摘要：背景与目的:据报道,肿瘤患者在急性感染后可出现肿瘤症状显著改善、肿瘤完全消退的现象。链球菌OK-432菌苗对多种动物肿瘤有显著抑制作用,并已试用于临床肿瘤治疗,除有发热与白细胞数升高外,无其他副作用。本研究旨在探讨三联菌苗对荷肉瘤180(S180)小鼠血清白介素12p70(IL-12p70)含量的变化及S180生长的影响,以及血清IL-12(p70)含量的变化与S180生长的关系。方法:所有实验小鼠接种S180后,按完全随机设计分成5组(即金黄色葡萄球菌菌苗组,A组、鼠伤寒沙门氏菌菌苗组,B组、草分枝杆菌菌苗组,C组、由前3种菌组成的三联菌苗组,D组、空白对照组,E组)进行实验。称重法检测各菌苗对小鼠S180的抑瘤率,ELISA法检测菌苗对S180小鼠血清IL-12(p70)的含量。结果:A、B、C组小鼠平均S180瘤重分别为1.39、1.50、1.36g,而D组小鼠的平均瘤重最低(0.62g),E组平均瘤重最高(2.40g)。各组小鼠S180重量的差异有非常显著性(F=66.73,P0.05;F=1.89,P>0.05)。A、B、C组的抑瘤率分别为42.08%、37.50%、43.33%,D组抑瘤率为74.17%。D组小鼠血清IL-12(p70)的平均含量最高(19.44pg/ml),A、B、C组IL-12(p70)的平均含量分别为11.88、10.35、11.68pg/ml,E组的最低(4.45pg/ml);各组小鼠血清IL-12(p70)含量的差异有显著性(F=15.76,P0.05),而其余任何两组均数比较,差异均有显著性(q检验,P<0.01)。结论:实验所选用的菌苗能诱导小鼠产生IL-12(p70)、抑制小鼠S180的增长,三联菌苗比单价菌苗的效果更好。

摘要：实验教学是药学专业知识的重要补充。为了使药学专业本科生成为教学科研型人才,在药学专业课程实验教学中,建立以学生探究性学习为主体,教师引导,以学生自主设计性实验为核心,以培养学生的科研素质为目标的研究性实验教学模式,使实验教学达到新的层次。

摘要：背景:通过体外培养人角膜缘干细胞并进行传代、建系研究可为角膜缘干细胞移植的基础与临床研究提供足够的细胞储备。目的:探讨一种体外培养人角膜缘干细胞传代、建系的方法。设计:随机对照观察。单位:赣南医学院。材料:实验于2003-06/2004-04在赣南医学院科研中心与中山大学医学院眼科医院国家重点实验室完成。新鲜人角膜缘组织块分别取自2名健康人角膜组织供体,均经过供体者知情同意。RPMI-1640(SigmaR8755,含L-谷氨酰胺),200g/L胎牛血清(Gibco16140-071)。DMEM培养基、硫酸软骨素、人表皮生长因子购自美国Sigma公司,HEPES、DMSO购自美国Gibco公司,100%甘油购自上海运佳黄浦制药有限公司,戊二醛购自德国***公司,乙醇、盐酸、丙酮、甲醛等购自北京化学试剂公司,0.25%胰蛋白酶液购自上海新华制药厂,上述试剂均为分析纯级。方法:人角膜缘深部色素区组织块经消化后,分别在含有RPMI-1640、200g/L胎牛血清的培养瓶与以羊膜细胞外基质为培养载体的培养皿中进行体外培养。光镜及扫描电镜观察原代及传代培养细胞的生长情况;采用台盼蓝排斥实验计算冻存细胞逐代冻存处理后的复苏率。主要观察指标:①人角膜缘干细胞体外原代及传代培养观察结果。②细胞冻存复苏率。结果:①原代培养结果:经PRMI-1640培养基中培养1d后,倒置相差显微镜下可见培养瓶中细胞多已贴壁,均匀稀疏排列成单层并贴于培养瓶底部。②传代培养结果:传第2代时添加人表皮生长因子后,细胞分散成单层,贴壁生长旺盛。所有细胞传至第30代后形态的变异性增加明显,细胞体积明显增大,形态呈圆形或不规则圆形,密集成群。在培养液中传33代后,细胞仍然保持旺盛的分化、增殖能力,并且更适宜在羊膜细胞外基质上生长。③细胞冻存复苏率:冻存细胞的复苏率为82.2%。结论:将人角膜缘干细胞经体外培养33代并逐代冻存后初步建立了人角膜缘干细胞系,人角膜缘干细胞更适合在含有羊膜细胞外基质为底物的培养基中生长。

摘要：目的:构建人类心脏特异性转录因子Nkx2-5、GATA-4的真核表达质粒,探讨Nkx2-5、GATA-4在心脏发育及先天性心脏病发病过程中的作用奠定基础。方法:以质粒人脑c DNA为模板,并设计上下游引物扩增Nkx2-5、GATA-4编码区序列。将真核表达载体pCDNA 3.1-HA、pCDNA 3.1-flag分别和Nkx2-5、GATA-4的PCR产物分别在双酶切后用T4连接酶连接,构建重组质粒pCDNA 3.1-HA-Nkx2-5、pCDNA 3.1-flag-GATA-4,转化至大肠杆菌,质粒抽提后经PCR、双酶切及测序鉴定。结果:成功设计引物扩增出Nkx2-5、GATA-4基因编码区约1 kbp及1.3 kbp的目的片段,PCR和酶切鉴定结果显示,构建的重组真核表达质粒中含有正确的Nkx2-5、GATA-4基因序列。结论:成功构建了含有Nkx2.5、GATA4的真核表达重组质粒,为后续研究奠定基础。