摘要：为建立Ⅰ群4型禽腺病毒特异性SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法,参考Gen Bank中已发布的禽腺病毒的六邻体基因(Hexon)序列设计两对引物,通过PCR扩增出Hexon基因的954 bp目的片段,克隆至p MD-19T载体,提取阳性质粒测定浓度,10倍系列稀释作为荧光定量PCR的标准品模板,制备标准曲线。结果显示,荧光定量PCR熔解曲线峰值单一,产蛋下降综合症病毒(EDSV)、传染性喉气管炎病毒(ILTV)、禽白血病病毒(ALV)等外源病毒均无扩增曲线出现,对标准品模板最低检出值为1.2×101拷贝/μL。对7份Ⅰ群4型禽腺病毒的细胞培养物的检出率为100%,表明建立的实时荧光定量PCR检测方法准确可行。

摘要：为了解猪圆环病毒2型贵州株（PCV2-GZ）ORF1基因的生物学特性，针对 ORF1基因设计1对特异性引物，取 PCV2阳性病料 DNA 为模板进行 PCR 扩增，克隆测序后进行生物信息学分析。结果表明：PCV2-GZ ORF1基因序列与 GenBank 登录的14株 PCV2（06-06274，CC1，HUB-5，HUN-11，JX-1，LN-3，P710-1，PCV2HERD D，SC-10，SVP-321，SX-1，VOS 2689006，ZJ-38，N1）相应序列核苷酸的同源性为96．8％～99．7％，与国内 HUB-5和 ZJ-38的同源性最高，均为99．7％；PCV2-GZ 编码的 Rep 蛋白与 P710-1、HUB-5、SC-10、ZJ-38株的氨基酸序列同源性较高，均为99．4％。PCV2-GZ Rep 蛋白可形成优势抗原表位，且不存在跨膜结构和信号肽，推测可进行 PCV2 ORF1基因的全基因表达。