实验课教学中的应用效果,为进一步改进教学方法提供依据。方法:2022年3月选取贵州医科大学2019级口腔医学专业的183名学生为研究对象,采用随机数字表法将其分为3组,分别对应以患者作为问诊对象的真实患者(real patient,RP)组、以学生作为问诊对象的学生标准化病人(standardized patient,SP)组和以教师作为问诊对象的教师SP组,病史采集实验课教学后对3组学生进行病史采集和病历书写考核,采用单因素方差分析和卡方检验比较组间差异。结果:3组学生的病史采集理论考核成绩由高到低依次为教师SP组[(81.07±3.66)分]、学生SP组[(79.51±4.25)分]和RP组[(77.62±5.21)分],其差异具有统计学意义( F=9.27, P<0.001),病历书写成绩由高到低依次为RP组[(75.62±7.19)分]、教师SP组[(75.49±6.65)分]和学生SP组[(74.39±6.04)分],其差异无统计学意义( F=0.63, P=0.534)。 结论:在病史采集训练中,不同问诊对象学生获益不同。在进行病史采集教案设计时,可以根据需求选择相应的对象。

摘要：目的:探讨混合现实技术(MR)在人工股骨头置换术的价值。方法:选取20例股骨颈骨折患者随机均分为A、B两组,A组患者根据影像数据重建可视化模型用于术前规划和术中辅助手术,B组患者采用常规手术;比较2组患者的手术时间、术中出血量及切口长度,于出院时、术后1月及6月,采用髋关节Harris评分评价2组患者的治疗效果;同时设计"医生问卷表"和"患者问卷表",由参与手术的医生及A组患者于术后分别填写,了解医患双方对MR的满意度。结果:A组患者较B组切口短(P <0. 05)、出院时髋关节Harris评分高于B组(P <0. 05);医生及患者对MR三维模型总体满意度评分较高。结论:MR可有效辅助医生手术,缩短切口长度、促进早期髋关节功能恢复。MR模型也是一种有效的医患沟通工具,对股骨颈骨折临床应用具有潜在价值。

摘要：目的:基于正交设计法,优选芍药甘草汤胃漂浮缓释片的制剂最优处方配比,研究芍药甘草汤胃漂浮缓释片的制备工艺。方法:以芍药苷释放度为评价指标,以辅料羟丙基甲基纤维素(HPMC K4M)、NaHCO3、聚乙烯吡咯烷酮(PVP K-30)的用量3个因素设计正交试验,筛选出芍药甘草胃漂浮片最佳原辅料配比,以优化制剂体外释药及漂浮性能。结果:根据正交试验结果发现各因素对芍药甘草汤胃漂浮缓释片制备工艺的影响:羟丙基甲基纤维素>NaHCO3>聚乙烯吡咯烷酮。根据主观分析及SPSS方差分析,选择以A3B2C1作为芍药甘草汤胃漂浮缓释片处方的最优制剂配方组合。结论:优选的芍药甘草汤胃漂浮缓释片原辅料选择与配比合理有效,达到了持续漂浮及缓慢释放的要求,可操作性强。

摘要：目的探讨人结节型皮肤基底细胞癌(BCC)病变组织及细胞株中视蛋白3(OPN3)的表达及功能。方法选取31例结节型BCC患者病灶组织及相邻癌旁正常组织(PANST)分别作为病灶组及PANST组,采用免疫荧光染色法检测OPN3的表达,Western blot及实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分别检测2组标本组织中OPN3蛋白及mRNA的表达;取对数生长期的人BCC细胞株TE354T,分为对照(Control)组、空白(RNAi-NC)组及实验(RNAi-OPN3)组,并设计针对人OPN3的小干扰RNA转染TE354T细胞,采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)检测OPN3下调后0、24、48及72 h RNAi-NC组及RNAi-OPN3组的细胞增殖活性,采用Transwell迁移和细胞划痕实验检测OPN3下调48 h后2组细胞的迁移能力,采用流式细胞术和Western blot分别检测OPN3下调48 h后2组细胞凋亡数量及钙通道相关蛋白环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)、磷酸化CREB(p-CREB)、钙调蛋白依赖激酶Ⅱ(CAMKⅡ)、磷酸化CAMKⅡ(p-CAMKⅡ)的表达。结果与PANST组比较,病灶组BCC组织中OPN3表达增高(P<0.05);下调OPN3后72 h,RNAi-OPN3组TE354T细胞增殖活性较RNAi-NC组下降(P<0.05);下调OPN3后48 h,与RNAi-NC组相比,RNAi-OPN3组TE354T细胞迁移能力降低(P<0.05),TE354T细胞凋亡细胞数量增加(P<0.05),TE354T细胞钙通道相关蛋白p-CREB和p-CAMKⅡ表达下降(P<0.05)。结论OPN3在人结节型BCC组织中高表达,可调控人BCC系TE354T细胞的增殖、迁移及凋亡,其机制可能与钙依赖G蛋白偶联受体(GPCR)信号通路有关。