摘要：目的构建重组双荧光素酶报告基因质粒psiCHECK-2-Intron,并观察其在非小细胞肺癌细胞株PC-9转染后对萤火虫荧光素酶、海肾荧光素酶表达。方法以双荧光素酶报告基因质粒psiCHECK-2中的嵌合体内含子(设计长度为133 bp)为模板,PCR扩增后插入到psiCHECK-2质粒中,即获得重组双荧光素酶报告基因质粒psi-CHECK-2-Intron。取psiCHECK-2-Intron质粒,转染至感受态大肠杆菌中,采用琼脂糖凝胶电泳实验观察目的基因片段长度,并对目的基因片段进行基因测序。将重组双荧光素酶报告基因质粒psiCHECK-2-Intron、双荧光素酶报告基因质粒psiCHECK-2分别转染至PC-9细胞中,记为转染组、对照组,采用qRT-PCR法检测两组细胞中萤火虫荧光素酶mRNA、海肾荧光素酶mRNA,采用双荧光素酶活性实验检测两组细胞中萤火虫荧光素酶活性、海肾荧光素酶活性。结果目的基因片段长度为133 bp,基因序列正确,无突变和缺失,表明重组双荧光素酶报告基因质粒psiCHECK-2-Intron构建成功。转染组细胞中萤火虫荧光素酶mRNA、海肾荧光素酶mRNA的相对表达量分别为2.213±0.038、2.004±0.025,对照组分别为1.004±0.012、1.003±0.010,两组相比,P均<0.05。转染组细胞中萤火虫荧光素酶活性、海肾荧光素酶活性分别为2.974±0.099、1.948±0.052,对照组分别为1.000±0.018、1.000±0.020,两组相比,P均<0.05。结论成功构建了重组双荧光素酶报告基因质粒psiCHECK-2-Intron;psiCHECK-2-Intron转染PC-9细胞后,细胞中萤火虫荧光素酶、海肾荧光素酶的表达均升高。

摘要：目的构建使α3nAChR基因上调的重组质粒α3nAChR-pcDNA3.1并转染至神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y),研究α3nAChR基因上调对细胞突触素(SYP)水平的影响。方法设计α3nAChR上下游引物,通过逆转录PCR的方法获取人α3nAChR特异核苷酸序列,并将其克隆到质粒载体pcDNA3.1上,构建重组质粒α3nAChR-pcDNA3.1;瞬时转染至SH-SY5Y细胞后,用Real-time法和蛋白免疫印迹法分别α3nAChR及蛋白水平,并检测上调细胞中SYPmRNA和蛋白水平的变化。结果成功构建了使α3nAChR基因上调的重组质粒α3nAChRpcDNA3.1;将α3nAChR-pcDNA3.1质粒转染到SH-SY5Y细胞后,与空载质粒组及正常对照组相比,α3nAChRmRNA及蛋白表达水平分别增加了422%和106%(P<0.05);SYPmRNA及蛋白表达水平分别增加了115%和43%(P<0.05)。结论α3nAChR表达的上调可使细胞SYP的表达增加,说明了α3nAChR与SYP密切相关,在AD的发生中可能起着重要作用。

摘要：[目的]在大肠杆菌中构建基于嗜热Ⅱ型内含子的高效Thermotargetron基因打靶系统,并验证其温度敏感性及打靶效率,为嗜热Ⅱ型内含子功能分析建立快速遗传检测平台。[方法]首先,以大肠杆菌lacZ基因为靶基因,根据嗜热Ⅱ型内含子碱基识别规律设计基因打靶引物,构建IPTG诱导型Thermotargetron打靶载体。然后,利用蓝白斑筛选及菌落PCR方法检测其打靶效率,并通过优化温度、IPTG浓度及诱导时间,确定Thermotargetron在大肠杆菌中的最佳打靶条件。[结果]在大肠杆菌正常生理条件下,Thermotargetron不具有基因打靶功能,而在45℃及以上条件下可获得较好的打靶效率,且在48℃、1.0 mmol/L IPTG诱导5 h时在lacZ-369a、lacZ-60a、lacZ-515a三个位点的打靶效率分别达到98.05%±1.67%、91.76%±7.08%和69.77%±5.86%。[结论]在短暂耐高温的大肠杆菌中建立了IPTG诱导的Thermotargetron基因打靶系统,该系统在任意选择的3个靶位点的打靶效率平均为86.5%±12.1%,为嗜热Ⅱ型内含子的功能机制研究奠定了平台基础。

摘要：目的分析卒中患者误吸风险感知及预防行为倾向的现状。方法采用自行设计的问卷选取2022年2-8月贵州省3所三级甲等综合医院的186例卒中患者为研究对象,分析调查结果和影响误吸预防行为倾向的相关因素。结果卒中患者误吸风险感知总得分为(49.65±9.10)分,得分率为66.2%。误吸预防行为倾向总得分为(18.06±3.51)分,得分率为72.2%。单因素分析结果显示,不同年龄、文化程度、婚姻状况、家庭人均月收入、吞咽障碍、医疗付费方式的卒中患者的误吸预防行为倾向得分比较,差异有统计学意义(P<0.05)。卒中患者误吸风险感知总分及各维度与误吸预防行为的总分呈正相关(P<0.05)。多因素分析结果显示,年龄、文化程度、吞咽障碍、误吸危险因素感知、健康风险感知、社会心理风险感知对卒中患者误吸预防行为倾向有影响(P<0.05)。结论应针对影响误吸预防行为倾向的相关因素进行干预。

摘要：贵州省结合省统筹全民健康信息平台和健康医疗大数据中心建设,探索构建以信息标准为主的基础信息资源管理,构建区域卫生信息标准协同管理平台。从需求分析、建设目标、框架设计、功能模块、应用效果等多角度展开分析,阐述了实现基于省级全民健康信息平台的数据共享交换,实现对异构系统间的基础资源目录及基础标准进行整合,避免重复建设、重复维护、编码不统一等问题,强化国家卫生信息标准的落地应用,为区域建设卫生信息标准协同管理平台提供了借鉴、参考。

摘要：骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一种临床上常见的逐渐进展的慢性骨关节病变,是以关节软骨损害为主的非炎性退行性关节病,常常累及整个关节面组织,最终导致关节疼痛、活动障碍,甚至畸形。三维(three-dimensional,3D)打印技术是快速成型技术工艺中的一种,指以数字模型的数据文件为基础,粘合粉末状的各类金属及塑料颗粒等物质,并通过逐层打印制作的方式,来构建数字模型所设计的物体结构的技术。近年来,3D打印技术在医学领域应用相对广泛,特别是等比例打印骨与关节模型在骨关节炎治疗过程中体现了其独特优势。骨与关节模型的制作,不仅能更加直观详细地展现骨与关节的解剖结构、明确破坏部位及程度,而且能明显缩短手术时间、减少术中出血量及缩短术后恢复时间。因此,本文通过近年来3D打印技术在骨关节炎中的应用研究进行综述。

摘要：目的调查中国儿科医务人员对脉搏血氧饱和度监测的知识、态度和行为(简称知信行),并分析其影响因素。方法采用自行设计的问卷,在2022年3月11日至14日对来自中国31个省、自治区、直辖市的11849例儿科医务人员进行线上调查。采用Logistic回归分析儿科医务人员脉搏血氧饱和度监测知信行的主要影响因素。结果儿科医务人员脉搏血氧饱和度监测知识、态度、行为总得分分别为(5.57±0.96)分、(11.24±1.25)分和(11.19±4.54)分,得分率分别为69.61%、74.95%和55.99%。Logistic回归分析显示,儿科医务人员的年龄、从业年限、所在地区和所在单位是否配置脉搏血氧仪是知识水平的主要影响因素(均P<0.05);知识水平、性别、学历、从业年限、所在地区、所在医院级别和所在单位是否配置脉搏血氧仪是态度水平的主要影响因素(均P<0.05);知识水平、性别、年龄和所在单位是否配置脉搏血氧仪是行为水平的主要影响因素(均P<0.05)。结论中国儿科医务人员对脉搏血氧饱和度监测的知识和态度水平有待进一步提高,脉搏血氧仪的使用存在明显不足。亟须制定相关政策/指南,加强教育培训,提高知信度,增加脉搏血氧仪的配置,普及推广脉搏血氧饱和度监测在临床实践中的应用。

摘要：目的:评价阿柏西普(AFL)在糖尿病性黄斑水肿(DME)治疗中的获益与风险,为各层次的决策提供循证证据,指导临床实践。方法:采用快速卫生技术评估(HTA)方法,系统检索PubMed、Embase、the Cochrane Library、中国知网、万方数据库和中国生物医学文献服务系统,检索时限为建库至2021年11月11日,语言不限。纳入研究AFL治疗DME的临床有效性和安全性的HTA报告、系统评价/Meta分析以及药物经济学研究,同时手工检索纳入研究的参考文献列表作为补充。使用AMSTAR和CHEERS工具评价纳入研究和报告的质量。通过对纳入证据的研究设计和方法学质量等情况进行综合比较和描述性分析。结果:初筛获得1912篇文献,最终纳入20篇研究(12篇系统评价/Meta分析和8篇药物经济学研究),研究质量为中等质量或高质量。评估结果提示,与雷珠单抗(RAN)、贝伐珠单抗(BEV)或激光光凝疗法(LP)相比,AFL可获得更佳的视力改善(以最佳矫正视力、ETDRS字母行数的得失为结局指标)和更少的注射次数;相比LP,AFL的解剖学指标(中央黄斑厚度或黄斑中心凹处视网膜厚度)改善更佳;AFL的严重不良事件、眼部严重不良事件等安全性与其他药物相当。在我国,AFL的经济性优于RAN。结论:AFL治疗DME的有效性较RAN、BEV或LP更佳,安全性与RAN、BEV或LP相当,在我国具有经济学优势。将来应基于我国人群数据,进一步研究DME患者使用AFL的最佳方案以及长期用药的有效性、安全性和经济性。

摘要：目的本研究重新设计软包装安瓿的开口，使其与注射器的乳头相吻合，以有效避免针刺伤。同时通过实验研究，检测该开口设计的合理性。方法本研究通过3D打印技术制作新型软包装安瓿模型30支，并经环氧乙烷灭菌处理，并用注射器注入2 ml蒸馏水。后应用无针技术抽取出蒸馏水，计算抽取量与注入量的差异（流失量）。并注入1 ml蒸馏水于营养琼脂平板，在（35±1）℃培养48 h，计算菌落数。该实验重复执行2次。对照组采用60支2 m1无菌蒸馏水注射液，采用传统方法抽取液体，同上述方法计算量差（多余量）及菌落数。结果试验组无菌蒸馏水流失量中位数为0．06 m1．95％CI为0．05-0．07 ml；对照组无菌蒸馏水多余量中位数为0．06 ml，95％CI为0．06—0．07ml，2组比较差异无统计学意义（Z=-1．194，P=0．233）。试验组2次实验共培养出8个菌落数（CFU），对照组4个，2组比较差异无统计学意义（P=0．224）。结论该新型软包装开口有助于医护人员有效避免针刺伤。且该开口设计与注射器吻合度好，且不导致液体残留，无针抽药操作也不会增加污染率，提示该设计适用于临床实践。

摘要：针刺伤是护理人员最常见的职业危害之一,安全防护器具的探索是研究人员控制针刺伤的重要途径,为避免护士在输液器毁型过程中发生针刺伤,并规范输液器毁型剪的使用,特设计医用剪刀放置杯。现介绍如下。