摘要：从药用菊花皇菊中克隆二氢黄酮醇还原酶(dihydroflavonol 4-reductase,DFR)基因片段,插入病毒诱导载体中来抑制菊花内源性基因的表达,用于其基因功能分析。根据已报道的菊花DFR基因序列(GenBank登录号GU324979)设计引物,克隆部分基因序列,应用生物信息学方法对其氨基酸序列进行分析。采用病毒诱导基因沉默技术(VIGS),以菊花的扦插苗生长到第3~4片叶期的菊花植株为实验材料,沉默菊花的DFR基因,用半定量和荧光定量PCR检测病毒诱导沉默后DFR基因的表达。克隆得到黄菊DFR基因的最大开放阅读框为1029 bp,共编码342个氨基酸,等电点是6.03,分子量是41089.36,与同一科属植物之间同源性达到80%以上,说明DFR蛋白氨基酸序列在同一科属间具有高度保守性。根据DFR基因全长设计构建病毒诱导载体的引物得到453 bp的目的基因,命名为NbDFR。构建病毒载体(TRV)并利用携带目的基因的TRV重组载体病毒感染菊花幼苗,10 d后可以看出菊花出现发育迟缓且叶片皱缩干枯的现象,检测DFR基因发现基因表达下调约20%,但未达到显著性。DFR基因是否被成功沉默还进一步验证。病毒诱导的基因沉默技术可在药用菊花中初步快速鉴定相关基因的功能。

摘要：采用盆栽试验,以3种类型菊花为供试材料,用硝态氮(NO^-3-N)和铵态氮(NH^+4-N)为供试氮肥,分别设定5个氮素水平,5种氮素组合形式设计实验,研究氮素不同组合形式对菊花生理和品质的影响。结果表明,氮素形态对菊花生理和品质的影响存在较大差异。金丝皇菊和野菊其绿原酸和黄酮含量经过不同形态氮素组合处理后均显著性高于对照,而观赏性菊花神马菊花黄酮和绿原酸含量与对照相比差异不显著。铵态氮对菊花黄酮含量以及绿原酸含量的影响要大于硝态氮,而硝态氮对菊花木犀草苷含量的影响要大于铵态氮。

摘要：目的研究小春花根黄酮提取工艺及其抗油脂氧化活性。方法以总黄酮提取率为考察指标,利用单因素试验结合响应面Box-Benhnken试验设计方法,研究乙醇浓度、料液比、提取时间、提取温度4个因素对提取工艺的影响,优化小春花根黄酮提取工艺;通过烘箱热贮藏实验研究小春花根黄酮对油脂的抗氧化作用。结果影响小春花根总黄酮提取的因素依次为:超声提取温度>乙醇浓度>提取时间>料液比,小春花根总黄酮最佳工艺条件为:乙醇体积分数73%,料液比1:43(g/mL),提取时间73 min,提取温度71℃。黄酮提取得率为3.4299 mg/g,与理论预测值3.4913 mg/g接近。抗氧化活性分析表明,黄酮提取物有较强抗油脂氧化活性;对油脂的抗氧化能力与黄酮提取物浓度成正相关,1 mg/mL黄酮提取物与VC的抗氧化作用相当。结论小春花根黄酮对油脂良好的保护效果,在油脂抗氧化添加剂的应用方面具有潜在的开发价值。