摘要：目的构建GAD65基因特异的siRNA并检测体外功能。方法应用RT-PCR方法克隆大鼠GAD65基因、测序、重组病毒包装检测体外功能。针对GAD65基因的编码区,设计3条siRNA片段及一条对照片段,将其分别亚克隆于siRNA的慢病毒表达载体并小量包装获得病毒颗粒(LV-GFP-siRNA-r GAD65);用siRNA病毒颗粒感染GAD65过表达的293细胞,检测GAD65表达情况,从中筛选出高效特异的siRNA。大量包装特异的siRNA病毒颗粒,在体外感染培养的大脑皮质细胞,在体内注射到SD大鼠的苍白球内侧部,检测r GAD65的表达水平,观察siRNA的功能。结果应用RT-PCR方法克隆r GAD65基因,其序列与Gen Bank中的基因序列几乎一致(99.72%),包装病毒后在293细胞中过表达。筛选出针对r GAD65的高效特异的siRNA,在GAD65基因的沉默效率可达到66%。在体外、体内分别应用Western印迹检测感染了LV-GFP-siRNA3-r GAD65的大脑皮质细胞和定点注射了LV-GFP-siRNA3-r GAD65的大鼠GPi。结论成功克隆r GAD65基因,设计、筛选出高效特异的siRNA,并证明这种siRNA在体内和体外均能有效地沉默r GAD65的表达。

摘要：目的探讨乳腺癌改良根治术手术切口与术后并发症的相关性。方法选2005年2月～2009年5月我院手术治疗258例乳腺癌患者,全部行Anchincloss法改良根治术,其中158例(61.24%)采用Stewart横行切口,100例(38.76%)采用Halsted纵切口,观察术后皮下积液、皮瓣坏死及淋巴水肿情况。结果 158例采用Stewart横行切口手术患者,35例(22.16%)并发皮下积液,22例(13.92%)并发皮瓣坏死,18例(11.39%)并发淋巴水肿;100例采用Halsted切口手术患者,39例(39.00%)并发皮下积液,30例(30.00%)并发皮瓣坏死,43例(43.00%)并发淋巴水肿。Stewart横行切口与Halsted纵切口并发症的发病率比较,差异均有统计学意义(皮下积液:χ2=8.498,P<0.05;皮瓣坏死:χ2=9.835,P<0.05;淋巴水肿:χ2=33.889,P<0.01)。结论采用Stewart横行切口行乳腺癌改良根治术可明显减少术后皮下积液、皮瓣坏死及淋巴水肿等并发症。横切口较纵切口有更多的优点,应作为乳癌改良根治术的首选切口方式。

摘要：目的：探讨不同午睡情况下夜间睡眠时长与2型糖尿病（T2DM）发病的关系。方法采用病例对照研究法。病例为2009年9月至2011年3月收集的新发T2DM患者，年龄40～78岁。对照为同期住院非糖尿病（DM）患者，年龄与患者相同。以1∶1匹配。病例与对照各348例，采用自行设计的调查表对研究对象进行访谈式问卷调查。采用分级分析χ^2检验计算出不同睡眠时长组与7 h／晚组的关系，采用多元条件Logistic回归分析计算各组OR值和95％CI。结果与睡眠7 h／晚组相比，全部研究对象中，夜睡≤5 h／晚组和＞8 h／组与T2DM相关性强于其他组（ OR≤5 h／晚＝5．615，95％CI 1．689～18．665；OR_＞8 h／晚＝2．387，95％CI：1．609～3．542），睡眠不足强于睡眠过长组。不午睡群体中，趋势与上述相同〔（OR_≤5 h／晚＝6．500，95％CI：1．127～37．484）；（OR_＞8 h／晚＝6．356，95％CI：1．749～23．098）〕。午睡群体中仅夜间睡眠＞8 h／晚组差异有统计学意义（P＝0．001， OR_＞8 h／晚＝2．042，95％CI：1．336～3．119）。结论夜间睡眠时间过短（≤5／晚，6 h／晚）或过长（＞8 h／晚）均可增加T2DM的发病风险，夜间睡眠时长与T2DM发病呈U型关系，睡眠不足相对睡眠过长危害更大，不午睡群体这种趋势更明显；午睡群体，夜睡时间过长（＞8 h／晚）增加T2DM发病风险，睡眠不足及正常者差异不明显。

摘要：背景:目前已有将体外培养的骨髓基质细胞与支架复合修复骨缺损的临床报道。但是由于该类复合材料中缺乏骨生长因子作用,在原位的成骨作用并不十分理想。目的:探讨携带人骨形态发生蛋白2基因的骨髓基质细胞复合生物活性玻璃陶瓷材料在修复兔颅骨缺损中的原位成骨作用。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005-02/2008-11在辽宁医学院解剖学实验室完成。材料:生物活性玻璃陶瓷由中国科学院四川成都光电研究所提供,转人骨形态发生蛋白2和转pcDNA3载体的骨髓间充质干细胞由辽宁医学院解剖学教研室骨组织工程研究所保存。方法:制备兔双侧颅骨骨缺损模型,将基因转染的骨髓基质细胞与生物活性玻璃陶瓷复合培养物植入骨缺损区,术后第4,8,12周对植骨区进行大体观察、X射线摄片、组织切片、组织化学检测。主要观察指标:①复苏后的转染人骨形态发生蛋白2的骨髓基质细胞的生长特性。②从大体、X射线结果和组织学等方面观察复合材料在原位修复骨缺损的作用。结果:转染的骨髓基质细胞在细胞形态及增殖特性方面与未转染的细胞无明显差异。扫描电镜显示基因转染的骨髓基质细胞在生物活性玻璃陶瓷表面呈星形紧密排列,长入生物活性玻璃陶瓷孔隙中。复合材料植入免颅骨缺损后,X射线观察术后第4周骨缺损外周骨质与复合材料之间大部分被高密度阴影充填,术后第12周骨缺损外周骨质与复合材料之间完全被高密度阴影充填;光镜观察术后第8周骨小梁大部分相连成片,术后第12周骨小梁粗大,骨髓再生。结论:基因转染的骨髓基质细胞复合生物活性玻璃陶瓷材料基本符合骨组织工程学的要求,在骨缺损区原位具有良好的成骨作用。

摘要：《关于加强高等学校本科教学工作提高教学质量的若干意见》指出：高等学校要重视本科教学的实验环节,要增加综合性与创新性实验,积极推动研究性教学,提高大学生的创新能力。验证性教学为主的传统实验教学模式忽视了对大学生的创新能力的培养,因而,在高等医学院校学生中实行设计性实验教学,是目前深化教学改革和培养具有开拓能力与创造能力医学人才的需要。