摘要：目的构建存活素(SURVIVIN)基因的短发夹RNA(shRNA)表达质粒,为肺癌RNA干扰(RNAi)途径的基因治疗打下基础。方法设计并合成SURVIVIN短发夹结构模板序列,与穿梭载体重组质粒后转染人肺癌细胞A549,通过RT-PCR法筛选出抑制效果最强的质粒;MTT和Western blot法检测该质粒对细胞增殖和SURVIVIN表达的影响。结果构建和筛选出抑制作用最强的质粒;该质粒能明显抑制A549细胞的增殖和SURVIVIN的表达。结论在RNAi的介导下,SURVIVIN的表达被下调,为肺癌的基因治疗提供实验依据。

摘要：目的:构建存活素(survivin)基因短发夹RNA(shR-NA)的表达质粒,为乳腺癌RNAi介导的基因治疗打下基础.方法:设计并合成有小发夹结构的8条survivinshRNA对应模板序列,退火并与pShuttle 1.0-CMV载体重组质粒;将重组质粒转染人乳腺癌细胞MCF-7;MTT实验筛选出最有效质粒及其有效浓度,流式细胞术检测细胞周期的变化,经Hoechst染色观察凋亡情况,RT-PCR和Western Blot检测survivin基因的表达情况.结果:成功构建重组质粒并筛选出最有效质粒及其有效浓度;细胞受阻于G2/M期,并通过荧光染色发现有凋亡细胞;survivin基因表达受到抑制.结论:构建的重组质粒能抑制survivin基因的表达,这为研究乳腺癌RNAi介导的基因治疗打下基础.