摘要：目的探讨沉默E-钙黏蛋白（cadherin）基因表达后对人喉癌Hep-2细胞增殖、迁移能力的影响，为喉癌的基因治疗提供理论依据。方法根据Genbank数据库中E-cadherin基因序列，设计、合成3条特异性短发卡RNA（shRNA）；脂质体法将shRNA转染人人喉癌Hep．2细胞；利用实时荧光定量PCR检测shRNA转染Hep-2细胞后对E-cadherin基因的沉默效果；四甲基偶氮唑盐法检测转染后Hep-2细胞体外增殖能力的变化，并计算细胞增殖率（生存率）；用Transwell实验检测转染后Hep-2细胞体外的迁移能力的变化。结果shRNA转染后，干扰组的E-cadherin基因表达比对照组低；干扰组Hep-2细胞的增殖能力较对照组强；Transwell实验中3个干扰组的穿膜细胞数均明显高于阴性对照组，差异均有统计学意义[（262±15）、（288±12）、（292±6）比（74±8）个，均P〈0．01]。结论RNA干扰沉默E-cadherin基因表达后能使Hep-2细胞的增殖、迁移能力明显增强。有望成为喉癌基因治疗的新靶点。

摘要：目的通过RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术沉默喉癌HeP-2细胞上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)的表达,探讨E-cadherin对Hep-2细胞增殖能力的影响。方法设计、合成特异性小干扰RNA(siRNA)和无基因沉默功能的阴性siRNA转染Hep-2细胞,获得下调E-cadherin基因表达的体外培养的Hep-2细胞;荧光定量PCR检测E-cadherin基因的沉默效果;体外细胞增殖实验(MTT)检测Hep-2细胞体外增殖能力的变化。结果①重组质粒和脂质体质量体积按1:1转染时,转染效率最高组siRNA-3达65%。②荧光定量PCR:重组质粒pRNAT-U6.1/Neo-siRNA1、pRNAT-U6.1/Neo-siRNA2、pRNAT-U6.1/Neo-siRNA3使E-cadherin mRNA的表达下调。以空白对照组为基准(设为1),E-cadherin相对于β-actin的改变倍数siRNA-1组=0.00092,siRNA-2组=0.00143,siRNA-3组=0.00045,阴性对照组=3.44898,差异有统计学意义。③MTT:经特异性siRNA处理的Hep-2细胞生长速度较对照组增快,差异有统计学意义。结论有效抑制Hep-2细胞E-cadherin mRNA的表达使Hep-2细胞的增殖能力增强。