摘要：目的:实现贵阳腐霉(Pythium guiyangense Su)类枯草菌素蛋白酶(subtilisin-like protease,Pr1)基因在大肠杆菌中的活性表达,验证已获得的基因序列(YP1977)是否属于subtilisin-like protease基因家族成员。方法:(1)提取贵阳腐霉总RNA,以已获得的序列(YP1977)为模版设计引物,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术扩增Pr1基因ORF片段;(2)构建含有Pr1基因ORF序列、绿色荧光蛋白基因ORF序列的重组质粒pTWIN1-Pr1-EGFP,转化表达菌株***2566,IPTG诱导菌株表达Pr1蛋白酶。结果:成功构建含有Pr1基因ORF序列、绿色荧光蛋白ORF序列的重组质粒pTWIN1-Pr1-EGFP,实现了Pr1基因在大肠杆菌中的活性表达。结论:证明已获得的DNA序列是贵阳腐霉的一个Pr1基因的编码区。

摘要：目的:探索医学生物技术专业细胞生物学设计性实验的教学方法。方法:开设"中药或保健食物对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力影响"的设计性实验,采用问卷调查方式,对教学效果进行评价。结果:教学效果良好,学生实验设计、操作和分析能力提高。结论:设计性实验在一定程度上有利于学生综合素质的培养,实施过程需要逐渐完善。

摘要：目的 :分离和克隆灭蚊真菌卡地腐霉 (Pythiumcarolinianum)Pr1蛋白酶 (subtilisin likeprotease)的cDNA片段。方法 :用 1%的几丁质悬液诱导培养卡地腐霉菌丝 30h ,然后按下述流程操作 :抽提菌丝的总RNA ;逆转录合成cDNA第一链 ;根据Pr1的保守氨基酸序列设计合成一对简并引物 ,以cDNA第一链为模板 ,用MOPAC方法 (MixedoligonucleotidesprimedamplificationofcDNA)扩增cDNA ;将扩增产物纯化、连入pGEM T载体 ,转化大肠杆菌DH5α用于测序。结果 :所获片段中 ,1个 5 30bp的cDNA片段与枯草杆菌类蛋白酶基因有较高的相似性 ,尤其与真菌Aphanomycesastaci (卵菌纲、水霉目 )的Pr1在核苷酸序列及翻译得到的氨基酸序列水平有较高的相似性 ,分别为 5 9%和 4 9%。此序列已登录Genbank数据库 ,检索号 :AF4 990 0 6。P .car olinianum与A .astaciPr1部分cDNA序列的比对亦登录Genbank数据库 ,检索号 :AY0 94 976 ,AY0 94 977。结论 :这一DNA片段可能是卡地腐霉Pr1蛋白酶的一条cDNA片段。更进一步的工作是设法获得全长cDNA片段 ,并加以证实。

摘要：毕业论文作为本科教学过程中的一个重要环节,具有不可替代的作用。以环带库蚊ISSR-PCR反应体系建立及优化为例,从毕业论文的选题、可行性分析、实验准备及实验研究等方面介绍贵阳医学院生物技术专业毕业论文实验的设计过程。学生顺利完成本科毕业论文实验,建立了环带库蚊稳定的ISSR-PCR反应体系,为今后系统研究环带库蚊的种群遗传多样性奠定了基础,达到了生物技术专业本科毕业论文实践教学的目的。

摘要：　对我国三带喙库蚊、环带库蚊和伪杂鳞库蚊共计79只蚊虫的28SrRNA基因5′端序列进行测定,获得的序列长度为301bp,3蚊种的该段序列相同。为设计杂鳞库蚊复组近缘种的PCR鉴别方法打下基础。

摘要：目的:克隆致倦库蚊Cecropins基因序列,并进行生物信息学分析。方法:选取致倦库蚊成虫,提取其DNA并以此为模板,设计一对引物,采用PCR技术扩增出Cecropins基因,应用相关生物信息学软件分析其序列。结果:克隆出致倦库蚊Cecropins基因,并测定其扩增产物序列,经同源对比确认,进行了相关序列分析。结论:获得致倦库蚊Cecropins基因序列,基因长度为259bp,与尖音库蚊一致性为97%。

摘要：目的:实现旷场实验行为学视频的自动分析。方法:应用Matlab程序设计软件结合数字图像处理方法实现帕金森病小鼠模型组及正常对照组旷场实验行为学视频的分析,绘制运动轨迹图,对比两组小鼠自主运动行为的改变。结果:旷场实验行为学视频系统快速、有效的绘制出小鼠运动轨迹图,并计算出小鼠运动距离,证实模型组小鼠运动距离较正常组显著降低。结论:旷场实验行为学分析系统方便、快捷且准确,可进一步推广至其它的行为学视频分析。

摘要：目的探讨靶向白色假丝酵母菌分泌型天冬氨酸蛋白酶(SAP)的小分子干扰RNA(siRNA)对白色假丝酵母菌SAP的基因表达影响,以期为RNA干扰技术抑制真菌毒力提供实验基础。方法设计并合成SAP靶向的siRNA,用醋酸锂转染白色假丝酵母菌,试验设空白对照组、错义对照组、SAP siRNA组,采用RT-PCR测定转染后白色假丝酵母菌SAP mRNA表达水平,制备BSA培养基测定天冬氨酸蛋白酶活性及小鼠毒力实验。结果与空白对照组、错义对照组相比,转染48h后,siRNA组白色假丝酵母菌中SAP mRNA表达明显下调为(0.51±0.05),siRNA组天冬氨酸蛋白酶活性PA值为(0.84±0.04)均高于空白及错义对照组,小鼠30d死亡率显著降低为20.0%。结论化学合成的靶向SAP siRNA能够下调白色假丝酵母菌中SAP基因的表达,降低白色假丝酵母菌的毒力,该实验为进一步研究应用RNA干扰技术抗真菌治疗奠定基础。

摘要：医学微生物学的课堂教学和课后辅导策略主要包括以下内容:实行以案例教学法为主的多种教学方法的理论课教学;结合案例教学法的综合性、设计性实验的实验课教学;以互动网络平台为主的课后辅导方式;综合考评学生总成绩,以此提高教学效率和质量,培养和提高学生应用理论知识解决实际问题的能力,培养具有创新性素质医学人才。

摘要：目的探索灭蚊真菌***1938菌株凝胶剂剂型的制备方案。方法根据蚊虫的变态发育特点和***1938菌株的生物学特性,结合保藏、运输和使用的便捷性,以含海藻糖抗逆保护剂的1/2KPYG2定型固体培养基为载体、以菌丝体为活性物质,加工制成"菌丝体-1/4KPYG2凝胶剂"新剂型,在实验室和模拟野外环境下观察其灭蚊效果。结果在实验室和模拟野外环境,每100ml水体使用2块1.51.5×1.0cm3凝胶剂,7d致倦库蚊幼虫致死率均可达到28%。4～8℃条件下凝胶剂品相稳定,储存6个月药效无明显变化。结论 ***1938菌株"菌丝体-1/4KPYG2凝胶剂"具有杀灭蚊幼虫作用。该凝胶剂生产工艺简单,独立包装,贮存方便,使用时不需要专用器械,拆开包装袋直接投放或捏碎后投入水体中,不污染环境,具有较好的应用前景。