摘要：背景:CTLA-4lg的制备过程比较复杂,单克隆抗体的价格比较昂贵,而且应用CTLA-4lg单克隆抗体注射本身存在着血浆药物浓度不稳定的问题。目的:探讨Ctla4lg表达质粒构建的可行性。设计、时间及地点:基因水平观察实验,于2005/2006在中国医科大学中心实验室完成。材料:雄性Wistar大鼠10只,近交系昆明小鼠10只。方法:提取Wistar大鼠总RNA,反转录成cDNA第1链,PCR扩增CTLA4基因,将其和真核表达载体pcDNA3酶切、连接。转化感受态菌DH5α,培养后挑取阳性克隆、提取质粒,酶切鉴定重组子、测序,最后转染近交系昆明小鼠,应用Westen Blot法检测血清CTLA4lg水平。主要观察指标:构建的Ctla4lg表达质粒基因序是否正确以及能否在小鼠体内进行蛋白表达。结果:对含有pcDNA3-CTLA4质粒的LB菌液进行鉴定测序,目的基因片断大小为288bp,与Genebank上公布的CTLA4序列完全一致,质粒构建正确。利用阳性脂质体载体包被pcDNA3-CTLA4lg转染小鼠,有3只在第7天血清检测CTLA4Ig阳性,显示pcDNA3-CTLA4lg能够在鼠肌细胞内表达。结论:利用基因合成和重组技术成功构建了真核表达载体pcDNA3-CTLA4Ig,利用脂质体法成功的将pcDNA3-CTLA4lg转染到鼠肌细胞内并进行表达。

摘要：传统的碳酸氢钠(NaHCO3)一直是治疗代谢性酸中毒的首选缓冲液。但是这一治疗方法能引起血液高渗状态，高钠血症，PaCO2增高，以及由此易引起细胞内及脑细胞内酸中毒，致脑水肿的危险。由于缓冲作用出现的缓慢，常以碳酸氢钠滴定曲线上看到代谢性酸中毒矫正过度。Tris缓冲液做为一种可选的药物被推荐，从而解决许多问题。另一方面，由于Tris缓冲液的局部刺激作用，有发生周围静脉血栓形成及血栓性静脉炎的危险。为了克服这些危害，设计了由Tris醋酸盐、碳酸氢盐和磷酸盐组成一种新的混合液(以下简称Tris混合液)。本研究表明：该混合液有充分的缓冲作用，解决了缓冲代谢酸中毒中诸多问题。虽然新的Tris混合液的钠含量只有纯NaHCO3的1/3，但它在血液中的缓冲作用却与0.5mol/L的NaHCO3相等。应用该溶液还可以对脑脊液和骨骼肌起可预测性的缓冲作用。这一临床证明：新的Tris混合液能引起充分的和理想的缓冲作用，而无明显的副作用。

摘要：目的评价国产卡培他滨片与原研卡培他滨片在恶性肿瘤患者体内的生物等效性。方法采用多中心、随机、开放、两周期、双交叉的餐后试验设计,84例可适用含卡培他滨片化疗方案的实体瘤患者随机分别口服国产与原研卡培他滨片剂,每周期服药1次,单次给药1250 mg·m^-2,按照体表面积计算向下调整至0.5 g的整倍数片剂,给药两周期间清洗期为12 h。用液相色谱-质谱(LC-MS/MS)法测定血浆中卡培他滨浓度,进行生物等效性研究。结果实体瘤患者餐后服用卡培他滨片受试制剂和参比制剂后的药代动力学参数如下:Cmax分别为(3940±2300),(4040±2900)ng·mL^-1;AUC0-t分别为(4820±1620),(4750±1700)h·ng·mL^-1;AUC0-∞分别为(4870±1680),(4970±1750)h·ng·mL^-1。2种药物的Cmax、AUC0-t、AUC0-∞的几何均数比相对应的90%置信区间均在80.00%~125.00%。结论恶性肿瘤患者餐后口服卡培他滨片受试制剂和参比制剂具有生物等效性,且受试制剂和参比制剂不良事件发生情况相似。